河北省卫生厅科研基金(20110460)
- 作品数：10 被引量：87H指数：5
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- RNA干扰技术抑制锌指蛋白139对胃癌原位移植裸鼠血清的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察抑制人胃癌细胞株SGC7901中锌指蛋白139（ZNFl39）表达对胃癌原位移植裸鼠血清蛋白质的影响，探讨ZNFl39参与胃癌进展的机制。方法构建针对ZNF139的小干扰RNA（siRNA）重组质粒并导入胃癌细胞SGC7901；G418筛选出稳定转染细胞克隆并经皮下瘤鼠间传代6代后应用OB生物胶粘贴法进行原位移植；应用荧光双向差异凝胶电泳（2D—DIGE）及液质联用（LC—MS）技术鉴定差异蛋白点，并应用Westernblot法验证鉴定出的部分蛋白质。结果胃癌原位移植裸鼠成瘤率100％（15／15）。siRNA重组质粒抑制了ZNFl39在SGC7901中的表达，siRNA—ZNFl39组胃癌原位移植裸鼠瘤体生长明显减慢。在转染组和对照组原位移植裸鼠血清中鉴定出5种差异蛋白质，抑制ZNFl39后表达下调的为载脂蛋白E（APOE）、激肽原1（KNGl），表达上调的有α2-巨球蛋白（α2-MG）、线粒体转录终止因子（mTERF）、DIXDCl。Westernblot法对KNG1、mTERF、APOE的表达进行了验证，结果与蛋白质组学一致。结论ZNF139可能通过促进血清APOE、KNGl及抑制mTERF的表达来参与胃癌进展。
- 范立侨李勇赵群檀碧波陈茂良王冬赵雪峰郝英杰
- 关键词：蛋白质组学
- 胃癌区域转移淋巴结中锌指蛋白139与基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-7、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的关系及意义被引量：18
- 2013年
- 目的检测锌指蛋白139（ZNF139）与基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-7、基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1在胃癌原发灶、区域淋巴结转移灶中的表达，并探讨其意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）及免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测46例进展期胃癌患者的原发灶和淋巴结转移灶中ZNF139、MMP-2、MMP-7、TIMP-1mRNA和蛋白水平。结果胃癌区域淋巴结转移灶中ZNF139、MMP-2、MMP-7mRNA表达分别为0．63±0．09、0．75±0．11、0．73±0．11，蛋白阳性率分别为80．43％、84．78％、86．96％，均明显高于原发灶的mRNA（0．32±0．05、0．27±0．04、0．21±0．03）和蛋白阳性率（54．35％、52．17％、58．70％）；而转移灶TIMP-1mRNA（0．63±0．09）和蛋白阳性率（43．48％）则明显低于原发灶（1．24±0．18、78．26％，P〈0．05）。ZNF139与MMP-2、ZNF139与MMP-7的在原发灶中mRNA表达均呈正相关（r分别为0．3258、0．3446，P〈0．05），ZNF139与TIMP-1无明显相关（P〉0．05）；ZNF139与MMP-7在淋巴结中mRNA表达水平呈正相关（r=0．3866．P〈0．05），而ZNF139与MMP-2、ZNF139与TIMP-1无明显相关（P〉0．05）。结论ZNF139可能通过调节部分侵袭相关基因的表达参与了胃癌的侵袭转移。
- 檀碧波李勇赵群范立侨刘小慧焦志凯赵雪峰郝英杰
- 关键词：胃癌
- 人胃癌耐药细胞株中锌指蛋白139和多药耐药基因表达的关系及意义被引量：5
- 2013年
