国家自然科学基金(30871540)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 植物高度同源重复基因的PCR检测被引量：1
- 2011年
- 以油菜中三个同源性高达90%以上的AP3基因为研究对象,采用三种不同的DNA聚合酶进行常规PCR扩增和纳米PCR扩增.结果显示:纳米PCR比普通Taq DNA聚合酶和低保真Plus DNA聚合酶具有更高的扩增特异性,即在相同的退火温度下,只有纳米粒子PCR扩增出特异性的目的产物而无非特异性产物;虽然高保真Pfu DNA聚合酶PCR显示出了同纳米PCR一样的扩增特异性,但纳米PCR不仅能表现出较高的扩增特异性,而且还显示出了更好的扩增效率.并且,纳米PCR即使是在30℃的低退火温度下依旧能扩增出特异性的目的条带,表现出纳米PCR良好的扩增特异性和扩增效率.这些结果表明,纳米PCR在基因检测等方面具有一定的优势.
- 左丽娟高勇张庙见王茂林赵云
- 关键词：特异性
- 利用酵母双杂交系统筛选与BnSmD1相互作用的蛋白
- 2012年
- 本研究以油菜BnSmD1为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术,从甘蓝型油菜cDNA文库中筛选出与之有相互作用的Arf-GTP酶激活蛋白1(Brassica napus ADP-ribosylation factorGTPase activating proteinl,BnArf GAP1),采用RT-PCR扩增并克隆到3个油菜ArfGAP基因的开放阅读框全长序列,BnArf GAP1、BnArf GAP2和BnArfGAP3.BnArfGAP1和BnArfGAP2都拥有1个507bp的开放阅读框,编码168个氨基酸残基;与前两个基因相比,BnArfGAP3核苷酸序列中插入了一个93bp的带有终止密码子的外源片段,导致翻译的提前终止,它拥有1个249bp的开放阅读框,编码82个氨基酸残基.BnArfGAP1和BnArfGAP2核苷酸序列一致性达到98.22%;BnArfGAP1与BnArfGAP3核苷酸序列一致性达到82.83%,BnArf GAP2与BnArf GAP3核苷酸序列一致性达到84.17%.BnArfGAP1、BnArf GAP2和BnArf GAP3都含有一个C2结构域.
- 张克汪静邓薇刘洋赵云
- 关键词：酵母双杂交GAPC2结构域
