国家高技术研究发展计划(2013AA102803B)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 相关作者：吕红周峻岗郭超莫文娟胡晓悦更多>>
- 相关机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学电气工程更多>>
- 新型α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶RuAra1的表达与鉴定
- 2014年
- 随着能源问题的日益突出,半纤维素资源的利用逐渐受到人们的重视.α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-Larabinofuranosidase,EC 3.2.1.55)属于半纤维素酶系,能水解以α-1,3、α-1,2或α-1,5键连在木聚糖主链上的阿拉伯糖单体或低聚阿拉伯糖侧支.本实验室将克隆得到的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因RuAral在大肠杆菌中重组表达,得到的重组阿拉伯呋喃糖苷酶RuAral能够水解4-硝基酚-α-L-阿拉伯糖苷(4-Nitrophenyl-α-Larabinofuranoside,pNPA)、4-硝基酚-β-D-吡喃木糖苷(4-Nitrophenyl-β-D-xylopyranoside,pNPX)以及从小麦阿拉伯木聚糖中水解释放阿拉伯单糖.以pNPX为底物时,该酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为50℃.RuAral与瘤胃真菌(Neocallimastix patriciarum)内切木聚糖酶XynCIDBFV、瘤胃细菌木糖苷酶RuXynl的组合使用可以实现对小麦阿拉伯木聚糖的协同降解,且降解效率优于德国AB酶制剂公司的商品酶ROHALASE WP.
- 夏婷颖周峻岗吕红
- 关键词：宏基因组
- 马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究被引量：1
- 2017年
- 马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)作为一种食品安全级酵母,具有生长快,生物量高等特点,是一种新型的重组蛋白表达的宿主系统.启动子是供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,调控着转录的起始过程,直接影响基因的表达水平.本文通过易错PCR技术对马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子Pinu进行两轮突变,以阿魏酸酯酶(Est1E)作为报告基因,经筛选、鉴定获得了5个可以显著提高外源蛋白表达量的突变型启动子Pm1D81、Pm1F138、Pm2Q89、Pm2M73、Pm2X47,报告蛋白Est1E的酶活性是启动子改造前的2.31,2.65,5.01,5.40,5.43倍.随后测试了启动子Pm2X47对外源蛋白甘露聚糖酶和赤霉烯酮降解酶表达的影响,结果显示这两种酶的表达量均有提高,分别是启动子改造前的3.57倍和4.13倍.上述结果提示,改造后的菊粉酶启动子在提高外源蛋白表达水平方面具有一定的通用性,可作为新型候选表达元件,以提升马克斯克鲁维酵母重组表达外源蛋白的能力.
- 胡晓悦周峻岗余垚余垚吕红
- 关键词：马克斯克鲁维酵母启动子
- 马克斯克鲁维酵母的遗传与生理特征被引量：7
- 2016年
- 马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)广泛存在于酸奶、水果、酸乳酒等环境中,是食品安全级酵母,在一个多世纪前被分离获得.近20年来,由于该酵母表现出的食品安全性、高生长速率、高生物量、耐高温等特征,得到生产应用领域的关注.本文从K.marxianus的基因组遗传特征、分类以及细胞生长、细胞壁组成、糖基化修饰等方面进行了综述,以期系统认识和了解K.marxianus酵母.
- 莫文娟郭超吕红
- 关键词：马克斯克鲁维酵母基因组糖基化
