浙江省科技攻关计划(2005C13019)
- 作品数：12 被引量：116H指数：6
- 相关作者：李校堃梁广汤晓闯王晓慧邵丽丽更多>>
- 相关机构：温州医学院吉林农业大学南京理工大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划温州市重大科技项目温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 温莪术蛋白双向电泳技术的建立被引量：1
- 2009年
- 目的:建立温莪术的双向电泳技术(2-DE)体系。方法:采用TCA/丙酮沉降法提取蛋白,并用超速离心去除杂质。采用固相pH胶条在IPGphor TM Ⅲ等电聚焦系统上进行等电聚焦,采用Bio-Rad电泳仪进行SDS-PAGE电泳,以银染法染色。结果:得到了上百个点的双向电泳图谱。结论:本研究成功建立了温莪术蛋白双向电泳技术体系。
- 周艳张美玲田自有何宏章金利泰李校堃
- 关键词：蛋白提取双向电泳超速离心
- 温郁金ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化被引量：4
- 2008年
- [目的]寻找一个可用于温郁金ISSR-PCR的最适宜反应体系。[方法]利用CTAB法提取基因组DNA,同时利用PCR扩增技术和方法,对引物、模板DNA、Mg2+d、NTP、Taq聚合酶等反应条件进行优化。[结果]反应体系的最佳条件是总体积为25μl,其中Mg2+浓度(25mmol/L)2.2μl,Taq聚合酶(5 U/μl)0.4μl,引物浓度(20μmol/L)1.5μl,模板DNA(5 ng/μl)1.5μl,dNTP(2.5 mmol/L)2.2μl,10×PCRbuffer2.5μl;PCR扩增程序为:1个循环的94℃预变性5 min;94℃变性35 s,相对应的引物退火温度退火1 min,72℃复性1.5 min,共36个循环;最后72℃延伸10 min。[结论]该体系是适合温郁金ISSR-PCR反应的最适宜体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带清晰而稳定等特点,为今后温郁金遗传多样性的研究奠定了基础。
- 汤晓闯王晓慧梁广姜程曦肖健李校堃
- 关键词：郁金
- 浙江产温郁金挥发油的HPLC指纹图谱研究被引量：6
- 2009年
- 目的利用高效液相色谱建立温郁金挥发油的指纹图谱。方法采用Shimadzu VP-ODS C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1磷酸溶液梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm。结果以=牛儿酮对照,通过对19批浙江不同产地温郁金样品测定,标定了14个共有峰,并通过"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件"和聚类分析等辅助手段,计算相似度等有关参数。结论该方法准确可靠,重现性好,为更好的控制温郁金内在质量提供了科学依据。
- 刘敏楚生辉崔友李校堃
- 关键词：指纹图谱牻牛儿酮高效液相色谱
- 姜黄素的构效关系及以其为先导物的抗肿瘤化合物研究进展被引量：29
- 2008年
- 姜黄素具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化等多种药理作用和确切疗效。近年来国内外科学家以姜黄素为先导物,设计、合成和表征了大量的姜黄素结构类似物和衍生物,以全面研究姜黄素的构效关系,并希望开发出更为高效的姜黄素类新药物。本文着重于介绍近年在抗肿瘤作用上针对姜黄素构效关系及其结构类似物进行的研究工作。
- 梁广田吉来邵丽丽杨树林李校堃
- 关键词：姜黄素构效关系抗肿瘤
- 温郁金愈伤组织培养及快速繁殖被引量：9
- 2008年
- 为了提纯复壮温郁金资源,快速繁殖良种苗木,满足市场供不应求的现状,对温郁金外植体培养及愈伤组织的诱导、继代、分化和再生进行研究。结果表明:莪术外植体在以MS培养基为基本培养基,附加6-BA 3.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L适于丛生芽的诱导与增殖;附加2,4-D2.0 mg/L+KT 5.0 mg/L适于愈伤组织的诱导;附加2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L适于愈伤组织的继代培养;附加KT 5.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L适于愈伤组织的分化,生根的最佳培养基为MS+IAA 1.0 mg/L。因此,可以通过组织培养的方式提纯复壮温郁金资源,进行温郁金的快速繁殖。
