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转录因子Nanog过表达对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响: 2015年; 目的探讨过表达多能相关转录因子Nanog对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响。方法构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒p SIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro,采用ps PAX和p MD2.G慢病毒包装系统转入293T细胞进行病毒液的生产和收取,转染生长良好的第3代人牙髓细胞,构建稳定过表达Nanog的人牙髓细胞株,以空载体转染的细胞为对照组,对细胞进行成脂及成牙本质诱导。采用Brd U法检测细胞的增殖情况,检测多能性转录因子Oct4和Sox2的表达,以及细胞成脂、成牙本质分化能力。采用单因素方差分析数据。结果成功构建Nanog过表达的人牙髓细胞株;Brd U法检测结果显示,Nanog过表达组比对照组细胞增殖能力强(F=90.421,P=0.000)。过表达组Oct4、Sox2 m RNA和蛋白表达水平明显高于对照组(FOct4 m RNA=71.649,POct4 m RNA=0.000;FSox2 m RNA=106.278,PSox2 m RNA=0.000;FOct4蛋白=41.632,POct4蛋白=0.002;FSox2蛋白=38.962,PSox2蛋白=0.002)。在矿化诱导条件下,Nanog过表达组DSPP、DMP1和OCN表达量、矿化结节产生量高于对照组(FDSPP=15.261,PDSPP<0.05;FDMP1=16.235,PDMP1<0.05;FOCN=17.019,POCN<0.05);成脂诱导21 d后,Nanog过表达组LPL和PPARγ2表达量及脂质产生高于对照组(FLPL=15.542,PLPL<0.05;FPPARγ2=10.437,PPPARγ2<0.05)。结论过表达Nanog能提高人牙髓细胞增殖能力,促进多能性转录因子Oct4、Sox2的表达,增强细胞多向分化能力。; 宁艳洋李金铃徐琼; 关键词：牙髓细胞 NANOG 细胞增殖

姜黄素对人牙髓细胞周期及凋亡的影响被引量：1: 2014年; 目的:探讨姜黄素对人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)细胞周期及凋亡的影响。方法:体外培养人健康牙髓细胞,不同浓度姜黄素(curcumin)处理细胞后流式细胞术检测细胞周期,TUNEL染色法观察细胞凋亡,实时荧光定量PCR及免疫蛋白印迹分别检测p300 mRNA及蛋白水平。结果:流式细胞术及TUNEL结果显示姜黄素处理人牙髓细胞后,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,凋亡细胞增加;实时荧光定量PCR及免疫蛋白印迹结果显示姜黄素抑制p300 mRNA及蛋白的表达。结论:姜黄素使细胞周期停滞在G0/G1期,诱导牙髓细胞凋亡,其机制可能是通过下调p300活性。; 刘惠娟徐琼; 关键词：姜黄素 P300 牙髓细胞细胞周期

P300/环腺苷酸效应元件结合蛋白及其生物学功能被引量：1: 2013年; 转录共激活因子P300/环腺苷酸效应元件结合蛋白结合蛋白(CBP)因分别与腺病毒癌蛋白E1A及环腺苷酸效应元件结合蛋白相结合而得名。P300/CBP可影响细胞增殖、分化和程序性死亡等。本文就P300/CBP的结构、功能、作用机制以及对转录因子和细胞周期因子等的调控作用等研究进展作一综述。; 王彤徐琼; 关键词：P300 转录因子乙酰基转移酶

人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达: 2015年; 背景:DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族可将甲基胞嘧啶氧化为羟甲基胞嘧啶,参与机体DNA去甲基化,调控细胞增殖与分化,但其在牙髓细胞中的表达模式仍不清楚。目的:检测TET家族在牙髓细胞成牙本质分化过程中的表达模式。方法:采用酶消化法分离培养人牙髓细胞,细胞免疫荧光法检测TET家族的表达及分布;Western Blot检测TET家族在牙髓细胞传代培养(P1-P7代)中的表达规律;对第3代牙髓细胞矿化诱导7,14 d,qR T-PCR法检测矿化诱导第0,7,14 d的TET家族mR NA水平,Western Blot法检测其蛋白量的表达变化。结果与结论:TET家族在人牙髓细胞的细胞质和细胞核中均有表达。在牙髓细胞体外传代培养过程中,TET1蛋白在P1-P6代随细胞传代呈上升趋势,TET2蛋白在P2和P3代细胞中表达增强(P<0.05),TET3表达量在不同细胞代数之间差异无显著性意义(P>0.05)。细胞经矿化诱导后,TET1,TET2和TET3的mR NA和蛋白表达量均升高(P<0.05)。以上结果提示TET家族可能参与调控牙髓细胞成牙本质分化进程。; 饶利佳李启梦李金铃徐琼; 关键词：牙髓牙再矿化

