广东省自然科学基金(07005974)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：王立伟陈丽新柏志全马文波叶文才更多>>
- 相关机构：暨南大学广东医学院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蟾蜍灵激活低分化鼻咽癌细胞氯通道被引量：4
- 2011年
- 目的:研究蟾蜍灵(bufalin)对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用以及通道的特性。方法:采用全细胞膜片钳技术记录蟾蜍灵激活CNE-2Z细胞膜电流并分析其电流特征。结果:细胞外灌流1μmol/L的蟾蜍灵可诱发CNE-2Z细胞产生一个氯电流,该电流潜伏期较长,为(12.1±6.4)min,其翻转电位接近氯离子平衡电位。该电流具有较明显的外向优势,没有明显的时间依赖性失活和电压依赖性失活。氯通道阻断剂他莫昔芬(tamoxifen)可完全抑制该电流,细胞外灌流高渗液也可完全抑制该电流。结论:蟾蜍灵可以激活CNE-2Z细胞氯通道产生氯电流,与容积激活性氯电流相比,该电流的潜伏期较长,并且有更明显的外向优势。
- 罗海兵李华荣刘善文彭爽刘振锋叶文才张冬梅陈丽新王立伟
- 关键词：蟾蜍灵鼻咽肿瘤氯通道
- 人急性淋巴细胞白血病细胞容积激活性氯电流的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究人急性淋巴细胞白血病细胞系(Molt4细胞)容积激活性氯电流。方法:采用膜片钳全细胞方式记录细胞外低渗液(160mOsmol/L)激活的Molt4细胞容积激活性氯电流,分析该电流的特性。结果:Molt4细胞在等渗溶液中背景电流较小且稳定,低渗溶液诱导激活容积激活性氯电流,该电流呈现较明显的外向优势,在钳制电压0mV～±120mV及脉冲波宽200ms条件下,没有观察到明显的电压依赖性失活和时间依赖性失活。该电流具有容积敏感性,可被细胞外高渗刺激所抑制。氯通道阻断剂他莫昔芬显著抑制容积激活性氯电流,对内向电流和外向电流的抑制作用无显著差异。结论:Molt4细胞膜存在容积敏感性氯通道;低渗刺激可激活该通道产生容积激活性氯电流;该通道对氯通道阻断剂他莫昔芬敏感。
- 曹国振左婉红马文波李媛叶文才朱林燕徐兵王立伟陈丽新
- 关键词：氯通道膜片钳术
- 氯通道在华蟾酥毒基诱导的鼻咽癌细胞凋亡中起重要作用被引量：10
- 2011年
- 目的:研究氯离子通道在华蟾酥毒基(CBG)诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡和凋亡性容积减小中的作用。方法:实验设立空白对照组、CBG高、中、低剂量组及CBG与氯通道阻断剂NPPB联合作用组。Hoechst 33342染色检测细胞的凋亡率,活细胞图像分析法检测细胞容积变化,全细胞膜片钳法记录氯电流。结果:(1)CBG浓度依赖性诱导鼻咽癌细胞凋亡,高剂量CBG(8μmol/L)诱导的细胞凋亡率为43.2%;(2)CBG可诱导细胞产生凋亡性容积减小,在CBG作用早期(50 min),细胞容积减小约9.9%。(3)CBG可激活氯通道,产生一个无明显外向优势的氯电流。(4)氯通道阻断剂NPPB可抑制CBG诱导的细胞凋亡、凋亡性细胞容积减小和氯电流。NPPB对CBG诱导的细胞凋亡和凋亡性容积减小的抑制率分别达80.1%和74.8%。结论:以上结果提示CBG可能通过激活氯通道而诱导细胞凋亡,氯通道的激活可能在CBG抗肿瘤机制中起重要作用。
- 柏志全李春英李媛马文波朱林燕叶文才张冬梅王立伟陈丽新
- 关键词：华蟾酥毒基凋亡氯通道
- 细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。
- 柏志全张海峰陈丽新朱林燕左婉红和树同王立伟
- 关键词：细胞周期蛋白D1绿色荧光蛋白质粒构建免疫荧光免疫印迹
