国家科技支撑计划(2009BAK43B31)
- 作品数：23 被引量：105H指数：6
- 相关作者：田桢干何宇平张继伦曹敏丁卓平更多>>
- 相关机构：上海出入境检验检疫局上海海洋大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划上海市教育委员会重点学科基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程石油与天然气工程更多>>
- 添加有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法被引量：20
- 2010年
- 【目的】发掘副溶血弧菌特异性更强的检测靶点,并人工构建扩增内标,建立可以有效避免假阴性的新PCR检测体系。【方法】利用生物信息学方法,从副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)基因组DNA中发掘特异性很高的序列,并设计相应的特异性引物,人工构建扩增内标,建立PCR检测体系。【结果】本研究发掘得到的序列vp1332特异性很强,经检索,该序列是编码ABC转运子接合蛋白组分的基因片段,根据此序列设计一对特异检测引物(vp1332L/vp1332R),同时,构建了扩增内标,并建立了PCR检测体系。利用该体系对296株副溶血弧菌和33株非副溶血弧菌进行检测,结果显示,所有以副溶血弧菌为模板的PCR反应均可扩增到一条343bp的特异片段,而模板来源于非副溶血弧菌的则只能扩增到一条499bp的扩增内标片段。灵敏度实验表明,该PCR反应体系的检测灵敏度为1.6×102cfu/mL。人工污染实验表明,起始染菌量为1.24cfu/25g样品时经8h增菌,即可检测到副溶血弧菌。实际样品检测结果也证实该方法的有效性。【结论】本研究建立的PCR反应体系能特异地检测副溶血弧菌,并可有效地排除假阴性,提高检测准确率。
- 何晓华余水静陈万义施春雷孟江洪史贤明
- 关键词：副溶血弧菌PCR检测扩增内标假阴性
- 上海口岸输入的蚊虫被引量：9
- 2011年
- 目的掌握上海口岸蚊虫输入情况。方法蚊虫形态鉴定。结果上海口岸输入的蚊虫有7属30种。这些蚊虫来源地域广泛,以欧洲和美洲为主,占输入蚊虫总数的80.0%,其中18种为上海无分布种类,6种与人类生活密切相关。结论上海口岸输入的蚊虫传播疾病的风险高,必须有针对性地加强监测和检疫查验。
- 曹敏何宇平李平田桢干
- 关键词：蚊虫
- 鼠疫耶尔森菌感染动物血清标本中10种抗体检测与分析
- 2012年
- 目的分析鼠疫耶尔森菌(Y.pestis)感染动物血清标本中鼠疫抗体的分布规律,寻找新的鼠疫血清学辅助诊断靶标。方法采用自制的酶联免疫吸附试验板条检测不同种属的Y.pestis感染动物血清标本(狗血清5例、羊血清5例及黄鼠血清14例)中的10种靶标抗体。结果各靶标抗体在3种不同种属动物血清标本中具有不同的阳性率;抗FI抗体阳性率最高(100.0%),抗YopD抗体的阳性率较高(狗、羊和黄鼠血清标本的阳性率分别为80.0%、100.0%和78.6%),针对LcrV、YPO1089、YPO1613、YPO2131、YPO2118、YPO1435这6个蛋白的抗体在3种血清标本中的阳性率差异较大,抗YPO3827抗体和抗YPO1303抗体在3种血清标本中的阳性率均较低。结论除抗FI抗体外,针对其他抗原的抗体的分布均存在种属差异,抗YopD抗体有可能成为新的Y.pestis感染辅助诊断靶标。
- 洪文艳王浩然郭兆彪王津周蕾杨瑞馥
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌酶联免疫吸附测定
- 金黄色葡萄球菌特异性PCR检测靶点的自动化筛选
- 2011年
- 旨在挖掘用于鉴定金黄色葡萄球菌的高特异性靶点及其PCR检测引物。采用C++语言编程,以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus MRSA 252基因组编码序列为对象,对2 656个可编码区进行分析,获得特异性靶点序列,并设计PCR扩增引物。对包括葡萄球菌属11个种及其他细菌属在内的共计137株细菌验证引物特异性,筛选获得9个DNA序列,并设计了4对引物。经验证2对引物的特异性较好,其中引物SA3的基因组DNA检测限为13.7 fg/μL,菌体检测限为9.25×102 CFU/mL。结果验证了特异性DNA靶点筛选平台的实用性,该方法突破了传统特异性靶点挖掘方法对检测对象的限制,适用性广,可移植性强。
- 范一灵朱东升胡瑜史贤明
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因组C++编程
- 高效液相色谱法测定食品中对苯二酸和间苯二酸残留量被引量：1
- 2010年
