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β-乳球蛋白过敏原表位适配体的计算机辅助分子设计与筛选: 2013年; 本研究以β-乳球蛋白为模板,针对不同过敏原表位,基于正义链和反义链互补的原则,利用计算机辅助分子设计筛选出与β-乳球蛋白过敏原表位很好结合的适配体。分子对接结果表明,适配体QWVW,RRSL,GWGLP,RDGY和WVDL与β-Lg对接的能量是几个主要的过敏原表位中较低的,其中适配体RRSL与β-乳球蛋白对接的能量为本次实验最低,为-107.292 kcal/mol。并通过对分子对接过程中氢键作用、静电作用、疏水作用的研究,证明设计筛选出的适配体可以特异性地与β-乳球蛋白过敏原表位结合,从而达到掩盖β-乳球蛋白过敏原表位的目的。; 徐洪军吕高婧薛秀恒孙茂忠刘艳玲; 关键词：Β-乳球蛋白适配体分子对接

响应面法优化β-乳球蛋白粗提物自组装V_E的工艺条件: 2015年; 为了优化β-乳球蛋白粗提物自组装VE工艺条件,通过单因素实验研究了β-Lg粗提物与VE质量比例、磁力作用时间、热激温度对β-Lg-VE结合工艺的影响。在单因素实验基础上,利用Design Expert.V8.0.6.1软件,设计了3因素、3水平的Box-Behnken中心组合实验,进行响应面法分析,优选β-乳球蛋白粗提物自组装VE工艺条件。结果表明,β-Lg粗提物自组装VE的最佳工艺条件:β-Lg粗提物与VE质量比例为19∶1,磁力作用时间49 min,热激温度为72℃。此条件下,β-Lg-VE的结合率为(68.5±0.98)%,与理论值68.98%拟合性较好。β-Lg-VE自组装分子的溶解性较好,其在食品工业中具有广泛应用。; 刘艳玲曹玉林束天锋解倩倩吴林昊胡琪琳薛秀恒; 关键词：热激响应面分析法

鼠隐孢子虫感染犊牛模型的建立及其血液生化指标的变化: 2014年; 【目的】研究犊牛感染鼠隐孢子虫后血液生化指标、营养物质代谢相关酶及激素的变化,初步探讨隐孢子虫病的致病机理。【方法】给犊牛腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液致其免疫力低下,然后通过经口感染鼠隐孢子虫卵囊构建隐孢子虫感染犊牛动物模型。采集模型组和对照组犊牛隐孢子虫感染前和感染后第14、28天的血液,测定血液中K+、Na+、Cl-、Ca2+、Mg2+、血糖的浓度,以及总蛋白、白蛋白、5-羟色胺、白介素-2的质量浓度和酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶的活性。【结果】经口感染鼠隐孢子虫卵囊犊牛粪便中检出了大小、形态与感染卵囊基本相同的隐孢子虫卵囊,表明隐孢子虫感染犊牛动物模型构建成功。隐孢子虫感染前,2组犊牛所有血液生化指标均无显著差异。与对照组相比,在犊牛感染隐孢子虫后14d,血糖浓度、5-羟色胺质量浓度及碱性磷酸酶、谷草转氨酶活性均差异显著(P<0.05);感染隐孢子虫后28d,血糖浓度,白介素-2、5-羟色胺质量浓度及碱性磷酸酶、谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均发生显著性变化(P<0.05)。【结论】成功构建了鼠隐孢子虫感染犊牛动物模型。隐孢子虫感染对犊牛营养物质的吸收利用有一定影响;与营养物质代谢相关的酶与激素对犊牛感染隐孢子虫后营养物质的吸收利用具有一定的调控作用。; 程帆孙秀梅薛秀恒王菊花李培英周杰刘力源张淑静; 关键词：隐孢子虫犊牛动物模型血液生化指标

4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较被引量：10: 2013年; 【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的细胞进行鉴定,结果表明,分离的细胞多数为小鼠IECs。【结论】嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法均适合肠道上皮细胞的分离和培养。; 孙秀梅程帆刘维孙涛薛秀恒李培英王菊花; 关键词：小鼠小肠上皮细胞

响应曲面法优化牛奶中雌二醇的微波提取工艺被引量：1: 2015年; 为优化牛奶中雌二醇的微波提取工艺,在单因素实验的基础上,利用响应曲面法考察液料比、微波功率和微波时间对雌二醇提取率的影响,优化提取工艺。结果表明:牛奶中雌二醇微波提取的优化工艺条件为:液料比4.1∶1,微波功率475 W,微波时间61 s。在此条件下,雌二醇的最高提取率为92.77%。与超声提取方法相比,微波提取工艺具有提取时间短,得率高,能耗低,环保等优点。; 曹玉林吴林昊丁郭影胡琪琳薛秀恒王志耕; 关键词：牛奶雌二醇微波提取响应曲面法

