国家自然科学基金(81172077)
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- 胰腺高级别上皮内瘤变及其miRNA的研究进展
- 2013年
- 胰腺上皮内瘤变（pancreatic intraepithelial neoplasia,PanIN）是指胰腺中小导管上皮细胞从不典型增生至原位癌这一系列病变的连续过程,根据其组织学异型性可分为3期,其中PanIN-1、2期为低级别,PanIN-3期为高级别[1-3].目前已经证实PanIN-3期是胰腺癌最直接的癌前病变[4].如果能在该期作出诊断,及时进行干预和治疗,是完全可以治愈胰腺癌的.因此寻找此期的特异性标志物是解决问题的关键.近年研究表明,miRNA不仅在肿瘤组织和细胞中的表达具有显著的肿瘤相关性、组织特异性和表达稳定性[5],而且在外周血中的表达同样具有肿瘤相关性和组织特异性,与RNA比较,其表达稳定性更为显著,因此认为外周血miRNA可能是一种理想的肿瘤分子标志物.同样,胰液中miRNAs检测也是早期诊断胰腺疾病的重要途径[6].因此,筛查和鉴定PanIN-3期组织和血或胰液中特异表达的miRNAs,探讨其作为胰腺癌早期诊断分子标志物的潜在可能性,对于提高胰腺癌的早期诊断率,改善其预后具有非常重要的意义.
- 塔娜郑建明
- 关键词：胰腺上皮内瘤变高级别上皮内瘤变肿瘤分子标志物早期诊断率肿瘤相关性特异性标志物
- 胰腺癌石蜡包埋组织中微RNA原位杂交检测技术的优化
- 2018年
- 目的对采用原位杂交检测10%中性甲醛溶液固定的石蜡包埋(FFPE)胰腺癌组织切片中微RNA(miR)的方法进行技术优化,以提高miR的阳性检出率。方法将20例胰腺癌组织标本构建成组织芯片,使用锁核酸(LNA)标记的探针和显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。杂交温度分别设为48℃、53℃、56℃,杂交后采用3种不同的洗涤条件(温度、时间和3种不同洗涤缓冲液)进行杂交条件优化。将126例胰腺癌组织标本制成组织芯片,采用优化的显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。结果 miR-21探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ在65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min;miR-34a探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ分别在4℃和65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min。在126例胰腺癌组织中,84例(66.7%)miR-21表达阳性,77例(61.1%)miR-34a表达阳性。结论在FFPE胰腺癌组织切片中,miR-21和miR-34a的最佳杂交温度均为53℃,选择合适的杂交后洗涤温度和洗涤缓冲液有利于提高miR的阳性检出率。
- 倪晨明倪灿荣金钢焦莉娟李连峰郑建明
- 关键词：原位杂交微RNA组织微阵列胰腺肿瘤
