公益性行业科研专项(20080324)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：杨欣吴家和罗晓丽田颖川郭文超更多>>
- 相关机构：中国科学院山西省农业科学院棉花研究所新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大肠杆菌甘露糖-6磷-酸异构酶基因(manA/pmi)的克隆及功能鉴定
- 2011年
- 甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi/manA)是当前植物转基因工程的重要选择标记基因,在生物安全上被认为是无害的。根据同源序列从大肠杆菌DH10B基因组中克隆出pmi基因。通过诱导原核表达获得PMI目的蛋白,对粗提和经过镍柱纯化的PMI蛋白进行Western分析和酶活反应鉴定。以上结果表明,PMI蛋白成功诱导,其分子量为46kDa,纯化过的PMI具有高的酶活性,能催化甘露糖-6-磷酸发生异构反应生成果糖-6-磷酸。同时利用pmi基因作为选择基因构建植物表达载体pCPMi,通过农杆菌介导法转化烟草获得转基因植株,PCR检测结果表明96个再生植株有72株为阳性。以上结果表明,克隆的pmi基因具有高的酶活性,并能作为转基因植物的一种选择标记,同时也为转基因植物提供安全的选择标记基因,便于转基因植物的推广。
- 杨欣梁爱华罗晓丽吴家和
- 关键词：大肠杆菌果糖
- 转cry3A基因马铃薯外源蛋白表达和对马铃薯甲虫抗性分析被引量：4
- 2010年
- 利用生物技术工程的方法获得了转cry3A基因马铃薯株系,首先对这些转基因株系的表达量和抗虫性进行分析,结果显示,Cry3A抗虫蛋白在4个株系C3-6,C3-11,C3v-5,C3-9新鲜叶片中表达量分别为1.4,2.8,5.0,9.0μg/mg;4个转基因株系离体叶片喂养马铃薯甲虫6 d的致死率分别为30.0%,46.7%,50.0%,100%,幸存的马铃薯甲虫发育滞后1.4～4.2 d,表明抗虫性和蛋白表达量呈正相关。其次,田间调查C3-9转基因株系幼苗期叶片为害情况低于对照,C3-9百株虫口数为26.6头,对照为1 993头,该株系农艺性状和对照没有明显差异,在不使用任何农药的情况下其产量和使用农药的对照相似。因此,转基因株系C3-9为高抗马铃薯甲虫且农艺性状优良的材料。
- 罗晓丽杨欣郭文超田颖川付文君吴家和
- 关键词：转基因马铃薯ELISA检测致死率马铃薯甲虫