转录共激活子p300在人牙髓细胞中的表达及成牙本质向分化对其表达的影响: 2013年; 目的探讨体外培养人牙髓细胞中转录共激活子p300的表达模式,及成牙本质向分化诱导是否影响牙髓细胞中p300的表达水平。方法体外培养人牙髓细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测P0到P7代细胞中p300mRNA和蛋白的表达情况;取P3代细胞进行成牙本质向分化诱导,于第7天和第14天分别检测p300mRNA和蛋白的表达量。结果体外培养人牙髓细胞中可检测到p300表达,表达量随细胞传代逐渐减少(P<0.05);成牙本质向分化诱导7天和14天,p300表达量低于未诱导组细胞(P<0.05),诱导14天表达量低于诱导7天(P<0.05)。结论人牙髓细胞中表达p300,表达量随体外培养传代逐渐减少;成牙本质向分化诱导下调p300表达水平。; 王彤宁艳洋张德茜徐琼; 关键词：牙髓细胞

PI3K/AKT信号通路对体外人牙髓细胞增殖和成牙本质向分化能力的影响被引量：3: 2014年; 目的研究PI3K/AKT信号通路对人牙髓细胞(hDPC)体外增殖作用和成牙本质向分化能力的影响。方法体外培养hDPC,采用PI3K通路抑制剂LY294002(LY)处理hDPC,CCK8法检测细胞增殖情况,Western blot蛋白印记检测PI3K/AKT通路下游蛋白AKT、磷酸化AKT(p-AKT)水平在6、12、24、48、72 h的改变,检测成牙本质向分化指标DSPP的蛋白水平变化;设立空白对照组、矿化诱导组、LY组、矿化诱导+LY组共4组,成牙本质向矿化诱导14 d,茜素红染色检测矿化结节形成情况。结果 CCK8结果显示,LY294002在24、48和72 h可抑制hDPC的增殖(24 h:Z=-0.358,P<0.05;48 h:t=11.674,P<0.05;72 h:t=10.832,P<0.05);Western blot显示,LY294002抑制PI3K/AKT通路下游蛋白p-AKT活性,在24 h时作用最明显,成牙本质向分化指标DSPP蛋白水平降低;茜素红染色结果显示,矿化结节的数量B组最多、C组最少。结论 PI3K/AKT信号通路可促进hDPC的增殖和成牙本质向分化能力。; 关祥艳李启梦刘惠娟徐琼; 关键词：PI3K/AKT信号通路人牙髓细胞增殖

TGF-β/Activin信号通路对牙髓细胞表达Nanog的影响: 目的:研究生长因子TGF-β1、Activin A及TGF-β/Activin信号通路特异性受体抑制剂SB431542单独以及联合应用对牙髓细胞表达Nanog的影响,探讨TGF-β/Activin信号通路对Nanog的调...; 宁艳洋徐琼; 关键词：牙髓细胞 NANOG; 文献传递

过表达Nanog对牙髓细胞干性及成牙本质向分化的影响: 目的:探讨过表达Nanog对人牙髓细胞增殖性能及Oct4、Sox2和牙本质向分化标记DSPP表达的影响。方法:构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro,采用psPAX和...; 宁艳洋徐琼; 关键词：牙髓细胞分化干性; 文献传递

多能性转录因子Nanog在体外培养牙髓细胞中的表达被引量：1: 2013年; 目的:研究多能性转录因子Nanog在人牙髓细胞连续培养时的表达规律及矿化诱导对其表达量的影响。方法:体外培养人牙髓细胞(DPCs),并对第3代DPCs进行矿化诱导;分别采用实时定量荧光PCR和Westernblot检测P1至P7代以及矿化诱导前后DPCs中Nanog mRNA及蛋白的表达变化情况。数据经统计学分析。结果:在DPCs的体外传代培养中,Nanog mRNA和蛋白表达量均呈下降趋势(P<0.05);矿化诱导后Nanog mRNA和蛋白表达量与对照组相比明显降低(P<0.05)。结论:在牙髓细胞体外连续培养环境下,随着代数增加,Nanog表达量呈下降趋势;矿化诱导可降低Nanog的表达。; 宁艳洋徐琼王彤张德茜; 关键词：牙髓细胞 NANOG 体外培养

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国家自然科学基金(81170953)

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