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microRNA在肝癌发生发展及诊治中的作用被引量：2: 2015年; microRNA（ miRNA）是一类由20~24个核苷酸组成的单链非编码RNA,通过与靶mRNA互补配对,在转录后水平调控目的基因表达,参与肿瘤的发生发展。对于常见肿瘤之一肝细胞癌（ hepatocellular carcinoma, HCC）,也发现了众多miRNA的异常表达,并且有的影响了HCC的发生发展,其中一些HCC特异性miRNA还作为HCC诊断和预后判断的重要生物学标志；某些HCC发生中的关键miRNA还可能是未来HCC潜在治疗靶点。本文就miRNA 在HCC发生发展、诊断预后等方面的研究进展作一综述。; 赵源源李华吴敬波张涛; 关键词：MICRORNA HCC 预后

MicroRNA-1对肝癌细胞BAG4表达的影响被引量：7: 2014年; 目的观察microRNA-1(miR-1)对肝癌细胞系Hep3B死亡结构域沉默子(BAG4)的表达及细胞凋亡的影响。方法 Western blot检测肝癌组织中BAG4蛋白表达情况;将过表达miR-1的质粒转染肝癌细胞Hep3B,分别用RT-qPCR及Western blot检测BAG4 mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡;生物信息学软件分析miR-1和BAG4 3’UTR作用关系。结果 BAG4蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织;Hep3B转染miR-1过表达质粒后,相较于阴性对照(NC)组,BAG4mRNA和蛋白水平的表达均有所降低;早期凋亡率明显增高。生物信息学分析提示BAG4是miR-1潜在靶基因。结论 miR-1可以诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,其作用可能和抑制BAG4表达有关。; 刘煜李华李东张涛; 关键词：肝癌 MICRORNA-1 凋亡

miR-1抑制SDF-1表达和分泌调控HMSC-bm向肝癌细胞迁移被引量：1: 2014年; 目的明确肿瘤抑制性micro RNA-1(miR-1)能否通过抑制SDF-1的表达和分泌,调控骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)向肿瘤组织的转移。方法 (1)分别利用miR-1表达质粒pSuper-miR-1和miR-1反义寡核苷酸,在肝癌细胞系HepG2中过表达或下调miR-1,Western blot和酶联免疫吸附实验分别检测肝癌细胞蛋白裂解物和培养上清液中SDF-1的表达和分泌水平;(2)构建融合SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因载体,将其与pSuper-miR-1共转染HEK293细胞,利用双萤光报告基因检测系统检测重组萤光素酶的表达情况。(3)利用pSuper-miR-1或miR-1反义寡核苷酸转染接种于Transwell下层小室的HepG2细胞过表达miR-1或下调miR-1水平,检测Transwell上层小室HMSC-bm向下层小室HepG2肝癌细胞的迁移情况。结果 (1)在肝癌细胞,HepG2过表达miR-1能够显著抑制SDF-1蛋白表达和分泌,而下调miR-1水平则能够诱导SDF-1的表达和分泌。(2)miR-1能够抑制携带SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因活性。(3)在Transwell下层小室的HepG2细胞中过表达miR-1后,上层小室中HMSC-bm向下层小室迁移细胞数量显著减少,而下调下层小室HepG2细胞中miR-1表达水平,则明显增加HMSC-bm向HepG2肝癌细胞的迁移。结论 miR-1能够直接抑制肝癌细胞SDF-1的表达和分泌,并藉此降低肝癌细胞对HMSC-bm的趋化作用。; 张涛李东彭晶晶宋晓峰李华杜敏吴敬波谭勇周进军许涛陈滔付曾强冯建琼刘煜; 关键词：SDF-1 骨髓间充质干细胞迁移