- 对苯二酸（TPA）和间苯二酸（IPA）是生产聚酯纤维和聚酯树脂（PET）的原料,TPA和IPA存在于PET树脂中。在罐头涂层加工过程中,液态PET树脂涂覆于金属表面上,然后在200℃加温固化,最后加工成形。研究发现TPA可以影响水生生物的生长、发育和繁殖,可使哺乳动物诱发产生膀胱结石、肾结石甚至膀胱癌。对人体的泌尿系统和呼吸系统有毒性,可能具有潜在的遗传毒性。
- 周浩方晓明徐向华王传现丁卓平李文斌
- 关键词：对苯二酸高效液相色谱法残留量PET树脂食品遗传毒性
- 副溶血性弧菌活的非可培养状态及其复苏菌株特性的分析被引量：7
- 2010年
- 将副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus BJ1.1997和Vibrio parahaemolyticus BJ1.1616分别于低温(4℃)寡营养(人工海水、陈海水)条件和低温(4℃)富营养条件(TSB-3%NaCl)下进行诱导实验。结果显示,两菌株皆可进入活的非可培养状态(Viable but Non-Culturablestate,VBNC),且进入VBNC状态的菌株对小白鼠无致病性。运用升温复苏等多种方法对已经进入VBNC状态的副溶血性弧菌进行复苏,并对复苏菌株的生长曲线、生理生化指标和毒力基因进行测定。结果表明,部分菌株复苏成功,复苏后菌株的生理生化指标和毒力基因与标准菌株基本相同,但V.pA7F(Vibrio parahaemolyticus BJ1.1997复苏菌株)的生长活性有所下降,并且其trh毒力基因和脲酶反应均为阴性。以上结论皆为研究副溶血性弧菌VBNC和食品安全控制提供理论依据。
- 郝小斌宁喜斌张继伦
- 关键词：副溶血性弧菌毒力基因
- 江苏口岸输入性蝇类携带细菌监测研究被引量：4
- 2011年
- 目的对江苏口岸输入性蝇类携带细菌进行监测,防止相关疾病的发生和流行,同时为口岸卫生处理提供技术支持。方法用研磨器将蝇研碎,用LB、TSA培养基增菌和分离培养,通过革兰氏染色鉴别细菌,然后用全自动微生物鉴定系统对分离后的细菌进行种属鉴定。结果从输入性蝇中共分离鉴定出42种细菌,分属24属,其中革兰氏阳性菌13种,阴性菌29种。结论输入性蝇类携带多种致病或条件致病菌,应加强口岸蝇类监测和卫生处理,控制相应传染病的发生和流行。
- 孙立新丁永键朱临胡红霞于金兰朱国强杨庆贵
- 关键词：输入性细菌
- LAMP技术快速检测沙门氏菌方法的建立及其应用被引量：22
- 2011年
- 目的建立和评价一种适合国境口岸及基层检验部门使用的沙门氏菌快速检测方法,在2010年上海世博会保障期间开展应用研究。方法针对沙门氏菌agfA基因,运用环介导等温扩增技术(loop mediated isothermalamplification,LAMP),设计引物进行检测,在65℃恒温条件下、60 min特异性扩增,荧光显色观察结果。对建立的方法进行特异性、灵敏度试验及模拟样本灵敏度试验,与荧光定量PCR、胶体金方法进行比对。并对54株临床分离阳性样本加以验证。结果沙门氏菌属6种不同血清型菌株LAMP检测都呈阳性,其他4种肠道细菌均为阴性;LAMP法的灵敏度与RT-PCR方法接近,达103CFU/ml,是胶体金检测法的100～1 000倍;54株沙门氏菌临床分离样本实验符合率达到100%。结论 LAMP技术能够在简易的实验条件下快速报告结果,检测成本较低、特异性高、灵敏度高,适合口岸从业人员及基层检验部门进行沙门氏菌的初步筛查工作。
- 田桢干阎俊陆晔王婷章琪张胜萍王传贵
- 关键词：沙门氏菌环介导等温扩增技术快速筛查
- 国境口岸生物反恐和传染病监测现场快速侦检排查辅助系统的应用被引量：2
- 2011年
- 目的开展国境口岸生物反恐和传染病监测现场快速侦检辅助系统应用研究,保障国境口岸卫生安全。方法利用现况流行病学调查方法,对国境口岸生物反恐和传染病监测现场快速侦检辅助系统软件应用情况进行初步评价。结果该系统在机场口岸安装运行以来,共监测入境人数1476575人次,其中有症状的37人次,依靠系统软件进行医学排查26人次,发现疑似病例23例。结论该系统基本实现了对国境口岸传染病监测的全面监控,提高了口岸传染病防控的工作效率和工作质量。
- 陈磊琼田桢干何宇平金亦民王晓东万明伟
- 关键词：上海世博会传染病
- 上海空港口岸卫生微生物监测结果分析被引量：2
- 2010年
- 〔目的〕通过分析上海空港口岸卫生微生物监测结果,讨论口岸卫生监测指标。〔方法〕分析上海空港口岸食品微生物监测结果异常原因。把口岸使用的检测技术和合格判定标准与国内外相应检测试剂和标准比较。〔结果〕上海空港口岸食品、冰和饮水存在的主要微生物问题是菌落总数和大肠菌群超标,仅从养殖水中检出副溶血性弧菌。〔结论〕口岸应积极采用先进技术,完善监测标准,有效阻止携带致病性微生物污染的食品进出国境或在口岸经销食用。
- 张继伦田桢干江珊毅何宇平王慧峰周锡兴
- 关键词：卫生微生物
