广东省自然科学基金(010616) 作品数:18 被引量:80 H指数:7 相关作者: 郭志刚 吴平生 李建华 赖文岩 杨永红 更多>> 相关机构: 南方医科大学南方医院 中国人民解放军总医院第一附属医院 北京军区总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
8-Br-cAMP对THP1细胞中ABCA1及单核细胞趋化因子的影响 2010年 目的以THP1细胞株为靶点,研究8-Br-cAMP对ABCA1、MCP-1基因mRNA和蛋白质表达及IL-1β蛋白质的影响,阐明ABCA1基因在AS及泡沫细胞形成中新的可能机制。方法复苏培养THP1细胞株,加入8-Br-cAMP(0.5mmol/L)刺激3、6、12、24 h,荧光定量RT-PCR和Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、MCP-1及IL-1βmRNA和蛋白表达量;用ABCA1的反义寡核苷酸(100 nmol/L)转染THP1细胞,给予上述8-Br-cAMP的刺激,同样的方法观察上述指标的改变。结果予8-Br-cAMP刺激后,THP1细胞中ABCA1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平及IL-1β蛋白质水平均增高;给予反义寡核苷酸转染后,8-Br-cAMP刺激后3、6 h ABCA1、MCP-1mRNA的表达降低,12、24 h ABCA1、MCP-1及IL-1β蛋白质的表达水平降低。结论在8-Br-cAMP刺激下,THP1细胞中ABCA1可增加炎症因子表达,参与AS的发生。 李建华 杨永红 贾军宏 郭志刚 吴平生关键词:ABCA1 动脉粥样硬化 单核细胞趋化因子 Ox-LDL对血管内皮细胞ABCA1及炎症因子表达的研究 被引量:1 2010年 目的:研究在致动脉粥样硬化(As)因子氧化低密度脂蛋白胆固醇(Ox-LDL)刺激下,人血管内皮细胞ECV304中ATP-结合盒转运子A1(ABCA1)对炎性细胞因子ICAM-1及IL-1β水平调节作用,阐明ABCA1基因在AS发生中的可能机制。方法:培养人血管内皮细胞株ECV304,加入Ox-LDL(30 ng/ml)刺激3、6、12、24 h,以荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测ABCA1、ICAM1 mRNA表达量,Western blot和酶联免疫吸附(ELISA)法检测ABCA1、ICAM1及IL-1β蛋白表达量;ABCA1的反义寡核苷酸(100 nmol/L)转染人血管内皮细胞,按相同方法给予Ox-LDL刺激细胞,同样的方法测定上述指标的改变。阴性对照为未加Ox-LDL刺激并同时培养的细胞。结果:与阴性对照组比较,人血管内皮细胞株ECV304在给予Ox-LDL刺激不同时间后,AB-CA1、ICAM-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白水平均增高;给予ABCA1反义寡核苷酸转染后各时间点ABCA1、ICAM-1mRNA表达均降低,ABCA1、ICAM-l及IL-1β蛋白表达水平也降低。结论:人管内皮细胞在Ox-LDL作用下,其ABCA1可能通过增加IL-1β的表达,促进炎症细胞因子ICAM-1释放,在AS的早期发生中发挥作用。 李建华 杨永红 贾军宏 郭志刚 吴平生关键词:人血管内皮细胞 炎症因子 动脉粥样硬化 Ox-LDL对主动脉平滑肌细胞中ABCA1及炎性因子表达的影响 被引量:1 2010年 目的研究氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导作用下,ATP结合盒转运子A1(ABCA1)对人主动脉平滑肌中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA和蛋白质及白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法复苏培养人主动脉平滑肌细胞CC2571、Ox-LDL(30μg/ml)刺激3、6、12、24h后,以荧光定量RT-PCR法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1mRNA表达,Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1β蛋白质表达;用AB-CA1的反义寡核苷酸抑制ABCA1表达后,观察上述指标的变化。