- 背景与目的:研究发现锌指蛋白139(ZNF139)在胃癌中表达异常,但ZNF139与胃癌的多药耐药性(multidrugresistance,MDR)关系尚不明确。本研究检测了人胃癌细胞株SGC7901和耐药细胞株SGC7901/ADR中ZNF139和MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π的mRNA和蛋白表达情况,并对其表达关系和意义进行分析。方法:体外培养SGC7901、SGC7901/ADR,逆转录-聚合酶连反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测两种细胞ZNF139和MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA表达情况,采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测各基因蛋白表达变化情况。合成针对ZNF139的小干扰RNA(siRNA-ZNF139)重组质粒并转染SGC7901/ADR,检测转染前后SGC7901/ADR中MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π表达的变化。结果:SGC7901和SGC7901/ADR两种细胞中均有ZNF139、MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA和蛋白阳性表达,SGC7901/ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA和蛋白表达均明显高于SGC7901细胞(P<0.05)。转染siRNA-ZNF139后SGC7901/ADR细胞中ZNF139表达明显受到抑制,MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π表达也明显降低(P<0.05)。结论:ZNF139通过上调MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π基因表达而参与胃癌多药耐药形成。
- 李勇赵群檀碧波范立侨刘庆伟焦志凯赵雪峰郝英杰
- 关键词：胃癌多药耐药性
- 人胃癌耐药细胞株中锌指蛋白139和MMP-2、MMP-7、细胞间黏附因子1的表达及其意义被引量：6
- 2013年
- 本研究拟通过检测人胃癌细胞株SGC7901及耐药细胞株SGC7901／ADR中锌指蛋白139（zincfingerprotein139，ZNFl39）与侵袭相关基因基质金属蛋白酶2（matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）、MMP-7、细胞问黏附因子1（intercellularadhesionmolecule1，ICAM-1）的表达，了解侵袭相关基因与胃癌多药耐药性的关系，并探讨ZNF139在其中发挥的作用。
- 李勇赵群檀碧波范立侨刘庆伟焦志凯赵雪峰郝英杰
- 关键词：细胞间黏附因子1人胃癌细胞株耐药细胞株MMP-7锌指蛋白MMP-2
- 奥沙利铂联合卡培他滨新辅助化疗方案对进展期胃癌手术切除率及预后的影响被引量：35
- 2013年
- 目的 探讨奥沙利铂联合卡培他滨新辅助化疗对进展期胃癌的治疗效果及其作用机制.方法 采用随机数字表法将85例ⅡB～ⅢC期胃癌患者随机分为新辅助化疗组（40例）和单纯手术组（45例）.新辅助化疗组化疗后均接受开放手术治疗,单纯手术组则直接行手术治疗.比较两组患者的R0切除率、总生存时间和无病生存时间.流式细胞术检测肿瘤细胞的细胞周期和凋亡率.Western blot法检测肿瘤细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、p21、p53、survivin蛋白的表达.结果 新辅助化疗的总有效率为32.5％,肿瘤控制率为90％,不良反应发生率低.新辅助化疗组患者的R0切除率为87.5％,高于单纯手术组（73.3％,P＜0.05）.新辅助化疗组患者的平均总生存时间为25.4个月,单纯手术组为22.8个月（P =0.376）.新辅助化疗组患者的平均无病生存时间为24.4个月,单纯手术组为19.9个月（P =0.155）.流式细胞术检测结果显示,新辅助化疗组和单纯手术组肿瘤细胞处于G0/G1期的比例分别为（77.59±4.36）％和（72.04±4.02）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.新辅助化疗组和单纯手术组S期细胞的比例分别为（12.54±2.93）％和（17.80±2.96）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.新辅助化疗组和单纯手术组肿瘤细胞的凋亡率分别为（15.67 ±2.84）％和（7.89±1.03）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测结果显示,新辅助化疗组肿瘤细胞中PCNA、survivin蛋白的表达明显低于单纯手术组,而p21、p53蛋白的表达高于单纯手术组（均P＜0.05）.结论 奥沙利铂联合卡培他滨新辅助化疗可以明显提高进展期胃癌R0切除率,延长患者的生存时间,其作用机制可能与药物抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡有关.
