山东省教育厅科技计划(J05L10)
- 作品数：11 被引量：17H指数：3
- 相关作者：杨明峰孙保亮袁慧张颜波贾丽丽更多>>
- 相关机构：泰山医学院附属医院章丘市人民医院济宁医学院附属湖西医院更多>>
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- 银杏叶提取物促进大鼠蛛网膜下腔出血后血红素氧合酶-1表达被引量：7
- 2009年
- 目的探讨银杏叶提取物(EGb)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法实验采用健康Wistar大鼠,将动物随机分入非SAH组、SAH组、溶媒组、EGb1组(低剂量)、EGb2组(高剂量),EGb腹腔注射给予。非SAH组于枕大池注入0.3ml生理盐水;其余各组于枕大池注入自体动脉血溶血物0.3ml诱导SAH。将动物处死后取脑,用RT-PCR方法检测术后24h、72h皮层HO-1 mRNA,用免疫组化法检测术后72h海马HO-1蛋白的表达。结果在非SAH组大脑皮层未见HO-1 mR-NA表达;SAH组大鼠在诱导SAH后24h,大脑皮层HO-1 mRNA表达增加,72h进一步增加;在EGb1组和EGb2组,大脑皮层HO-1 mRNA表达更加明显,其中EGb2组的表达强度又高于EGb1组。非SAH组未见海马HO-1蛋白表达;SAH组在诱导SAH后72h海马可见HO-1蛋白明显表达;EGb1组和EGb2组海马HO-1阳性细胞和表达强度增加,以EGb2组更加明显。结论EGb对SAH后脑组织HO-1表达具有促进作用。
- 孙保亮曹明志杨明峰袁慧谢方民贾莉王轩贾丽丽
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑血管痉挛银杏叶提取物血红素氧合酶
- 吡哆醇对脑淋巴引流阻滞所致SAH后神经细胞凋亡加重的影响
- 2010年
- 目的探讨脑淋巴引流阻滞(CLB)对蛛网膜下腔出血(SAH)后神经细胞凋亡的影响和吡哆醇的缓解作用及相关机制。方法健康成年Wistar大鼠,随机分为正常对照组、SAH组、SAH+CLB组、SAH+CLB+吡哆醇组、SAH+CLB+生理盐水组。采用枕大池2次注血法建立SAH模型。于第2次注血3 d后检测相关指标。SAH+CLB+吡哆醇组于CLB术前30 min按50 mg.kg-1腹腔注射吡哆醇生理盐水溶液,每天以上述半量重复注射2次。采用TUNEL荧光标记法检测原位凋亡情况;免疫组织化学激光共聚焦检测大鼠皮层神经细胞Caspase-3和Bcl-2的蛋白表达。结果①与正常对照组比较,其余各组大鼠TUNEL阳性细胞表达均明显升高,而SAH+CLB组和SAH+CLB+生理盐水组又明显高于SAH组(P<0.01),SAH+CLB+吡哆醇组与SAH+CLB组比较表达有所减弱(P<0.01)。②与正常对照组比较,其余各组大鼠皮层神经细胞Caspase-3蛋白表达均明显升高,而SAH+CLB组和SAH+CLB+生理盐水组最高,与SAH组比较差异具有显著性(P<0.01),SAH+CLB+吡哆醇组与SAH+CLB组比较表达有所减弱(P<0.01)。③与正常对照组比较,其余各组大鼠皮层神经细胞Bcl-2蛋白表达均明显升高,而SAH+CLB组和SAH+CLB+生理盐水组明显低于SAH组(P<0.01),SAH+CLB+吡哆醇组较SAH+CLB组表达增强。结论脑淋巴引流阻滞可以通过Caspase-3高表达和Bcl-2低表达加重SAH后大鼠皮层神经细胞的凋亡,而吡哆醇具有一定的缓解作用。
- 王轩陈锋高兵高向东贾丽丽杨明峰孙保亮
- 关键词：脑淋巴引流凋亡吡哆醇CASPASE-3
- 脑淋巴引流阻滞加重蛛网膜下腔出血后大鼠海马神经元凋亡的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨脑淋巴引流阻滞（cerebral lymphatic blockage,CLB）对蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后大鼠海马神经元凋亡的影响及相关机制研究.方法 选用健康成年Wistar大鼠,随机分为正常对照组、SAH组、SAH＋CLB组.采用枕大池2次注血法建立SAH模型,于第2次注血3d后,采用HE染色及碘化丙碇（PI）染色法观察各组大鼠海马神经元形态结构变化;TUNEL荧光标记法检测原位凋亡情况;免疫组织化学激光共聚焦检测大鼠海马神经元caspase-3和Bcl-2的蛋白表达.结果 （1）HE染色和PI染色可见SAH组大鼠部分海马神经元皱缩,部分呈新月形,凋亡细胞数为（25.36 ±4.02）个;SAH＋CLB组神经细胞分布稀疏,核碎裂,可见凋亡小体,周围有空泡形成,凋亡细胞数为（37.82±5.93）个,显著高于SAH组（P〈0.01）.（2）SAH组和SAH＋CLB组TUNEL阳性细胞的表达荧光强度分别为（1.70±0.37）和（2.54±0.53）,均高于正常对照组（0.19±0.03）,而SAH＋CLB组又显著高于SAH组（P〈0.01）.（3）SAH组和SAH＋CLB组caspage-3表达的荧光强度分别为（2.45±0.49）和（2.96 ±0.44）,均高于正常对照组,而SAH＋CLB组又显著高于SAH组（P〈0.01）.（4）SAH组和SAH＋CLB组Bel-2表达的荧光强度分别为（3.40±0.61）和（2.67 ±0.44）均高于正常对照组,而SAH＋CLB组显著低于SAH组（P〈0.01）.结论 脑淋巴引流阻滞可加重SAH后大鼠海马神经元的凋亡,其机制可能与caspase-3高表达和Bcl-2低表达有关.
