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家蚕肠道环境对外源纤维素酶活力稳定性影响的研究被引量：2: 2012年; 维素酶对家蚕消化桑叶纤维素起重要生理作用,本试验研究了不同温度、pH对外源纤维素酶活力的影响及纤维素酶的热稳定性与pH稳定性,同时在模拟家蚕肠道环境条件下,研究了纤维素酶活力的稳定性。结果表明:所选的外源纤维素酶在家蚕肠液中的最适催化温度为30℃左右,最适pH为8.0左右;酶在家蚕体温范围内具有较好的稳定性,在pH8.0-10.0范围内酶活力较稳定;模拟家蚕肠道环境条件下酶活力稳定性实验表明,在80 min时间内,纤维素酶能够保持较高的活力而发挥生物活性。; 王在贵韩薇刘朝良许晓丹; 关键词：纤维素酶家蚕肠道酶活力稳定性

柞蚕14-3-3基因的鉴定及表达分析(英文): 2013年; 14-3-3蛋白是一种可以改变其结合蛋白构象的酸性蛋白质。柞蚕14-3-3 cDNA序列全长1 220 bp,包括一个126 bp的5'非编码区和一个350 bp的3'非编码区。该基因的开放读码框长度为744 bp,编码247个氨基酸。序列比对结果表明,柞蚕14-3-3蛋白与家蚕的14-3-3蛋白具有高度同源性。此外对柞蚕14-3-3基因进行了原核表达和重组蛋白纯化。SDS-PAGE和免疫印迹结果表明,分子量大小约32 kD的重组蛋白在大肠杆菌中得到了成功表达。; 张晓付维维王磊朱保建刘秋宁戴立上孙钰刘朝良; 关键词：柞蚕

柞蚕肠道菌群分析及产酶菌的筛选与鉴定被引量：18: 2011年; 【目的】研究柞蚕肠道菌群结构及产酶菌,探寻具有新的生理功能的微生物,用于研制微生态制剂,以提高柞蚕生产的叶丝转化率及抗病能力。【方法】采用培养法分离柞树叶饲喂的5龄柞蚕幼虫肠道细菌,通过生理生化特性结合16S rDNA系统发育分析,对其肠道细菌群落类型进行鉴定,采用筛选培养基筛选产纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶的菌株。【结果】获得的柞蚕肠道菌有芽孢杆菌、葡萄球菌、肠杆菌,其中以芽孢杆菌为主要菌群。芽孢杆菌是肠道菌中产纤维素酶、蛋白酶的主要菌群;葡萄球菌产蛋白酶能力较弱;肠杆菌不产酶。【结论】柞蚕肠道菌与家蚕肠道菌群结构相似,筛选出的产酶菌活性较高,可以制备微生态制剂用于蚕业生产。; 邹昌瑞魏国清刘朝良朱保建王在贵杨文静; 关键词：柞蚕肠道菌菌群结构

家蚕限性育种研究进展被引量：7: 2012年; 就家蚕限性品种种类、目前育成的主要限性品种以及国内外限性育种研究方法、研究现状、在家蚕生产中的应用与前景进行了概述。; 丁华静喻蕾魏国清赵小明刘朝良; 关键词：家蚕限性品种分子育种

家蚕肠道产蛋白酶细菌的分离筛选与分子鉴定被引量：2: 2011年; 目的肠道细菌对家蚕具有重要的生理作用,探明家蚕肠道产蛋白酶细菌菌群对家蚕肠道细菌的高效开发与利用具有十分重要的意义。方法从菁松×皓月品种4龄家蚕肠液中分离与纯化肠道细菌,获得一株产高活力蛋白酶细菌,对该菌菌落进行形态学鉴定及菌体的显微镜检并结合16S rDNA方法进行了鉴定。结果该菌为革兰阴性杆菌,属于嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophom onas maltophilia)。结论该产蛋白酶细菌产酶能力较高,可进一步开发研究并用作微生态制剂。; 陈睿王在贵杨文静刘朝良张宏福唐湘方张琛陈敏赵二双李阿敏; 关键词：家蚕肠道菌蛋白酶 RDNA

家蚕肠道产淀粉酶细菌的分离鉴定及其酶基因的克隆与表达被引量：7: 2011年; 从家蚕(Bombyx mori L.)5龄幼虫肠道分离鉴定产淀粉酶细菌菌株以用作微生态制剂的研究,并对该菌α-淀粉酶基因进行克隆、序列分析及在大肠杆菌中原核表达。通过含淀粉NA培养基筛选分离得到产淀粉酶菌,通过形态学观察及16S rDNA序列分析鉴定其种属,DNS法测定酶活,并设计了淀粉酶基因引物进行克隆,构建了DZ-a号菌淀粉酶基因的原核表达载体,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中并诱导表达。共分离得到2株产淀粉酶细菌菌株,将其PCR扩增得到的16S rDNA序列分别与GenBank上已有序列进行比对,均与芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus有99%的同源性,DZ-a号菌和DZ-h号菌的产酶能力分别为20.5U/mL和24.2U/mL。产淀粉酶基因片段测序结果表明两株菌的克隆基因片段长度分别为3414bp和3378bp,均包括完整的编码区序列,可编码586个氨基酸,SDS-PAGE分析得到大小约66kD的目的蛋白。鉴定该2株菌DZ-a、DZ-h号菌均属于芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌,克隆测序所得序列为完整的蜡样芽孢杆菌α-淀粉酶基因序列,并成功表达。为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定了试验基础。; 杨文静王在贵刘朝良魏国清朱保建邹昌瑞; 关键词：家蚕肠道细菌 Α-淀粉酶 RDNA 克隆及原核表达

家蚕限性育种研究进展: 本文就家蚕限性品种种类、目前育成的主要限性品种以及国内外限性育种研究方法、研究现状、在家蚕生产中的应用与前景进行了概述。; 魏国清赵小明刘朝良; 关键词：家蚕限性品种分子育种; 文献传递

饲料中转基因成分对家蚕生长发育的影响: 2011年; 采用家蚕(Bombyx mori)H_9品种作为实验动物,分别用转基因和非转基因大豆粉制作的人工饲料进行饲育。通过饲育试验,比较分析了不同处理后家蚕的龄期经过时间、全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重、疏毛率、死亡率、每龄眠起体重等经济性状指标。同时采用PCR方法对转基因饲料饲育后家蚕组织中外源基因的表达情况进行了检测。结果显示,含转基因大豆粉的人工饲料对家蚕的生长发育并无显著影响,且不存在外源基因的污染。; 孙丽丽刘朝良朱保建魏国清王在贵曹甲钱岑高红梅; 关键词：家蚕转基因人工饲料经济性状

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安徽省自然科学基金(11040606M98)