国家自然科学基金(39470700)
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
- 相关作者：朱家恺成少安顾熊飞谢冈李志跃更多>>
- 相关机构：中山医科大学附属第一医院中山大学附属第一医院中山医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 雪旺细胞源神经营养因子在大鼠生长发育腰髓中的表达
- 2002年
- 目的 观察雪旺细胞源神经营养因子在大鼠生长发育腰髓中的表达。方法 取不同年龄的胎鼠、幼鼠及成年鼠的腰髓或相关组织 ,行常规免疫组织化学研究。结果 雪旺细胞源神经营养因子在成年大鼠腰髓的整个白质和灰质后角Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层有较低表达。雪旺细胞源神经营养因子在胎龄 1 4、1 5d开始有表达 ,胚胎时期表达先增高后下降 ,其中胎龄 2 1d最高。出生后雪旺细胞源神经营养因子 (SDNF)在腰髓中表达明显下降 ,其中第 7、1 2d稍高。结论 SDNF在成年大鼠腰髓 (包括背根神经节 )有较低表达。SDNF在生长发育的腰髓中表达基本呈逐渐下降趋势。
- 李志跃周诗仁朱家恺
- 关键词：生长发育腰髓
- 许旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致神经元死亡的干预(英文)被引量：1
- 2006年
- 背景:许旺细胞源神经营养因子是从许旺细胞胞浆中分离纯化出的一种相对分子质量为58000的神经营养物质,具有明显的神经营养活性,能对抗一氧化氮神经毒性物质。目的:建立根性撕脱伤动物模型,观察许旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致脊髓前角运动神经元死亡的保护作用。设计:重复观察测量。单位:深圳市第二人民医院骨三科,中山大学附属第一医院显微外科。材料:实验于2003-03/05在中山大学医学院实验动物中心完成。选用清洁级3～4月龄SD大鼠20只,随机分为许旺细胞源神经营养因子组、生理盐水对照组,各10只。两组动物均以左侧为正常侧,右侧为损伤侧。方法:①两组大鼠均建立颈6,7神经根性撕脱伤动物模型。②许旺细胞源神经营养因子组将一小块预浸有质量浓度为1g/L的许旺细胞源神经营养因子40μL的明胶海绵覆盖于损伤侧硬膜囊表面,生理盐水对照组将一小块预浸有等量生理盐水的明胶海绵覆盖于损伤侧硬膜囊表面。③明胶海绵表面置硅胶管,硅胶管一端与明胶海绵缝扎,另一端用凡士林封闭固定于皮下,关闭切口后伤口局部肌肉注射青霉素预防感染。术后两组动物分别通过硅胶管定期注射许旺细胞源神经营养因子或生理盐水20μL,1次/周,3周后取材。④切取颈6,7脊髓节段,观察损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率和形态学变化以及一氧化氮合酶的表达。主要观察指标:①脊髓运动神经元存活情况和形态学变化。②脊髓运动神经元一氧化氮合酶表达的变化。结果:实验选用20只大鼠,全部进入结果分析。①脊髓运动神经元存活情况和形态学变化:颈6,7神经根性撕脱术后3周,生理盐水对照组损伤侧68.6%的运动神经元死亡,存活率31.4%,明显低于正常侧(P<0.01),且存活的神经元胞体严重萎缩;许旺细胞源神经营养因子组损伤侧脊髓运动神经元的�
- 刘黎军朱家恺肖建德王大平杨雷
- 雪旺细胞源神经营养因子对背根节感觉神经元的保护作用被引量：3
- 2004年
- 目的:了解雪旺细胞源神经营养因子对周围神经高位损伤所致脊髓背根节感觉神经元死亡的保护作用。方法:选出生3周sD鼠高位切断L4、L5神经根,神经近侧断端应用雪旺细胞源神经营养因子或生理盐水,4周后观察损伤神经根背根节感觉神经元的存活率和形态学变化。结果:术后4周,营养因子组神经元的存活率是91.8％,生理盐水组是58.6％;生理盐水组存活神经元胞体明显萎缩。结论:雪旺细胞源神经营养因子对受损的背根节感觉神经元有明显的神经营养活性。
- 刘黎军朱家恺王大平肖建德杨雷
- 关键词：雪旺细胞神经营养因子感觉神经元背根节
- 雪旺细胞胞浆神经营养蛋白促进周围神经再生的实验被引量：5
- 2000年
- 目的 研究雪旺细胞胞浆神经营养蛋白 (SDNF)对周围神经再生的影响。方法 选用 90只成年SD大鼠 ,在右侧坐骨神经造成长 10 m m缺损 ,用植入血管的变性骨骼肌桥接神经缺损。分成三组 ,每组 30只。分别将分子量为 2 6、5 8ku的 SDNF和生理盐水 (对照组 )于术中、术后 7及 14天注入肌桥的近段、中段和远段。术后均观察 6个月。术后 15天开始 ,每隔 15天走足印一次 ,测定坐骨神经功能指数。术后 1、3、6个月 ,每组取 10只大鼠行神经电生理检测、比目鱼肌收缩力测定和组织形态学观察。结果 分子量为 2 6、5 8ku的 SDNF两实验组坐骨神经功能恢复指数、神经电生理、比目鱼肌收缩力和形态学观察指标 ,与对照组比较有非常显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 分子量为 2 6和 5 8ku的 SDNF有促进损伤的周围神经再生作用。