- 王轩高兵高向东贾丽丽杨明峰张颜波孙保亮
- 关键词：脑淋巴引流凋亡CASPASE-3
- 脑脊液中大分子物质经淋巴途径引流评估方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的探讨大鼠脑脊液(CSF)中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法。方法采用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠颈部淋巴引流阻断(CLB)模型,将动物分为非CLB组和CLB组。将125I标记的人血清白蛋白(125I-HSA,CSF示踪剂)注入大鼠左侧脑室,在24h内连续取动脉血样,并检测血浆中CSF示踪剂125I-HSA的浓度。根据药代动力学一室模型的基本原理,绘制浓度-时间曲线,计算出125I-HSA从CSF转运至血浆的浓度-时间曲线下面积(AUC)、血浆中125I-HSA的最大浓度(Cmax)、转运速率常数(Ka)、浓度达峰时间(Tmax)等药代动力学参数,根据两组的差值推算出大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka和Tmax。结果大鼠CSF示踪剂125I-HSA经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka分别为51.97mg·L-1·h-1、2.91mg·L-1、0.64h-1,分别占经蛛网膜绒毛和淋巴引流两条途径清除的AUC、Cmax、Ka的71.53%、44.02%、58.18%。CLB组Tmax(8.36±0.82)h长于非CLB组(3.57±0.54)h。结论成功建立了大鼠CSF中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法,经淋巴途径的引流在大鼠CSF大分子物质清除中具有重要作用。
- 孙保亮贾莉孙田歌杨明峰袁慧王彦辉高允生
- 关键词：脑脊液大分子物质引流淋巴
- CGRP经鼻用药促进蛛网膜下腔出血后脑血供和VEGF表达被引量：4
- 2009年
- 目的探讨经鼻给予降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血供和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池两次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。用激光多普勒血流计检测皮层局部脑血流量(rCBF)动态变化;于第2次枕大池注血后3d,将大鼠处死取脑制作冰冻切片,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层VEGF蛋白表达。结果解剖学观察表明SAH模型制作成功。SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层rCBF持续下降,经鼻CGRP+SAH组大脑皮层rCBF下降的程度较轻。第2次枕大池注血后3d,SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层VEGF蛋白表达增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层VEGF蛋白表达进一步增强。结论CGRP经鼻用药可缓解SAH脑血供下降,并促进血管新生。
- 孙保亮申发平曹明志杨明峰袁慧张颜波谢方民
- 关键词：经鼻给药蛛网膜下腔出血脑血管痉挛
- 降钙素基因相关肽经鼻给药对蛛网膜下腔出血后大脑皮层细胞损伤的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)经鼻用药对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑损伤的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池2次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。于第2次枕大池注血后3 d,将大鼠处死取脑制作冰冻切片,用TUNEL法检测大脑皮层原位细胞凋亡,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层Bcl-2蛋白表达。结果解剖学观察表明,SAH模型制作成功。SAH组和经鼻NS+SAH组大脑皮层出现大量TUNEL阳性细胞,经鼻CGRP+SAH组大脑皮层TUNEL阳性细胞较经鼻NS+SAH组减少。SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层Bcl-2蛋白表达明显增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层Bcl-2蛋白表达较经鼻NS+SAH组增强。结论经鼻应用CGRP可减轻SAH后脑损伤。
- 孙保亮迟淑梅杨明峰张颜波袁慧
- 关键词：降钙素基因相关肽经鼻给药蛛网膜下腔出血脑损伤
- 银杏黄酮对颈淋巴阻断后蛛网膜下腔出血脑损伤的缓解作用
- 2010年