结果予Ox-LDL刺激后,CC2571细胞中ABCA1、MCP-1、ICAM-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增加,反义寡核苷酸转染后3、6h时上述指标的mRNA表达降低,12、24h蛋白质表达降低。结论 Ox-LDL诱导主动脉平滑肌细胞炎性因子的表达,ABCA1可能通过增强上述炎性因子表达参与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生。 李建华 杨永红 贾军宏 郭志刚 吴平生关键词:ATP结合盒转运子A1 主动脉平滑肌细胞 炎性因子 8-溴-环磷酸腺苷对单核细胞株THP1中ABCA1及细胞间黏附分子的影响 2010年 目的观察8-Br-cAMP刺激下,单核细胞株THP1中ABCA1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及白介素-1β(IL-1β)mRNA和蛋白质表达的变化,阐明ABCA1基因在动脉粥样硬化(AS)形成中的可能机制。方法复苏培养THP1单核细胞,加入8-Br-cAMP(0.5mmol/L)刺激3、6、12、24h,设未加刺激同时孵育24h的细胞为阴性对照组;以荧光定量RT-PCR和Western印迹法及ELISA法检测ABCA1、ICAM-1及IL-1βmRNA和蛋白质表达量;用ABCA1的反义寡核苷酸(100nmol/L)转染THP1细胞,给予8-Br-cAMP刺激,同样的方法观察上述指标的改变。结果予8-Br-cAMP刺激后,THP1细胞中ABCA1、ICAM-1mRNA和蛋白质及IL-1β蛋白质表达均增高,给予反义寡核苷酸转染后氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)刺激3、6h上述指标的mRNA表达降低(P<0.01),12、24h蛋白质表达降低(P<0.01)。结论 THP1单核细胞中,8-Br-cAMP激活ABCA1不仅可增加细胞内胆固醇外运,还具有增加炎症因子表达的作用,在AS的发生中发挥双重作用。 李建华 杨永红 贾军宏 吴平生 郭志刚关键词:ABCA1 动脉粥样硬化 炎症因子 高密度脂蛋白受体在胆固醇逆转运中的作用机制及其意义 被引量:9 2004年 郭志刚 李建华 刘胜林 屠燕 赖文岩 王鹏关键词:高密度脂蛋白受体 胆固醇逆转运 动脉粥样硬化 高密度脂蛋白抗氧化作用及意义 被引量:4 2005年 血浆高密度脂蛋白除参与胆固醉逆向转运以外,还具有抗氧化等多种重要生理功能。高密度脂蛋白含有的载脂蛋白、磷脂、二乙基对硝基苯磷酸脂酶、血小板激活因子乙酰水解酶、卵磷脂胆固醇酰基转移酶以及清道夫受体BI、ATP结合转运子等其它蛋白成份,不仅具有螯合过渡金属离子、中断脂质氧化反应的作用,还具有摄取、转运、酶解等清除脂质氧化产物、凋节抗氧化剂的作用,因而可对抗脂质氧化修饰和动脉粥样硬化的发生。 王琦光 郭志刚关键词:高密度脂蛋白 低密度脂蛋白 氧化修饰 动脉粥样硬化 抗氧化作用 ABCA1基因启动子区-191G/C单核苷酸多态性在冠心病中的意义 被引量:8 2005年 目的研究ABCA1基因启动子区-191G/C单核苷酸多态性(SNP)对血脂的影响及其在冠心病中的意义。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)探讨204例冠心病患者和114例正常人的ABCA1基因启动子区-191位点G/CSNP在两组间、冠心病组不同临床表现型之间分布的差异及3种等位基因型与冠心病相关临床指标的关系。结果冠心病组与正常人组比较,3种等位基因型GG、GC、CC分布频率差异具有显著性,CC基因型在冠心病组中的分布频率明显高于正常人组(P<0.05),C等位基因在冠心病组中的分布频率明显高于正常人组(P<0.01)。