血清多种肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值被引量：57: 2015年; 目的探讨多肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断的临床价值。方法应用蛋白芯片法检测肺癌组(n=1 021)及健康体检者(n=827)血清中糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)及糖类抗原15-3(CA15-3)的表达水平。结果不同病理类型肺癌中,4种血清肿瘤标志物在非小细胞肺癌中的阳性率均明显高于小细胞肺癌,差异有统计学意义(P<0.05)。CA19-9、CEA、CA125及CA15-3 4种肿瘤标志物单项检测对肺癌诊断的敏感性、特异性均不高;联合检测时诊断敏感性未见明显改善,但随着联合检测标志物种类的增加,特异性明显增加,均在98%以上。4项联合检测时对肺癌诊断具有最高的特异性(100%)。结论 CA19-9、CEA、CA125及CA15-3 4种肿瘤标志物联合检测能明显增加诊断的特异性。; 汪广杰王东张涛; 关键词：肺肿瘤癌胚抗原

肝癌Huh7干细胞样细胞的富集培养及鉴定被引量：2: 2013年; 目的：建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌于细胞特征的细胞亚群的方法。方法：采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞（cancerstemcell，CSC）分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养，获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝癌干细胞球。流式细胞术检On,0Huh7干细胞样细胞表面肿瘤干细胞标志物EpCAM、CD90和CDl33的表达，平板克隆集落形成实验和裸鼠成瘤实验分别检测Huh7细胞和Huh7干细胞样细胞的克隆集落形成能力、体内成瘤能力。结果：Huh7细胞成球培养3～7d后即可形成肝癌干细胞样细胞球，获得的干细胞样细胞具有自我更新和增殖能力，其EpCAM阳性细胞比例较Huh7细胞明显增加[（99．6％±0．31）％猫（0．12％±O．05）％，P〈0．01]，但两种细胞CD90[（0．11％±0．06）％US（0．09％±0．07）％，P〉0．05]和CDl33[（0．17％±0．08）％椰（0．15％±0．05）％，P〉0．05l表达差异无统计学意义。Huh7干细胞样细胞克隆集落形成数量明显多于Huh7细胞[（188．67±12．5）协（79±16．7）个，P〈0．01]；当接种量为5X10^4个细胞时，与接种Huh7细胞的对照裸鼠相比，接种Huh＇／干细胞样细胞的裸鼠成瘤时间更短（1I”s30d），成瘤率更高（100％郴16．67％）；接种5×10’数量级的细胞时，实验组成瘤体积[（171．90±10．94）伽（86．39±11．21）mm^3P〈0．01]和瘤体质量[（2．984±0．82）vs（0．324±0．17）g，P〈0．01]均明显大于对照组。结论：利用成球培养法能够从Huh7肝癌细胞系中富集培养获得Huh7肝癌干细胞，其具有比Huh7细胞更强的成瘤能力。; 张涛李东漆仲春彭晶晶陈滔谭勇周进军许涛付曾强刘煜李华; 关键词：肝癌

微小RNA与肿瘤干细胞的研究进展被引量：2: 2014年; microRNAs（ miRNAs）是一类长21--23个核苷酸的单链非编码RNA,在调节细胞自我更新,分化和转移过程中扮演着重要角色。肿瘤干细胞（ cancer stem cells,CSCs）是肿瘤的起源性细胞,具有自我更新、放化疗耐受的特性,是肿瘤难以治愈并不断进展的重要原因。研究表明,miRNAs在肿瘤干细胞的发生发展过程中起着重要作用,因此,miRNAs也成为研究肿瘤干细胞潜在的新途径。; 李韵李华吴敬波张涛; 关键词：肿瘤干细胞自我更新多向分化

基于HRP催化过硫酸盐阴极电致化学发光的非标记型免疫传感器被引量：1: 2014年; 基于酶催化阴极电致化学发光(ECL)构建灵敏的免疫传感器用于肿瘤标志物检测。利用过氧化氢酶(HRP)催化H2O2底物反应产生大量溶解氧,催化增强S2O82-的阴极ECL信号,构建非标记型免疫传感器。当抗原蛋白在电极表面与抗体形成免疫复合物时,屏蔽了检测液中底物与电极表面固载酶之间的接触并阻碍了电子传递,使ECL信号强度随抗原浓度增加而减小,建立ECL信号与待测物浓度之间的线性依赖关系,实现对血清中肿瘤标志物CEA的快速灵敏检测,检测限达1.04 ng/mL。; 汪广杰王东张涛; 关键词：过硫酸盐 HRP 免疫传感器

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四川省自然科学基金(2012SZ0058)

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