- 王晓慧杨恩秀庞实锋汤晓闯姜成曦李校堃
- 关键词：温郁金丛生芽快速繁殖
- 温莪术内生真菌的分离及其分类鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的对温莪术不同部位内生真菌进分离和分类鉴定。方法采用内生菌常规分离法对健康温莪术根、茎和叶的内生真菌进行了分离和鉴定。结果从温莪术中分离得到了99株内生真菌,经鉴定为21属,其中根部42株涉及11属,茎部12株涉及4属,叶部45株涉及12属。结论温莪术的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存在差异。
- 王艳红汪洪徐磊杨信东
- 关键词：内生真菌温莪术
- 莪术醇的分离鉴定及含量测定被引量：15
- 2008年
- 目的:研究从莪术油中提取莪术醇的方法,建立莪术醇含量分析的新方法。方法:以莪术油为原料,进行减压蒸馏,收集208～216℃的馏分经重结晶得到产品,将其和对照品作差示量热光谱、红外光谱、核磁共振和质谱对比分析确定莪术醇;用高效液相色谱法测定其含量,色谱柱为ODS柱;以乙腈∶水(15∶85,V∶V)为流动相;流速为1.0mL/min;检测波长为210nm;柱温为25℃;以外标两点法计算含量。结果:经差示扫描量热光谱、红外光谱、核磁共振、质谱分析鉴定提取的产物是莪术醇,高效液相分析其浓度在10～70μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999(n=7);精密度试验RSD为0.92%(n=6);平均回收率为99.86%,RSD=0.76%,含量为98.9%,RSD=0.89%(n=3)。日内日间差异实验RSD均小于0.78%,表明样品稳定性良好。结论:减压蒸馏法提取莪术醇的工艺流程简单,适合大规模生产,而且纯度高;高效液相色谱法测定莪术醇含量的方法简便、准确、快速,可用于莪术醇及其制剂的质量控制。
- 王婷李铁福林绍强姚崇舜李校堃
- 关键词：莪术油莪术醇减压蒸馏高效液相色谱法
- 莪术不同种和居群的ISSR-PCR分析被引量：23
- 2008年
- 目的：应用ISSR-PCR标记技术研究不同种及居群莪术的亲缘关系和遗传多样性。方法：对蓬莪术、广西莪术和温郁金共8个居群的37个样本进行ISSR-PCR分析，用POPGEN32软件分析其遗传相似系数及遗传距离，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系系统图。结果：5条引物共扩增出65个位点，其中34个位点是多态性位点，多态位点百分率为52．3％。遗传相似系数变化范围0．6864～0．9997。Neig基因多样性（H）指数为n1521，Shannon信息指数（I）为0．2338，莪术种内的遗传多样性低于种间。结论：莪术居群间的遗传变异较大，而居群内部的分化程度很低。不同居群的莪术与种的特性和地理分布有一定相关性，为莪术的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。
- 王晓慧汤晓闯杨恩秀刘德军李敏李校堃
- 关键词：居群莪术ISSR
- 姜黄素类化合物抗炎和细胞保护作用的构效关系研究进展被引量：19
- 2008年
- 姜黄素具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化等多种药理作用和确切疗效。近年来国内外科学家以姜黄素为先导.设计、合成和表征了大量姜黄素结构类似物和衍生物,以全面研究姜黄素的构效关系。并希望开发出更高效的姜黄素类新药物。着重于介绍近年在抗炎和细胞保护作用上对姜黄素构效关系及其结构类似物进行的研究工作。
- 赵承光梁广邵丽丽雷培培张美玲李校堃
- 关键词：姜黄素类化合物构效关系抗炎细胞保护
- 温郁金脱毒组织培养技术研究被引量：10
- 2009年
- 为了建立温郁金脱毒组培苗的快繁体系,以温郁金主根茎为材料,采用高温预处理催芽结合茎尖培养技术获得脱毒苗。结果表明:茎尖培养的最适培养基为MS+BA(6-苄基嘌呤)2.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 g/L;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 mg/L;脱毒苗生根诱导最适培养基为MS+6-BA(6-苄基嘌呤)1.5 mg/L+NAA(萘乙酸)2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 g/L,用超薄电镜切片法和RT-PCR法检测病毒率,该茎尖再生苗脱毒率达78.6%。试管苗移栽后植株的成活率达90%以上,植物生长健壮,抗性增强,为温郁金种苗进一步工厂化快速繁殖提供了重要参考价值。
- 汪洪蔡小军于晓敏李校堃
- 关键词：温郁金脱毒
