浙江省“钱江人才计划”(2009R10024)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：陈翔范海玲任素伟陈江帆娄普更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第二医院美国波士顿大学温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”温州市科技局对外合作项目温州市国际科技合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- A2AR基因敲除对小鼠脑缺血再灌注后SVZ区星形胶质细胞激活的影响被引量：1
- 2013年
- 通过研究腺苷A2A受体(A2A receptor,A2AR)基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)星形胶质细胞(astrocyte,Ast)数目及形态的影响,为腺苷类药物在脑卒中类疾病中的应用提供实验依据。采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlu-sion,MCAO)复制局灶性脑缺血再灌注模型,动物分为假手术组(S)和模型组(M),其中M组根据基因类型分为A2AR基因敲除模型组(MKO)和A2AR基因野生模型组(MWT),MKO组和MWT组根据再灌注时间都分为1 d组、3 d组和7 d组,S组分为A2AR基因敲除假手术组(SKO)和A2AR基因野生假手术组(SWT),共8组;对实验小鼠进行神经行为学评分,脑组织用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triph-enyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死灶,苏木素伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察脑组织大体形态,以及应用免疫荧光法观察SVZ区Ast的特异性标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)表达。结果显示,所有M组小鼠在脑缺血再灌注后均出现神经功能缺损症状,神经行为学评分显示MKO 3 d组低于MKO 1 d组(P<0.05);TTC显示M组小鼠脑组织均有白色梗死灶;免疫荧光结果显示S组小鼠SVZ区域仅有少量Ast表达,M组表达明显增多,MKO 7 d组Ast表达量低于MWT 7 d组(P<0.05);Ast表达与神经行为学评分呈显著负相关(r=–0.621,P<0.01)。结果证明,A2AR基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后,在急性期能够减轻肢体活动障碍,在恢复期能够调控Ast的激活,减少胶质瘢痕形成,是其促进后期神经再生的可能因素之一。
- 娄普黄婷婷冯小敏尹水贵黄托夫陈江帆陈翔
- 关键词：腺苷A2A受体脑缺血再灌注星形胶质细胞小鼠
- P-JNK在A_(2A)R敲除新生小鼠HIBD细胞凋亡中的表达研究被引量：6
- 2013年
- 目的:探讨腺苷A2A受体(A2AR)敲除的新生小鼠在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区磷酸化c-jun氨基末端激酶(P-JNK)激活的动态变化及其与神经细胞凋亡的关系。方法:参照经典Rice-Vannucci法建立7日龄新生小鼠HIBD模型。A2AR敲除(KO)小鼠及同窝野生型(WT)小鼠80只,设假手术(S)组,模型组(M)分1 d,3 d,7d,共8小组。采用三种发育反射(翻正反射、趋地反射和悬崖逃避反射)对小鼠进行短期神经功能评定,苏木精-伊红(HE)染色、尼氏染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法观察敲除A2AR对新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡的影响,免疫组化检测P-JNK阳性细胞的表达。结果:敲除A2AR加重HIBD模型小鼠神经功能缺损、脑组织病理学损伤,增加神经细胞凋亡;HIBD后缺血侧海马CA1区P-JNK阳性细胞的表达迅速增加,与S组比较均有显著差异(P<0.01),模型组于1 d达高峰,且在相应的时间点(1 d,3 d,7 d)KO组P-JNK阳性细胞的表达显著高于WT组(P<0.01,P<0.05,P>0.05);直线相关分析表明新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡与P-JNK阳性细胞的表达呈显著正相关(r=0.837,P<0.01)。结论:敲除A2AR增加新生小鼠HIBD神经细胞的凋亡及加重脑损害的过程,其作用机制可能与早期P-JNK的持续激活有关。
- 范海玲尹水贵娄普任素伟黄胜陈翔
- 关键词：腺苷A2A受体细胞凋亡缺氧缺血性脑损伤
