湖南省自然科学基金(04JJ6048)
- 作品数：5 被引量：29H指数：3
- 相关作者：唐晓鹏张旻曾妍田沂陈丽敏更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院中南大学株洲市一医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐带血单个核细胞体外培养分化为肝细胞的实验观察被引量：14
- 2006年
- 目的探讨脐带血单个核细胞在体外定向分化为肝细胞的条件及能力,为建立脐血干细胞移植治疗慢性肝衰竭提供实验依据。方法采集脐带血分离单个核细胞后,在实验组加入成纤维细胞生长因子(FGF)及促肝细胞生长因子(HGF)、或FGF加胎肝上清液培养,对照组只加FGF培养,观察细胞生长分化状况,免疫组化检测两组人甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)。结果实验组可见类圆形及多边形细胞,呈类肝细胞形态,对照组大多为梭形细胞,未见多边形细胞;实验组细胞AFP、Alb免疫组化染色为阳性,对照组未见AFP,Alb阳性细胞。HGF的诱导分化效果优于胎肝上清液。结论脐带血单个细胞在HGF或胎肝上清液的诱导下可以定向分化为能分泌Alb及AFP的类肝细胞。
- 唐晓鹏张旻陈丽敏田沂李异曾妍
- 关键词：脐带血单个核细胞脐带血细胞分化类肝细胞
- 脐血有核细胞输注治疗慢性肝衰竭的初步临床观察被引量：9
- 2008年
- 目的探讨人脐血有核细胞移植(HUCBNCT)治疗慢性重型肝炎肝衰竭的临床治疗效果,以及HUCBNCT对重型肝炎患者肝组织内胆管增生及肝卵圆细胞增生的影响。方法将90名慢性重型肝炎患者随机分为2组,分别予以同血型成人血浆(对照组)或HUCBNCT(治疗组)治疗,2组中分别有部分患者行肝穿刺病理检查及肝组织细胞角蛋白19(CK19)、CD34、白蛋白和甲胎蛋白(AFP)检测。结果HUCBNCT组患者肝细胞坏死较轻,肝组织CK19阳性率高于对照组;部分非典型胆管增生细胞同时表达CK19和白蛋白,在形态上和细胞表型上符合肝卵圆细胞特征。结论HUCBNCT对于慢性重型肝炎具有一定的疗效,在改善肝脏功能方面优于同血型成人血浆,其促进慢性重型肝炎患者肝组织内非典型胆管细胞增生及肝卵圆细胞增生可能是其作用机制之一。
- 唐晓鹏王文龙张旻曾妍田沂
- 关键词：有核细胞病毒性脐带血
- 人胚胎原始生殖细胞移植治疗大鼠急性肝损伤
- 2008年
- 目的：胚胎原始生殖细胞能以原始胚胎状态无限增殖,并可通过异体移植或适宜的体外环境自然分化为胚胎生殖层。实验拟进一步观察体外培养的胚胎原始生殖细胞对急性肝损伤大鼠的治疗效果,及其能否在大鼠体内分化为肝细胞。方法：实验于2003-09/2005-05在中南大学肝病研究所完成。①细胞及动物：经中南大学湘雅二医院医学伦理委员会批准,取孕4～12周流产人胚胎,其双亲3代内无遗传性疾病,孕妇对流产胚胎用于实验均签署知情同意书。清洁级健康成年SD大鼠50只,随机数字表法分为5组：培养基对照组、单纯人胚原始生殖细胞组、人胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组、单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞＋环磷酰胺组,10只/组。另选取健康成年SD孕鼠4只用于分离鼠胚原始生殖细胞。动物均由中南大学湘雅二医院动物实验中心提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：从人胚胎中分离出原始生殖嵴组织,悬浮培养获取人胚原始生殖细胞,用含15%胎牛血清的高糖DMEM基础培养基调节细胞浓度至1×10^8L^-1。取SD孕鼠胚胎分离生殖嵴,消化离心培养鼠胚原始生殖细胞,浓度1×10^8L^-1。各组大鼠均于腹腔内注射D-氨基半乳糖建立急性肝损伤模型,造模后48h,培养基对照组自尾静脉输注基础培养基,其余4组给予对应细胞悬液及免疫抑制剂环磷酰胺。③实验评估：从细胞形态、表面标记及体外分化等方面检测人胚原始生殖细胞的生物学特性;比较各组大鼠肝功能、增殖细胞核抗原阳性率、糖原染色阳性率、肝脏病理改变;检测各组大鼠肝脏病理切片中人白蛋白、甲胎蛋白的表达。结果：①人胚原始生殖细胞的生物学特性：培养1d后单个原始生殖细胞形成细胞集落,以后集落逐渐增大并隆起,形成鸟巢状,周边界限清晰,内部细胞排列紧密。�
