河南省自然科学基金(0611044900)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：王琳吴逸明张慧珍赵向锋金蕾更多>>
- 相关机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：郑州市科技攻关计划项目河南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 铁蛋白轻链的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
- 2007年
- 目的:构建FTL的原核表达载体,获得FTL纯化蛋白,制备抗体,为研究其生物学作用奠定基础。方法:采用基因重组技术将PCR扩增的FTL基因产物与原核表达载体pET30a(+)连接,转化入大肠杆菌BL21(DE3),通过PCR、单双酶切及测序鉴定构建结果,用IPTG诱导蛋白表达,将融合蛋白纯化后,免疫日本大白兔,制备FTL多抗,采用Western印迹法检验抗体特异性。结果:成功地构建了FTL的原核表达载体,经大肠杆菌中诱导表达、镍亲和层析柱纯化,得到较纯的相对分子质量约25800的融合蛋白,免疫日本大白兔后得到多抗血清,Western印迹结果显示此多克隆抗体与FTL蛋白特异性结合。结论:本研究获得FTL纯化蛋白,制备了FTL多克隆抗体,为进一步研究FTL的作用机制及其在肺癌组织中的表达情况奠定了基础。
- 金蕾张慧珍杨继要赵向锋王琳吴逸明
- 关键词：铁蛋白原核表达重组融合蛋白质类