在稳定性心绞痛组(SAP)和急性冠脉综合征组(ACS),3种等位基因型GG、GC、CC分布频率差异也具有显著性,ACS组CC基因型明显高于SAP组(P<0.05),C等位基因在ACS组中分布频率明显高于SAP组(P<0.01)。在冠心病组中,3种等位基因型间体重指数、总胆固醇、总甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇等临床指标的比较无显著性差异。结论ABCA1基因启动子区-191G/CSNP在不影响中国冠心病人群血脂水平的情况下增加冠心病的发生,C等位基因与冠心病的稳定性相关。 刘凌 郭志刚 王琦光 刘胜林 赖文岩 屠燕关键词:单核苷酸多态性 冠心病 血脂 ABCA1基因转录调节与胆固醇代谢及动脉粥样硬化的关系 被引量:10 2004年 ABCA1(ATP-bindingcassettetransporterA1)可利用ATP参与胆固醇和磷脂从细胞内转运至贫脂或无脂的apoA1,促进高密度脂蛋白(HDL)生成,并在胆固醇逆转运(RCT)中起重要作用。ABCA1受多种因素调节,其中以核受体超家族的转录调节最为重要。上调ABCA1表达增加RCT、提高HDL血浆浓度是防治动脉粥样硬化(AS)的一个新方向,特异性肝X受体(LXR)激动剂可能是抗AS新药的希望所在。 刘胜林 郭志刚 刘凌 李欣关键词:ABCA1基因 动脉粥样硬化 胆固醇逆转运 血管平滑肌细胞中ABCA1对炎症因子的调节及其意义 被引量:6 2010年 目的:观察在8-Br-cAMP作用下,ABCA1对血管平滑肌细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)mRNA和蛋白质及IL-1β蛋白质表达的影响,在细胞水平证实ABCA1对动脉粥样硬化(AS)的影响。方法:复苏培养人主动脉平滑肌细胞CC2571,8-Br-cAMP(0.5mmol/L)刺激3、6、12、24h后,荧光定量RT-PCR、Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1βmRNA和蛋白质表达量;用ABCA1的反义寡核苷酸(100nmol/L)抑制ABCA1的表达,观察8-Br-cAMP刺激下上述指标的改变。结果:予8-Br-cAMP刺激后,主动脉平滑肌细胞CC2571中ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增高,给予反义寡核苷酸转染后8-Br-cAMP刺激3、6h上述指标的mRNA表达降低,12、24h蛋白质表达降低。结论:在主动脉平滑肌细胞,ABCA1可增加8-Br-cAMP诱导的炎症因子表达,参与AS的发生。 李建华 杨永红 吴平生 郭志刚关键词:动脉粥样硬化 ABCA1 炎症因子 96例冠心病介入治疗患者ABCA1基因启动子区-477C/T单核苷酸多态性分析 被引量:1 2006年 目的研究ABCA1基因启动子区-477C/T单核苷酸多态性(SNP)与血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和冠心病的关系。方法用聚合酶链反应、限制性酶切法(PCR-RFLP)检测96例冠心病患者和100例正常人的ABCA1基因启动子区-477位点基因型,比较基因型在冠心病组与正常人组间、冠心病组中不同病变亚组之间分布的差异性及3种基因型与冠心病相关临床指标的关系。结果冠心病组与正常人组比较,3种基因型CC、CT、TT分布频率差异具有显著性。TT基因型、T等位基因在冠心病组中的分布频率明显高于对照组(P<0·05、P<0·01)。冠心病组中,急性冠脉综合征组TT基因型、T等位基因明显高于稳定性心绞痛组(P<0·05、P<0·01),多支病变组TT基因型明显高于单支病变组(P<0·05),TT基因型血浆HDL-C水平明显低于CC基因型(P<0·01)。结论ABCA1基因启动子区-477C/TSNP可显著影响中国冠心病者血浆HDL-C水平,而且与冠心病严重程度相关。 郭志刚 刘胜林 屠燕 李欣 刘凌关键词:ATP结合盒转运子A1 多态性 单核苷酸 基因 ABCA1 脂蛋白类