重庆市卫生局科研项目(052153)
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 相关作者：季平刘凯伍明毅李少林张福军更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属口腔医院重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤干细胞研究进展及展望被引量：12
- 2007年
- 季平
- 关键词：肿瘤干细胞自我更新增殖能力多能性分子机制
- ABCG2在人舌癌的表达及意义被引量：2
- 2009年
- 目的以人舌癌细胞株Tca8113为研究对象,探讨ABCG2在Tca8113的表达情况及意义,探索在人舌癌细胞株Tca8113中是否存在具有干细胞特性的SP细胞,为今后分离舌癌的SP细胞提供一定的实验依据及理论数据。方法用细胞免疫荧光,激光共聚焦和流式细胞仪检测Tca8113中的ABCG2表达情况。结果用细胞免疫荧光,激光共聚焦检测出绿色的荧光为ABCG2蛋白,流式检测显示ABCG2的表达为5%左右。结论人舌癌细胞株Tca8113中存在少量具有干细胞特性的SP细胞。在后续的研究中,可考虑利用SP细胞的特异性表型标记"ABCG2",将SP细胞从肿瘤中分离出来,进一步探讨肿瘤干细胞的生物学特性。
- 刘凯季平伍明毅
- 关键词：人舌癌SP细胞ABCG2流式细胞术
- Bcl-2与HER-2反义寡核苷酸联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞的干预作用被引量：1
- 2006年
- 目的探讨Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸(ASODN)联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的干预作用及其分子机制。方法实验分成正常对照组、Bcl-2正义干预组、HER-2正义干预组、Bcl-2反义干预组、HER-2 反义干预组、Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合干预组,共6组。脂质体转染后不同时间分别进行电镜观察、 RT-PCR检测,以观察不同条件处理后各组细胞的凋亡、Bcl-2与HER-2基因表达有无差别。结果 Bcl-2与HER-2 基因反义寡核苷酸联合干预组,转染后出现凋亡小体和各期凋亡细胞;Bcl-2基因表达下降36％,HER-2基因表达下降51％。联合转染作用优于单反义基因转染作用。结论 Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合转染能够促进肿瘤细胞凋亡并下调Bcl-2与HER-2基因的表达。
- 季平吴永忠张福军李少林
- 关键词：BCL-2HER-2基因反义寡核苷酸联合转染
- 利用T7噬菌体展示技术构建人舌鳞癌细胞多肽文库被引量：2
- 2010年
- 目的:本研究拟构建人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为进一步筛选和鉴定与舌鳞癌相关的蛋白或多肽打下基础。方法:人舌癌细胞株Tca8113,QiaGen法提取细胞mRNA,逆转录合成双链cDNA后与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到T7噬菌体展示多肽文库。结果:构建了人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,原始文库重组滴度为鳞癌1.7×106 pfu,扩增后滴度为3×1010 pfu/mL。随机从文库中抽取10个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示构建的文库中均有插入片段,文库插入率高达100%。所构建的文库插入片断大小在(0.4～1.0)kbp之间。结论:成功构建了人舌癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为下一步筛选和鉴定与舌癌相关的蛋白或多肽奠定了基础。
- 王景涛季平邓诚伍明毅刘凯孙守娟邹波
- 关键词：噬菌体展示人舌鳞癌TCA8113
- 表达重组干扰质粒对Tca8113细胞c-erbB-2、Bcl-2基因表达干扰作用的实验研究
- 2006年
- 目的:探讨表达重组干扰质粒(RNAi技术)对人舌鳞癌细胞株(Tca8113)细胞中c-erbB-2、Bcl-2基因表达的干扰效率。方法:按siRNA设计原则设计针对c-erbB-2、Bcl-2基因的OligoDNA,体外化学合成Oligo DNA,Oligo DNA退火、连接、转化、筛选克隆,构建针对c-erbB-2基因的表达重组RNA干扰质粒(psiC1、psiC2、psiC3)和针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒(psiB1、psiB2、psiB3),细胞脂质体转染Tca8113细胞,Real-time RT-PCR的标准曲线、扩增曲线和熔解曲线的数据收集处理,采用荧光定量RT-PCR方法检测重组干扰质粒对Tca8113细胞中c-erbB-2、Bcl-2基因表达的干扰效率。结果:实时荧光定量RT-PCR方法检测psiC1、siC2、psiC3质粒脂质体转染后c-erbB-2基因的表达情况结果显示psiC2、psiC3相对于对照组均有不同程度的干扰效果,psiC1相对于对照没有干扰效果。psiC2的干扰程度较大为62.68%,psiC3的干扰程度较小为40.61%。psiB1、psiB3相对于对照组无明显干扰效果,psiB2的干扰程度高达66.20%。结论:针对c-erbB-2、Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒psiC2(gAgTCCCAACCATgTCAAA)、psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)能有效沉默Tca8113细胞中c-erbB-2、Bcl-2基因的表达。
- 季平张福军李少林
- 关键词：脂质体转染基因表达实时荧光定量RT-PCR
