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鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建: 2013年; 为探究鸡J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的致病机理,采用PCR方法分4段分别扩增出J亚群禽白血病病毒安徽分离株AH-J11的前病毒cDNA,PCR产物经克隆鉴定,酶切后顺次连接,获得含有完整ALV-J AH-J11株前病毒cDNA的重组质粒,命名为pSK-AH-J11。将AH-J11株全基因序列克隆至pBluescriptⅡSK(+)载体中,得到重组质粒pBl-AH-J11,并将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF)。通过间接免疫荧光试验,RT-PCR和Western blot检测,并经测序验证比对拯救前后病毒的gp85基因序列,结果均表明拯救出了1株重组J亚群禽白血病病毒(rALV-J)。本研究成功构建了鸡ALV-J的感染性克隆并救获了其重组病毒,为研究禽白血病的致病机理提供了良好的反向遗传操作技术平台。; 王蓓刘芳王汉清李宁魏建忠刘光清王桂军; 关键词：J亚群禽白血病病毒全基因组感染性克隆病毒拯救

鸡恒定链功能片段跨物种增强小鼠对新城疫F2抗原免疫作用的研究被引量：1: 2014年; 【目的】研究恒定链（Invariant chain,Ii）功能片段作为载体的跨物种免疫增强作用及其潜在机制。【方法】构建基于鸡Ii功能片段与新城疫病毒抗原表位F2的嵌合体（Ii-F2、Cyt/Tm/Ii-key/F2/AP、Tm/Ii-key/F2/AP、Ii-key/F2/AP、Ii-key/F2）,将其定向克隆至原核表达载体pET-32a中,转化大肠杆菌Rosetta（DE3）并用IPTG诱导表达,嵌合体融合蛋白纯化后免疫小鼠,用ELISA法测定血清抗体效价。同时,分别构建含鸡Ii和小鼠MHCⅡ类分子基因的真核表达载体,并将其共转染COS7细胞,通过激光共聚焦显微镜观察其在细胞内的共定位。【结果】用F2与Ii-key等Ii功能片段连接的融合蛋白免疫的试验组小鼠的抗体效价,较单独用F2抗原肽免疫的对照组小鼠产生的抗体效价提高了1.5~3倍。显微观察发现,鸡Ii和小鼠MHCⅡ分子在细胞内可以共定位。【结论】Ii具有跨越物种限制增强免疫的作用。; 王琛刘雪兰陈芳芳余为一; 关键词：嵌合体

寄生虫基因功能研究的模式生物-秀丽隐杆线虫: 2011年; 多细胞生物在发育的特定时期、特定组织中的表达某些基因。如果这些基因表达调控受到干扰则可能对机体产生有害的影响,而这对于寄生虫病来说则是一种潜在的控制其发病的新机制。; 刘雪兰孙菲菲李培英余为一; 关键词：基因功能秀丽隐杆线虫模式生物基因表达调控多细胞生物

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安徽省自然科学基金(11040606M90)