中性蛋白酶水解β-乳球蛋白的条件优化被引量：2: 2013年; 本试验选择用中性蛋白酶水解β-乳球蛋白,通过单因素与正交试验,以甲醛滴定法测定蛋白水解后氨基酸态氮含量,筛选出中性蛋白酶水解β-乳球蛋白的最佳条件。试验表明,最佳底物质量浓度为1 mg/mL,酶解温度50℃,pH 7.2,酶与蛋白浓度比3%、酶解时间6 h。; 徐洪军丁郭影薛秀恒吕高婧利恩乐董永涛; 关键词：中性蛋白酶 Β-乳球蛋白酶解氨基酸态氮

冷藏原料乳中荧光假单胞菌的分离鉴定及其产蛋白酶特性研究被引量：4: 2013年; 【目的】对冷藏原料乳中易污染的嗜冷菌进行分离筛选，为提高乳品品质、控制乳品质量提供参考。【方法】从冷藏原料乳中筛选出1株嗜冷菌，通过形态学观察、生理生化试验、16S rDNA分子生物学分析，对该株嗜冷菌进行鉴定；并采用福林酚试剂法、蛋白酶定性检测试验、耐热性试验以及牛奶酸度、黏度影响等试验，对其产酶特性进行研究。【结果】从冷藏原料乳中分离出的该株嗜冷菌为革兰氏阴性短杆菌，与GenBank中登录的荧光假单胞菌的生理生化特征相符，二者同源性为92.5%～97.6%。对该菌产胞外酶能力的研究发现，该菌所产胞外酶为一种耐热碱性蛋白酶，最适温度为30 ℃，最适pH为8.0，可引起牛乳黏度增大、凝集和乳清析出。【结论】从冷藏原料乳中分离出了嗜冷荧光假单胞菌，该菌所产胞外碱性蛋白酶会引起牛乳黏度增加、凝集和乳清析出，明显缩短乳品的保质期。; 吕高婧刘艳玲徐洪军薛秀恒王志耕梅林何攀方如兰; 关键词：牛乳荧光假单胞菌碱性蛋白酶

真空低温喷雾干燥机干燥酪蛋白粉工艺研究被引量：4: 2015年; 用酶凝块法制备酪蛋白液,以酪蛋白溶液为原料,采用单因素试验和响应面试验优化酪蛋白粉在低温条件下喷雾干燥工艺。结果表明:喷雾干燥时选用的助干剂为β-环状糊精,酪蛋白液喷雾干燥最佳浓度为20%,真空度达到-0.05^-0.06 MPa,酪蛋白粉低温喷雾干燥最佳工艺条件为:进风温度为111℃、进料速度为6 m L/min、助干剂用量为4%,得率达到26.89%。; 束天锋曹玉林刘艳玲吴林昊薛秀恒; 关键词：真空低温喷雾干燥

牛奶中三种糖醇类甜味剂的气相色谱测定及前处理方法研究被引量：6: 2015年; 利用冷冻干燥处理与毛细管气相色谱外标法测定牛奶中的糖醇类甜味剂。牛奶用乙酸锌和氢氧化钡除去蛋白质后,经冷冻干燥,样品中的糖醇与吡啶-乙酸酐（1∶1,v/v）于90℃反应30min,生成的糖醇乙酰酯衍生物经HP-5毛细管柱色谱分离,氢火焰离子化检测器检测。结果表明：与旋转蒸发相比,冷冻干燥处理样品的回收率更高。在优化的色谱条件下,本方法在10~90μg/m L范围内线性关系良好（r=0.9974~0.9999）,重复性好（RSD=1.37%~2.04%）,平均加标回收率在91.17%~92.06%之间。该方法简单、快速、灵敏,适用于牛奶中糖醇类甜味剂含量的测定。; 曹玉林束天锋刘艳玲薛秀恒梅林王志耕孙郭艳; 关键词：牛奶糖醇冷冻干燥气相色谱

荞麦鲜奶酪发酵工艺研究及其质量评价被引量：8: 2016年; 以牛乳、荞麦为原料,开发研制荞麦鲜奶酪。在单因素试验的基础上,采用响应面分析方法,优化荞麦添加量、发酵温度与发酵时间的工艺参数,并对最终产品进行质量评价。荞麦鲜奶酪生产的最优工艺参数为荞麦添加量4%、发酵剂添加量0.015%、发酵温度42.6℃、发酵时间7.1 h。所制备的酸乳凝乳状态良好,乳清析出少且澄清,荞麦鲜奶酪咀嚼性适中,带有荞麦独有的香气,且质量较优,是一种营养丰富的特色鲜奶酪。; 薛秀恒曹玉林杨晓飞吴林昊胡琪琳王攀郑悦; 关键词：牛乳荞麦发酵工艺

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安徽省自然科学基金(11040606M91)

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