国家教育部博士点基金(20030183048)
- 作品数：12 被引量：51H指数：3
- 相关作者：陈东刘佳梅孟晓婷王秀力刘颖更多>>
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- 端脑发育过程中放射状胶质细胞表达乙酰胆碱转移酶被引量：1
- 2006年
- 目的:为在端脑发育中胆碱能神经元是否来源于放射状胶质细胞寻找实验证据,以分析胆碱能神经元发生与神经干细胞分化之间的关系。方法:实验于2002-03/2003-01在组织胚胎学教研室细胞培养室和免疫组化实验室完成。采用荧光激活细胞分类技术确定大鼠胚胎胆碱能神经元发生的时间,然后对胚胎14d大鼠端脑实施冠状切片,波形蛋白(放射状胶质细胞标志性蛋白)和乙酰胆碱转移酶(胆碱能神经元的标志性蛋白)免疫组织化学双重染色,以证实放射状胶质细胞是否表达乙酰胆碱转移酶。结果:流式细胞术检测胚胎12d大鼠端脑细胞乙酰胆碱转移酶荧光免疫反应阳性细胞表达率为22.49%;胚胎14d大鼠端脑背侧脑室区和端脑腹侧侧神经节隆起脑室区存在同时表达波形蛋白和乙酰胆碱转移酶细胞群。结论:①大鼠胆碱能神经元开始发生时间是胚胎12d。②放射状胶质细胞具有神经干细胞性质,它不断地进行不对称分裂,产生胆碱能表型的成神经细胞,即胆碱能前体细胞。③放射状胶质细胞在神经元发生期进行不对称分裂的同时已经决定了它所产生神经细胞的表型,合成神经递质乙酰胆碱。
- 周莉丁玲玲肖志锁秦媛媛李贵宾
- 关键词：端脑乙酰胆碱转移酶波形蛋白免疫组织化学
- 化学去细胞肌肉组织工程支架与大鼠脊髓的生物相容性被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨化学去细胞肌肉支架与大鼠脊髓的生物相容性,阐明化学去细胞肌肉作为神经组织工程支架治疗脊髓损伤的优势。方法:将36只成年雄性大鼠随机分成2组:植入组和空白对照组。制备脊髓半横断损伤模型后,造模成功大鼠分别于脊髓缺损处植入化学去细胞肌肉或不做处理。每组6只分别于术后1、2和4周处死取材。免疫组织化学染色观察不同时间点损伤脊髓处的ED-1阳性巨噬细胞。取术后4周切片,Holmes镀银染色观察损伤脊髓的再生轴突,免疫组织化学染色观察损伤脊髓的GFAP阳性星形胶质细胞,碱性磷酸酶组织化学染色观察支架中的再生血管。计数ED-1阳性细胞和再生轴突。结果:空白对照组损伤处无轴突再生;其炎症反应在术后1周时最强,之后逐渐减弱;星形胶质细胞在损伤处或空洞周围呈密集多层排列。而植入组化学去细胞肌肉中再生轴突数为613.17±154.96,再生轴突排列方式规则;其炎症反应趋势与空白组相同,未见异物排斥反应;星形胶质细胞成排平行长入支架;化学去细胞肌肉中血管再生良好。结论:化学去细胞肌肉支架与脊髓具有良好的生物相容性,提示化学去细胞肌肉可作为治疗脊髓损伤的组织工程支架。
- 薛辉陈东张秀英刘颖
- 关键词：脊髓损伤
- TrkA在胚胎期Wistar大鼠端脑内的表达被引量：3
- 2007年
- 目的：探讨TrkA受体在胚胎不同时期Wistar大鼠端脑内的表达情况。方法：成年Wistar大鼠合笼饲养，查到阴栓或阴道涂片查到精子为EO天，分别在E13、E15、E17、E19和E21天利用常规形态学手段免疫组织化学方法观察胚胎期Wistar大鼠不同脑区TrkA表达情况。结果：E13天胎脑组织内未检测到TrkA阳性表达，E15天TrkA表达阳性率在胚胎期大鼠端脑皮质内呈上升趋势，E17天达次高峰，E19开始下降，出生前E21天再次达表达高峰。胎鼠纹状体、海马的发育较晚，E17天开始发育，TrkA在其内的表达与皮质内相似。结论：TrkA在胎鼠端脑的表达始于E15天，且自E15～E21表达量呈持续增加趋势，符合胚胎诱导过程。