- 目的探讨银杏黄酮对颈淋巴阻断(CLB)后蛛网膜下腔出血(SAH)继发性脑损伤的保护作用。方法将Wistar大鼠随机分入对照组、SAH组、SAH+CLB组、SAH+CLB+生理盐水组、SAH+CLB+银杏黄酮50 mg组、SAH+CLB+银杏黄酮200 mg组,银杏黄酮经腹腔注射给予。制作CLB和SAH模型。于诱导SAH后3 d,用激光多普勒血流计测定局部脑血流量(rCBF),干湿重比较法测定脑组织含水率,免疫荧光法检测血红素氧合酶-1(HO-1)表达。结果 SAH后3 d rCBF显著降低,CLB可导致rCBF进一步下降,银杏黄酮可减轻rCBF下降的程度;SAH导致脑组织含水率升高,并在CLB时进一步增加,银杏黄酮对之具有拮抗作用;SAH促进脑组织HO-1表达,CLB后HO-1表达进一步增加,银杏黄酮促进CLB后SAH大鼠脑组织HO-1表达。结论 CLB可加重SAH后脑损伤,银杏黄酮对之具有一定缓解作用。
- 孙保亮程子翠谢方民王海涛杨明峰袁慧
- 关键词：银杏黄酮蛛网膜下腔出血脑损伤脑淋巴引流血红素氧合酶-1
- 脑淋巴引流阻滞后蛛网膜下腔出血兔脑脊液对PC12细胞的损伤作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨脑淋巴引流阻滞(CLB)后蛛网膜下腔出血(SAH)兔脑脊液对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)的损伤作用。方法:建立兔SAH及CLB模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液加入PC12细胞培养基中,随机将PC12细胞分为空白对照组(无血清F12培养基)、正常脑脊液组、SAH脑脊液组、SAH+CLB脑脊液组,分别于培养0.5h、1h、2h、4h后,通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞存活率并测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫组化法检测细胞凋亡蛋白Bax及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果:MTT、LDH结果显示,与正常脑脊液组比较,SAH脑脊液组和SAH+CLB脑脊液组脑脊液使PC12细胞存活率降低,LDH释放率增加,以后组更为显著;正常脑脊液对PC12细胞无明显损伤作用。在SAH脑脊液组和SAH+CLB脑脊液组均发现PC12细胞Bax及HSP70蛋白表达;Bax蛋白表达后组大于前组,且呈时间依赖性增强;在0.5h和1h,SAH+CLB脑脊液组HSP70蛋白表达强于SAH脑脊液组,而在2h和4h则表达减弱。结论:脑淋巴引流阻滞可加重SAH兔脑脊液对PC12细胞的损伤,表明脑淋巴引流通路在SAH后可能起到内源性保护作用。
- 王轩贾丽丽孙保亮杨明峰袁慧张颜波
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑淋巴引流PC12细胞蛋白质BAX热休克蛋白质70
- 脑淋巴引流阻滞降低实验性蛛网膜下腔出血后脑灌注压和基底动脉对乙酰胆碱的反应性
- 2009年
- 目的探讨脑内物质经淋巴引流途径在蛛网膜下腔出血(SAH)后继发性脑缺血的作用。方法将Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、SAH+脑淋巴引流阻滞(CLB)组。用结扎颈部淋巴管并摘除淋巴的方法制作CLB模型,用枕大池两次注血法制作SAH模型;在SAH+CLB组,先制作CLB模型,1 d后制作SAH模型。在术后12 h内检测脑灌注压;于术后3 d观察基底动脉对乙酰胆碱的反应性。结果SAH组于枕大池注入动脉血后脑灌注压显著而持续下降,SAH+CLB组脑灌注压下降更加显著。表面滴加乙酰胆碱后,SAH组基底动脉舒张百分率显著小于正常对照组,SAH+CLB组基底动脉舒张百分率显著小于SAH组。结论脑淋巴引流途径阻滞可降低SAH后脑灌注压和基底动脉对乙酰胆碱的反应性,提示该途径在SAH后继发性脑缺血损伤中可能发挥内源性保护作用。
- 孙保亮王轩贾丽丽杨明峰袁慧张颜波谢方民
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑淋巴引流脑灌注压乙酰胆碱
- 经鼻给予降钙素基因相关肽促进蛛网膜下腔出血后大脑皮层CD31/PECAM-1表达
- 2009年
- 目的探讨经鼻应用降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下腔出血(SAH)后大脑皮层血小板内皮细胞粘附分子-1(CD31/PECAM-1)表达的影响。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池两次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。于第二次枕大池注血后3d,将大鼠经心灌注生理盐水后取脑制作冰冻切片,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层CD31/PECAM-1表达。结果行为学和解剖学观察证实大鼠SAH模型制作成功。第二次枕大池注血后3d,SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达进一步增强。结论经鼻应用CGRP可促进SAH后大脑皮层CD31/PECAM-1表达,从而在一定程度上促进血管新生,减轻继发性脑缺血。
- 杨明峰申发平袁慧谢方民张颜波孙保亮
- 关键词：蛛网膜下腔出血血小板内皮细胞粘附分子-1