- 谢冈朱家恺顾熊飞
- 关键词：雪旺细胞周围神经再生
- 大鼠坐骨神经损伤后许旺细胞源神经营养因子表达的实验研究被引量：8
- 2001年
- 目的 观察坐骨神经在正常和损伤后许旺细胞源神经营养因子的表达。 方法 将 75只 SD大鼠坐骨神经分别行夹伤、切断、切断加缝合等 ,术后第 5、7、14、30、6 0 d取材 ,做常规免疫组织化学研究。 结果 (1)正常坐骨神经和脊髓中许旺细胞源神经营养因子有较弱表达 ;(2 )切断组坐骨神经近段术后第 14d许旺细胞源神经营养因子表达最高 ,远段第 7d最高 ,脊髓术后第 5 d最高 ;切断缝合组和夹伤组神经和脊髓都以术后第 6 0 d最高 ;(3)损伤侧灰质后角表达强于对照侧。 结论 (1)许旺细胞源神经营养因子在正常神经和脊髓中有较弱表达 ;(2 )许旺细胞源神经营养因子在坐骨神经不同损伤情况下表达不同 ,但都高于正常组 ;(3)
- 李志跃朱家恺成少安
- 关键词：许旺细胞神经营养因子坐骨神经损伤脊髓
- 用Iodogen法标记许旺细胞源神经营养因子的实验研究被引量：2
- 2001年
- 目的 用 Iodogen法标记许旺细胞源神经营养因子 (SDNF) ,以便下一步进行 SDNF在组织的受体的研究。 方法 先将 Iodogen涂布于小瓶内 ,加入 SDNF和 Na1 2 5I溶液 ,摇匀 ,在室温下反应 6 min,滴入 Sephadex L H 2 0柱 ,分步收集而成 SDNF放射性碘标记物。 结果 本法可获得的SDNF放射性碘标记物可达 99.7%放化纯度 ,SDNF的神经营养活性和免疫活性没有下降 ,能在 - 80℃保存条件下较稳定 ,符合进行 SDNF受体分析的要求。 结论 用 Iodogen法标记 SDNF方法简单 ,6min内便完成 ,既省时又达到较高的标记率 ,比通常用氯胺 T法容易控制 ,其反应效果好得多。
- 成少安朱家恺李志跃
- 关键词：神经营养因子许旺细胞放射性碘周围神经损伤
- 许旺细胞源运动神经营养因子单克隆抗体的研制及特性鉴定
- 2007年
- 目的研制针对许旺细胞源神经营养因子(SDNF)的单克隆抗体并鉴定Ig亚类。方法用SDNF免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞按1:5比例进行融合,间接ELISA法筛选阳性克隆,有限稀释法进行克隆化培养;制备单克隆抗体,鉴定McAb的Ig亚类。结果获得4株能稳定分泌抗体的细胞株6D3,B8,C9E9,A6C6。效价为1:5120,亚类为IgG1。结论所获得的4株杂交瘤细胞株均又较强稳定分泌抗BDNF单克隆抗体的能力,这为进一步的研究打下了基础。
- 陈强朱家恺顾雄飞
- 关键词：许旺细胞神经营养因子单克隆抗体生物学特性
- 许旺细胞源神经营养因子受体在外周神经组织中的分布研究被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨许旺细胞源神经营养因子 (SDNF)受体在外周神经的分布状况。 方法 应用放射性受体结合法检测外周神经组织中12 5Ⅰ SDNF的特异性结合。 结果 外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的特异性结合位点 ,且该特异性结合位点具有如下特点 :( 1)高亲和力 ,Kd为( 93 .11± 0 .5 2 ) pmol/L ;( 2 )低结合容量 ,Bmax为 ( 8 91± 0 2 6)fmol/mg ;( 3 )可饱和性 ,饱和曲线呈双曲线型 ,Scatchard分析的回归线呈直线 ;( 4 )可逆性 ,结合常数K1为 ( 3 91± 0 63 )× 10 7M 1×min 1,解离常数K 1为 ( 3 3 8± 0 5 4)× 10 3 min 1;( 5 )特异性。 结论 外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的高亲和力受体 ,故为许旺细胞源神经营养因子发挥神经营养作用的靶组织。
- 成少安朱家恺
- 关键词：许旺细胞神经营养因子受体
- 雪旺细胞浆神经营养蛋白高效液相分离纯化及其生物活性研究被引量：6
- 2000年
- 目的 分离纯化雪旺细胞浆神经营养蛋白并研究其生物活性。方法 取 30 0只出生后 1～ 3天SD大鼠双侧坐骨神经 ,纯化培养 ,收集雪旺细胞 ,超声粉碎 ,超速离心 ,不同孔径分子筛滤膜 (PM10、30、5 0 )超滤浓缩 ,收集分子量 10～ 30 ku,30～ 5 0 ku和 >5 0 ku三种组份胞浆蛋白浓缩液 ,分别加入体外无血清培养的 E14SD胎鼠脊髓运动神经元培养液中 ,用 MTT酶标法检测证实 10～ 30 ku和 >5 0 ku两组份蛋白有神经营养活性。再通过Diol- 15 0高效液相分子层析进一步从雪旺细胞胞浆中纯化分离出分子量为 2 6 ku和 5 8ku两种胞浆蛋白 ,并对其神经生物活性进行研究。结果 2 6 ku和 5 8ku雪旺细胞胞浆蛋白能维持体外无血清培养的脊髓运动神经元存活 ,其最佳生物活性浓度为 2 0 ng/孔。结论 雪旺细胞胞浆内含有分子量为 2 6 ku和 5
- 谢冈朱家恺顾熊飞
- 关键词：雪旺细胞周围神经损伤HPLC