- 王晓明陈东
- 关键词：受体神经生长因子
- 去细胞肌肉组织工程支架与人羊膜上皮细胞的相容性研究被引量：3
- 2009年
- 目的制作去细胞肌肉组织工程支架,并检测其与人羊膜上皮细胞的生物相容性。方法采用三硝基甲苯和十二烷基磺酸钠结合的化学萃取方法制作去细胞肌肉组织工程支架,冰冻切片观察其结构。将人羊膜上皮细胞种入支架培养7d后,用免疫组化检测羊膜上皮细胞的增殖活性、NT-3及BDNF的表达,扫描电子显微镜观察其超微结构。结果支架中细胞去除完全,其主要结构为平行排列的管状结构。细胞外基质的主要成分弹性纤维和胶原纤维保持完好。羊膜上皮细胞在支架里有增殖活性,并呈现NT-3、BDNF免疫反应阳性。扫描电镜显示,羊膜上皮细胞在支架中分布均匀,生长良好。结论成功的制作了去细胞肌肉组织工程支架,其与人羊膜上皮细胞有良好的相容性。
- 薛辉陈东刘佳梅刘颖孟晓婷殷迪
- 关键词：人羊膜上皮细胞生物相容性
- 胰岛素基因增强结合蛋白1基因修饰的神经干细胞向胆碱能神经元分化的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨大鼠胰岛素基因增强结合蛋白1(Islet-1)基因是否有诱导神经干细胞(NSCs)向胆碱能运动神经元分化的能力。方法用Islet-1基因重组逆转录病毒载体转导NSCs后,用免疫荧光组织化学染色方法检测Islet-1在NSCs内的表达;体内、体外实验观察导入Islet-1基因的NSCs向乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性细胞分化的情况。结果在体外分化实验中观察到,转导Islet-1基因的NSCs向胆碱能运动神经元分化的细胞数明显多于对照组;体内移植实验发现,导入Islet-1基因的NSCs在体内可以向ChAT阳性细胞分化。结论Islet-1基因有诱导NSCs向胆碱能运动神经元分化的能力。
- 刘佳梅陈东孟晓婷
- 关键词：神经干细胞重组逆转录病毒载体胆碱能神经元基因转导
- 维甲酸对诱导PC12细胞向神经元样细胞分化的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:研究维甲酸(RA)诱导PC12细胞向神经元样细胞分化过程中的细胞直径和突起长度的变化情况以及诱导分化的PC12细胞MAP2的表达情况。方法:实验共分7组,分别为0.1、0.3、0.5、1.0、2.0及5.0mg.L-1RA组及含10%胎牛血清的对照组。不同浓度的RA组均诱导PC12细胞72h,在24、48和72h分别观察细胞的突起长度和细胞最大直径的变化情况;在诱导72h后利用免疫细胞化学技术,观察不同剂量RA作用后PC12细胞向MAP2阳性细胞分化的情况。结果:0.3、0.5、1.0、2.0mg.L-1RA组MAP2阳性细胞数与对照组比较明显增加,且以1.0mg.L-1组最为明显(P<0.05)。与对照组比较,加入RA组分化的细胞状态较好,且突起和细胞直径明显增长和增大,以1.0mg.L-1组最为明显(P<0.01)。但是随着诱导时间的延长,2.0mg.L-1浓度的RA即可导致细胞中黑色颗粒增多,胞体回缩,细胞老化,视野中多为细胞碎屑颗粒,有的细胞融合成片。结论:RA具有诱导PC12细胞向神经元样细胞分化的趋势,且能促进分化细胞突起的生长和细胞直径的增大。1.0mg.L-1RA浓度是诱导PC12细胞向神经元样细胞分化的最适浓度。
- 王秀力李忱刘佳梅陈东
