江苏省卫生厅医学科技发展基金(J200310)
- 作品数:5 被引量:15H指数:3
- 相关作者:苏长青林彬朱杰敏周梅芳沈明明更多>>
- 相关机构:第二军医大学无锡卫生高等职业技术学校宜兴市人民医院更多>>
- 发文基金:江苏省卫生厅医学科技发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- AFP启动子控制的在肝癌细胞中特异性表达绿色荧光蛋白报告基因的腺病毒载体的研究被引量:1
- 2006年
- 目的研究由AFP启动子控制的腺病毒载体在肝癌细胞中定向表达报告基因活性。方法采用分子生物学技术手段。将AFP启动子和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因插入腺病毒载体质粒中,并在293细胞中重组出携带GFP基因的腺病毒AdAFP—GFP。荧光显微镜下观察GFP基因在肝癌细胞中的特异性表达。结果AdAFP—GFP能够介导GFP基因在肝癌细胞中特异性表达,多数细胞呈现荧光反应,而在正常细胞中未发现GFP的表达。结论采用AFP启动子可以实现目的基因在肝癌细胞中定向而特异性表达,这项研究应用于抗肿瘤基因治疗,将有利于显著提高治疗效果。
- 高三度林彬周梅芳程剑苏长青
- 关键词:肝癌AFP启动子报告基因腺病毒
- 原发性肝细胞肝癌发生发展中p16基因的遗传学改变被引量:6
- 2005年
- 目的研究人原发性肝细胞肝癌中pl6基因DNA水平上发生的遗传学改变。方法采用聚合酶链反应(PCR)和全自动序列分析的方法,研究84例肝癌和癌旁肝组织中pl6基因第1、2外显子纯合缺失和点突变的情况。结果84例肝癌标本中p16基因第1外显子缺失9例,第2外显子缺失23例,其中有3例第1、2外显子共同缺失,总缺失率为34.5%。未发生基因缺失的病例,经过全自动序列分析,未发现点突变。结论原发性肝细胞肝癌中p16基因失活的主要机制是基因纯合缺失,点突变发生率可能非常低。而未发生基因缺失和突变的肝癌,以及发生p16蛋白阴性表达的癌旁肝组织,p16基因失活的原因可能是包括基因甲基化在内的其他遗传学改变引起的。
- 沈明明周梅芳杨健林彬顾蒙曦周肖英
- 关键词:原发性肝细胞肝癌P16基因纯合缺失
- p16基因的失活与肝癌生物学行为的关系被引量:3
- 2006年
- 周梅芳沈明明杨健林彬朱杰敏冯放
- 关键词:原发性肝细胞肝癌P16基因基因失活癌生物学行为免疫组化方法P16蛋白
- 肝癌细胞中定向表达p16基因的腺病毒载体的构建及其活性表达被引量:2
- 2005年
- 目的:克隆AFP启动子和p16基因全长cDNA,构建在肝癌细胞中定向表达p16基因的腺病毒载体,研究p16基因表达对肝癌细胞的影响。方法:采用分子生物学技术手段,克隆AFP启动子和p16基因全长cDNA,将其插入腺病毒载体质粒中,并在293细胞中重组出携带p16基因的腺病毒AdAFP-p16。WesternBlot检测p16基因在肝癌细胞中的特异性表达。细胞病变效应(CPE)观察p16基因表达对肝癌细胞生长的抑制作用。结果:AdAFP-p16能够介导p16基因在肝癌细胞中特异性表达,而对正常细胞中p16的表达没有影响;p16基因表达能够特异性抑制肝癌细胞的生长。结论:采用AFP启动子可以实现p16基因的肝癌细胞中定向而特异性表达,提高基因表达产物在肿瘤局部的浓度,有利于提高治疗效果。
- 周梅芳高三度王立文林彬朱杰敏孙健苏长青
- 关键词:肝癌AFP启动子P16基因腺病毒基因治疗
- 靶向肝癌表达p16基因的腺病毒载体对裸鼠移植瘤的抗癌活性被引量:3
- 2008年
- 目的:利用已构建好的在肝癌细胞中定向表达p16基因的腺病毒载体AdAFP-p16,研究腺病毒介导p16基因的表达对肝癌裸鼠移植瘤的抗癌活性。方法:培养肝癌细胞SMMC-7721,于裸鼠右侧腹部近腋下皮肤注射1×106细胞数细胞悬液,建立裸鼠肝癌移植瘤模型。成瘤后给于瘤体内AdAFP-p16病毒注射治疗,病毒总量1×109pfu/只,观察AdAFP-p16对肝癌模型的抗肿瘤疗效以及p16基因表达引起的肝癌细胞病理变化。结果:AdAFP-p16能够介导p16基因在肝癌细胞中特异性表达,具有明显的肿瘤生长抑制作用,抑制率可达60.12%(P<0.01),引起肝癌细胞的坏死。结论:AFP启动子控制的p16基因在肝癌细胞中定向表达,能够抑制肝癌模型的生长,对肝癌综合治疗具有重要意义。
- 周梅芳林彬朱杰敏高三度苏长青
- 关键词:肝癌P16基因腺病毒靶向基因治疗