- 唐晓鹏陈丽敏唐元媛陈丁张旻
- 关键词：原始生殖细胞胚胎干细胞急性肝损伤细胞移植
- 当归枸杞制剂诱导脐血单个核细胞分化为肝细胞后人白蛋白的表达被引量：2
- 2011年
- 背景:部分中药能够促进造血干细胞的生长及分化。目的:观察当归、枸杞制剂促进人脐血单个核细胞生长分化为肝细胞的作用、作用条件及对肝衰竭的治疗效果。方法:分离人脐血单个核细胞,加入不同剂量的当归及枸杞制剂,比较不同剂量当归及枸杞制剂对脐血单个核细胞及其转化为肝细胞后人白蛋白mRNA及人甲胎蛋白mRNA表达的影响。腹腔内注射D-氨基半乳糖建立大鼠肝衰竭模型,随机分为生理盐水对照组、脐血单个核细胞组、脐血单个核细胞与当归、枸杞制剂灌胃和腹腔内注射免疫抑制剂不同组合8组,检测大鼠肝功能变化。结果与结论:90mg/L当归、40mg/L枸杞制剂可促进单个核细胞的增殖和分化,并加快脐血单个核细胞分化为肝细胞,两者联合无药物协同作用。单独应用当归与枸杞对大鼠肝损伤均有一定的修复作用,与单个核细胞联合均可促进单个核细胞向肝细胞分化,增强修复肝损伤的作用,并且当归的修复效果优于枸杞。加用环磷酰胺后并不能增强当归或枸杞联合单个核细胞的治疗效果。
- 傅京力曾妍龙则灵唐晓鹏
- 关键词：当归脐血单个核细胞肝细胞
- 黄芪注射液促进脐血干细胞向肝细胞分化 具有增强移植干细胞治疗大鼠肝衰竭的效果被引量：10
- 2010年
- 背景:在脐血干细胞移植治疗肝功能衰竭研究中,文献报道黄芪制剂可刺激造血干/祖细胞的增殖。目的:观察黄芪注射液在体内外促进脐血干细胞向肝细胞的分化,以及增强脐血干细胞移植治疗大鼠肝衰竭的效果。方法:取传至三四代的人脐血干细胞,药物筛选实验设立4组,分别加入0,40,200,400mg/L黄芪,筛选适宜脐血干细胞生长的黄芪浓度;干细胞分化实验设立2组,分别加入肝细胞生长因子10μg/L、肝细胞生长因子10μg/L+黄芪200mg/L。采用腹腔内注射D-氨基半乳糖法制备大鼠肝衰竭模型,建模48h后仍存活的大鼠随机分为6组:模型对照组、黄芪组、鼠外周血单个核细胞组、联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组。RT-PCR法检测大鼠肝脏组织甲胎蛋白及白蛋白mRNA的表达,观察相关肝功能指标的变化。结果与结论:不同质量浓度的黄芪制剂对人脐血干细胞生长影响不同,200mg/L黄芪最适宜细胞生长和增殖。与单纯加入肝细胞生长因子的人脐血干细胞比较,另加入200mg/L黄芪的人脐血干细胞白蛋白免疫组化染色阳性细胞数明显增加(P<0.05)。随干预时间的延长,联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组肝脏组织白蛋白mRNA的表达均强于鼠外周血单个核细胞组;而甲胎蛋白mRNA的表达在早期均强于鼠外周血单个核细胞组,在后期则表达消失。干预7d后,联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶及总胆红素下降幅度均明显大于模型对照组、黄芪组、鼠外周血单个核细胞组(P<0.05),而此3组间各项指标的变化无明显差异(P>0.05)。提示200mg/L黄芪在体内及体外均可以促进人脐血干细胞生长并分化为肝细胞,减轻肝脏损害,增强脐血干细胞移植治疗肝衰竭的效果。
- 张永红曾妍唐晓鹏
- 关键词：细胞分化肝细胞人脐血干细胞干细胞