- 关键词：PC12细胞维甲酸分化MAP2
- NT-3基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的检测神经营养素-3(NT-3)基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)后的表达情况。方法采用密度梯度离心法获取SD大鼠BMSCs,体外培养、传代。取第4代细胞,用脂质体介导法将NT-3真核重组表达质粒plEGFP-NT-3转染BMSCs,G418筛选获得阳性细胞,用免疫细胞化学法检测NT-3转染效果。结果在阳性细胞中能够检测到NT-3基因表达,但细胞形态并没有因为NT-3的转入而有明显改变。结论通过质脂体介导法可将NT-3基因转入BMSCs中,并能稳定表达。
- 曲德伟陈东孟晓婷
- 关键词：基因转染神经营养素-3骨髓间充质干细胞
- 大鼠羊膜上皮细胞神经营养因子基因的表达被引量：2
- 2009年
- 目的建立胚胎不同时期羊膜上皮细胞(AECs)表达脑源性神经营养因子(BDNF)与神经营养素-3(NT-3)mRNA的时相图,找出AECs分泌BDNF、NT-3的最佳时期。方法采用实时荧光定量PCR检测胚胎不同时期(11,13,17,21d)AECs中BDNF与NT-3 mRNA的表达差异。结果绘制出大鼠AECs中BDNF、NT-3的基因表达差异时程图:BDNF的表达随着胚胎发育持续上调,至17d达到最高,然后其表达开始下调;NT-3的表达在13d达到最高,然后开始下调。结论初步确定13～17d是大鼠AECs分泌BDNF、NT-3的最佳时期。
- 董智勇李忱陈东孟晓婷李玉林
- 关键词：羊膜上皮细胞脑源性神经营养因子神经营养素-3实时荧光定量PCR
- 神经生长因子诱导神经干细胞向胆碱能神经元的分化被引量：15
- 2005年
- 为了探讨神经生长因子(NGF)是否具有诱导神经干细胞(NSCs)向胆碱能神经元分化的能力,利用无血清培养技术从胎鼠脑内获得神经干细胞,传代纯化后利用免疫细胞化学技术,观察不同剂量NGF作用后神经干细胞向胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞分化的情况。结果发现:50、100、200ng/ml NGF组ChAT阳性细胞数明显比对照组增加,且以100ng/ml组最为明显;各NGF组,分化的细胞状态较好,且突起明显比对照组增粗增长,以200ng/ml组最为明显。此结果证明NGF具有诱导NSCs向胆碱能神经元分化的趋势,且能促进分化细胞突起的生长。
- 刘佳梅陈东孟晓婷
- 关键词：神经干细胞神经生长因子胆碱能神经元
- NGF诱导PC12细胞向神经元的分化被引量：19
- 2007年
- 目的:研究NGF诱导PC12细胞向神经元的分化情况。方法:实验分为10、20、50和80μg.L-1NGF组及含10%胎牛血清的对照组。不同浓度的NGF组均诱导PC12细胞72h,在24、48和72h分别观察细胞的突起长度和细胞最大直径的变化情况;在诱导72h后利用免疫细胞化学技术,观察不同剂量NGF作用后PC12细胞向MAP2阳性细胞分化的情况。结果:20、50和80μg.L-1NGF组MAP2阳性细胞数明显高于对照组,且以50μg.L-1组最为明显(P<0.05)。与对照组比较,加入NGF组分化的细胞其突起和细胞直径明显增长和增大,以50μg.L-1组最为明显(P<0.01)。结论:NGF能够诱导PC12细胞向神经元分化,50μg.L-1的NGF浓度是诱导PC12细胞向神经元分化的最适浓度。
- 王秀力陈东刘佳梅
- 关键词：PC12细胞神经生长因子分化
