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杜氏盐藻基因工程研究现状及应用前景被引量：11: 2007年; 杜氏盐藻(简称盐藻)作为一种新型生物反应器,成为藻类基因工程的研究热点之一。利用基因工程手段对盐藻进行遗传重组改造以生产外源性物质是目前研究的重要领域。从盐藻相关基因的克隆、cDNA文库的建立、基因组文库的构建、筛选标记的确立和外源基因的表达等五个方面概述了国内外盐藻基因工程的研究进展,并对基因工程技术在盐藻深入研究中的应用作了前景展望。; 冯书营刘红涛李杰薛乐勋; 关键词：杜氏盐藻基因工程

杜氏盐藻玻璃珠新型转化方法的建立被引量：6: 2007年; 首次采用玻璃珠法成功转化了杜氏盐藻(以下简称盐藻),转化细胞经染色后呈现蓝色,表明外源报告基因GUS得到了成功的表达。同时还进行了转化时间、转速、PEG和质粒DNA浓度等因素对转化影响的分析,优化了转化条件。结果显示最佳的转化条件为:在800μL盐藻(106个细胞/mL)中加入150μLPEG和90μL质粒,在300mg玻璃珠存在的条件下,于转速2400r/min涡旋12s能够得到较为理想的转化结果。该方法与已报道的转化方法相比,具有操作简便、省时快捷、不需要昂贵消耗试剂和仪器设备、比较经济等优点。此方法的建立为深入研究盐藻基因工程提供了有力的工具。; 冯书营贾岩龙刘红涛李杰薛乐勋; 关键词：杜氏盐藻玻璃珠

人canstatin基因转化新型生物反应器——杜氏盐藻(Dunaliella salina)的初步研究被引量：1: 2008年; 采用RT-PCR技术从人的胎盘组织中克隆canstatin基因,定向连接到表达载体pUΩ上,然后与筛选标记bar盒连接得到真核表达载体pU Ω-Can-Bar。采用玻璃珠转化法将该表达载体转化杜氏盐藻(以下简称盐藻),通过草丁膦固体平板筛选得到转化株,进而对转化株进行阳性鉴定。PCR结果显示,在盐藻转化株中均能够扩增出约700 bp特异的条带,而在阴性对照中没有扩增出该条带。Southern blot结果进一步证明人canstatin基因已经整合到盐藻细胞的基因组中。此外,对盐藻转化株的遗传稳定性进行了分析,结果表明canstatin基因能够在转化藻株中稳定遗传。人canstatin转基因盐藻株的成功制备为利用盐藻反应器大规模生产人canstatin蛋白提供了实验依据,为及早实现canstatin蛋白在治疗肿瘤上的临床应用提供了前期工作基础。; 冯书营谷辉辉刘红涛薛乐勋; 关键词：新型反应器杜氏盐藻

GSK3β和E-cadherin在食管鳞癌中的表达及其意义被引量：2: 2013年; 目的探讨糖原合酶激酶(GSK3β)和钙-黏蛋白(E-cadherin)在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌浸润深度和淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化法(SP)分别检测GSK3β和E-cadherin表达水平,分析两者与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。结果 GSK3β和E-cadherin在食管鳞癌组织中阳性表达率显著高于正常食管上皮组织(P<0.05),且E-cadherin异常表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 GSK3β和E-cadherin的异常表达与食管鳞癌的分化转移密切相关,检测GSK3β和E-cadherin表达可作为判断食管鳞癌浸润、转移良好的参考指标。; 林锐王伟; 关键词：食管鳞癌 GSK3Β E-CADHERIN 免疫组化法

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国家教育部博士点基金(20050459007)