- p-p38 MAPK在A_(2A)R敲除新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨p-p38 MAPK在腺苷A2A受体敲除(A2AR-/-)新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义。方法:采用改良Rice法建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。A2AR-/-(KO)及同期野生型(A2AR+/+,WT)C57/BL6新生小鼠(7日龄)分别按照完全随机分组方法分成假手术组及模型组,模型组按HIBD后取标本时间不同又分为造模后1 d组、3 d组和7 d组,共8个实验动物组,每组取小鼠8只,共64只。采用TUNEL结合尼氏染色检测神经细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测活化caspase-3及p-p38 MAPK表达。同时,KO及同期WT小鼠分别取假手术组(SKO和SWT,n=10)及模型组(MKO和MWT,n=30)于HIBD后1 d同时进行新生鼠短期神经行为学评定。结果:(1)缺氧缺血后皮层及海马CA1区神经细胞凋亡、活化caspase-3及p-p38 MAPK表达均增加,造模后1 d为高峰;(2)A2AR敲除导致神经细胞凋亡及活化caspase-3表达增加,与同一时点的WT小鼠相比均有显著差异(P<0.01);p-p38 MAPK表达增加,其中,1 d及3 d后2种基因型小鼠间均有显著差异(P<0.01);(3)Pea-son相关分析显示,活化caspase-3表达与p-p38 MAPK表达呈显著正相关(皮层:r=0.957,P<0.01;海马CA1区:r=0.939,P<0.01)。结论:p-p38 MAPK可能参与了A2AR敲除增加新生小鼠脑缺氧缺血后神经细胞凋亡、加重脑损害的过程。
- 任素伟崔志慧黄托夫范海玲陈江帆王小同陈翔
- 关键词：新生小鼠
- A2AR敲除对新生小鼠缺氧缺血脑区cyt C表达的影响被引量：1
- 2012年
- 腺苷(adenosine)A2A受体(A2A receptor,A2AR)作为腺苷四种受体亚型之一,对新生鼠脑缺氧缺血的作用尚存在争议,探讨其作用机制将有助于新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的临床治疗。为此,该实验观察了新生鼠脑缺氧缺血后A2AR敲除对其神经行为学的影响;采用TUNEL技术结合HE染色检测神经细胞凋亡;采用免疫组织化学法检测活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)及胞浆中细胞色素C(cytochrome C,cyt C)的表达。结果发现,A2AR敲除损伤了新生鼠神经行为功能,使神经细胞的凋亡和胞浆中cyt C的表达增加、caspase3活化增强。其中,在脑缺氧缺血后的1,3,7 d,神经细胞凋亡和caspase 3活化较野生型显著增加(P<0.01),而胞浆中cyt C的表达仅在脑缺氧缺血后的1,3 d显著增加(P<0.01),且其表达与神经细胞凋亡、caspase 3的活化均呈显著正相关。这提示,A2AR敲除后可能通过促使cyt C由线粒体释放出来增加新生鼠脑缺氧缺血后神经细胞的凋亡。
- 任素伟高勇周定富范海玲陈江帆王小同陈翔
- 关键词：脑缺氧缺血新生鼠细胞色素C
- Ngn3基因及其转录调控网络在胰腺内分泌发育与功能调控中的作用被引量：6
- 2013年
- Ngn3(neurogenin 3)基因及其直接靶基因NeuroD1(neurogenic differentiation 1)和Islet-1(insulin gene enhancer binding protein-1)是一类胰岛转录因子(islet transcription factors,ITFs)调控基因。Ngn3基因及其转录调控网络在小鼠和人胚胎胰腺内分泌细胞发育、胰岛素的产生和分泌及重编程干细胞或非β细胞生成胰岛素分泌β细胞中起着重要的调控作用。新近的研究发现,INSM1(insulinoma associated 1)和INSM2(insulinoma associated 2)基因家族成员也是Ngn3基因的直接靶基因,初步证明了INSM1/INSM2基因对胰腺内分泌发育可能起重要的调控作用,进一步补充和完善了Ngn3转录调控网络。因此,深入理解Ngn3基因及其转录调控网络,尤其是INSM1/INSM2基因对胰岛发育和成熟胰岛细胞命运的分子调控机制,将有助于研究胰腺内分泌疾病和内分泌发育疾病,特别是糖尿病的病因、治疗和预防。为此,就近年来Ngn3基因及其转录调控网络的研究进展作一综述。
- 高勇喻萍蔡涛陈翔
- 关键词：转录调控网络胰腺内分泌胰岛细胞胰岛素
- 腺苷及A_(2A)腺苷受体与缺氧缺血性脑病被引量：2
- 2011年
- 细胞外腺苷浓度的增加是对脑缺血缺氧而引起的一种内源性神经作用,腺苷以及A2AR可以作为脑缺血缺氧潜在的治疗靶点,现就近年来关于腺苷及A2AR在脑缺血缺氧中的作用机制做一综述。一。
- 范海玲陈翔
- 关键词：腺苷受体缺氧缺血性脑病脑缺血缺氧神经作用治疗靶点细胞外