- 赵群李勇檀碧波田园焦志凯赵雪峰张志栋王冬杨沛刚
- 关键词：新辅助化疗预后分子作用机制
- 粉防己碱对人胃癌耐药细胞锌指蛋白139、多药耐药基因表达的影响被引量：17
- 2014年
- 目的探讨粉防己碱(tetrandrine,TET)对胃癌细胞及耐药细胞中锌指蛋白139(zinc finger protein139,ZNF139)及多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因的影响。方法 MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/mL)TET对胃癌细胞SGC7901、SGC7901/ADR细胞株的抑制作用;通过RT-PCR法检测TET作用前后SGC7901/ADR细胞内ZNF139、MRP-1、MDR1、GST-π表达情况,以Spearman相关分析检验ZNF139与各多药耐药因子之间关系并计算相关系数。结果 MTT结果显示,2.0μg/mL及以下浓度TET对SGC7901、SGC7901/ADR两种细胞的抑制率均<10%;在SGC7901/ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1、GST-πmRNA表达高于SGC7901细胞(均P<0.05);TET能抑制SGC7901/ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1、GST-πmRNA的水平(均P<0.05);TET作用前SGC7901/ADR细胞中ZNF139与MRP-1、MDR1存在相关关系,作用后这种相关性仍存在(均P<0.05)。结论 TET可能通过抑制ZNF139下调、MDR1、MRP1的表达从而逆转胃癌耐药细胞MDR表型。
- 李勇赵群檀碧波范立侨刘庆伟焦志凯赵雪峰郝英杰
- 关键词：胃癌粉防己碱多药耐药
- 胃癌凋亡相关蛋白Survivin、B淋巴细胞／白血病-2、bax表达与肿瘤细胞体外化疗药敏性的关系被引量：11
- 2012年
- 目的探讨胃癌凋亡相关蛋闩表达与体外化疗药敏性的关系。方法对64例胃癌标本进行Survivin、B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、bax免疫组织化学染色，并以噻唑蓝（MTF）比色法检测体外化疗药物敏感性。结果肿瘤Smwivin、bcl-2、bax阳性表达率分别为90．6％、75．0％、68．8％；Survivin与bax、bcl-2与bax间表达强度均呈负相关（r=-0．45044、-0．41403，P〈0．01）。在耐药因子表达程度与药物对肿瘤细胞抑制率的关系中，Smwivin强表达时，表阿霉素（eADM）、顺铂（DDP）对肿瘤细胞的抑制率明显降低（P〈0．05），但奥沙利铂（L—OHP）对肿瘤细胞的抑制率明显增加（P〈0．05）；bcl-2强表达时，5-氟尿嘧啶（5-FIJ）、紫杉醇（PTX）、eADM对肿瘤细胞的抑制率明显低于弱表达组（P〈0．05）；bax强表达组中，5-Fu、eADM、L—OHP和甲氨喋呤（MTX）对肿瘤细胞的抑制率明显高于弱表达组（P〈0．05）。结论胃癌凋亡相关蛋白表达与部分化疗药物敏感性有关。
- 檀碧波李勇范立侨赵群刘羽赵雪峰
- 关键词：多药耐药性凋亡相关蛋白体外药敏实验
- 人胃癌细胞原位移植裸鼠原发灶与肝转移灶体外化疗药敏性差异被引量：4
- 2013年
- 目的:比较人胃癌原位移植裸鼠肝转移模型原发灶、肝转移灶肿瘤细胞对化疗药物敏感性。方法:将裸鼠皮下传代的SGC-7901细胞株实体瘤组织块移植于裸鼠胃壁,建立人胃癌裸鼠原位移植模型,待其发生肝转移后取胃原发灶、肝转移灶肿瘤细胞,SRB法检测肿瘤细胞对氟尿嘧啶(5-FU),顺铂(CDDP),奥沙利铂(L-OHP),表阿霉素(eADM),丝裂霉素(MMC),长春新碱(VCR),氨甲喋呤(MTX)7种化疗药物的体外敏感性。结果:成功建立裸鼠原位移植胃癌转移模型,肿瘤原位移植成瘤率100%,肝转移率75%;7种药物中L-OHP,VCR对原发灶肿瘤细胞的抑制率高于肝转移灶,而eADM,MMC对肝转移灶肿瘤细胞的抑制率高于原发灶(均P<0.05);5-FU,L-OHP,MTX对原发灶与肝转移灶的抑制率具正相关性(r=0.5203;0.4424;0.3851,均P<0.05)。结论:胃癌原位移植动物的原发灶和肝转移灶细胞的对化疗药物药敏性存在差异,以原发灶药敏检测结果指导针对肝转移灶的治疗可能是不准确的。
- 范立侨李勇赵群檀碧波孙川李兆星王冬刘羽
- 关键词：肿瘤移植药物筛选试验
- 胃癌组织ZNF139与RUNX3基因甲基化相关性及其生物学意义探讨被引量：1
- 2013年
- 目的:检测胃癌组织中钙指蛋白139(znic finger protein 139,ZNF139)基因的表达和RUNX3基因的甲基化状态,探讨两者之间的相关关系及其生物学意义。方法:对55例胃癌组织及相应的癌旁组织采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ZNF139mRNA的表达情况,甲基化特异性PCR技术检测RUNX3基因的甲基化状态,分析两者之间的相关性。结果:ZNF139在胃癌组织中表达(0.659 2±0.229 1)明显高于癌旁组织(0.354 0±0.083 6),t=9.281,P<0.001;胃癌组织ZNF139表达与肿瘤大小有关,t=2.453,P=0.017;与分化程度有关,t=5.162,P<0.001;与浸润深度有关,t=4.145,P<0.001;与淋巴结转移有关,t=4.279,P<0.001。胃癌组织Runx3甲基化率为54.55%,明显高于癌旁组织(7.27%),χ2=28.778,P<0.001;胃癌组织Runx3基因的甲基化水平与肿瘤分化程度有关,χ2=3.911,P=0.048;与浸润深度有关,χ2=7.333,P=0.007;与淋巴结转移有关,χ2=10.530,P=0.001。发生Runx3基因甲基化的胃癌组织ZNF139表达强度(0.803 0±0.195 2)明显高于未发生Runx3甲基化的为胃癌组织(0.486 6±0.123 1),t=7.017,P<0.001,胃癌组织中Runx3基因的甲基化状态和ZNF139的表达强度呈明显正相关性,t=1.000,Kappa=0.707。结论:胃癌组织中存在ZNF139表达上调及Runx3基因甲基化率增高现象,且两者存在高度相关的一致性,提示ZNF139表达上调及Runx3基因甲基化可能通过协同作用参与了胃癌的进展及转移。
- 李勇范立侨赵群檀碧波安昭杰刘羽王冬张志栋
- 关键词：反转录聚合酶链反应甲基化特异性PCR
- 胃癌原发灶和区域淋巴结转移灶中ZNF139与MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π的表达及关系
- 2014年
- 本研究通过分析胃癌区域淋巴结转移灶与原发灶锌指蛋白139（zinc finger protein 139,ZNF139）、多药耐药相关蛋白-1 （multidrug resistance associated protein-1,MRP-1）、多药耐药基因1/P-糖蛋白（multidrug resistance gene 1/P-glycoprotein,MDR1/P-gp）、谷胱甘肽转移酶-π（glutathione-transferase-π,GST-π）的表达及其关系,为阐明ZNF139与胃癌多药耐药性（multidrug resistance,MDR）的关系提供依据.
- 李勇范立侨檀碧波赵群刘小慧李琰刘羽张志栋贾楠
- 关键词：MDR1/P-GPGST-Π原发灶MRP-1胃癌
