国家自然科学基金(31070531)
- 作品数：10 被引量：52H指数：5
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- 硝普钠(SNP)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导的白桦Ty1-copia类逆转座子的克隆及分析被引量：2
- 2013年
- 利用Tvl—copia类逆转座子逆转录酶（RT）的保守区域设计引物，优化了扩增条件后利用RT—PCR从白桦愈伤组织中得到了1条逆转录酶序列。利用硝普钠（SNP）和茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后分别扩增克隆了11条和9条逆转录酶序列。这2l条逆转录酶序列（命名Bprtl-21）变化范围为205—290bp，一致性为71．93％，异质性为1．1％。50．9％，翻译成氨基酸的异质性为0～57．1％。经SNP和MeJA处理的样品中，获得的逆转录酶序列基本是分别聚类．初步证明不同的Tvl-copia类逆转座子能够分别响应不同的信号而被转录激活。分析所获得的21逆转录酶序列和苹果中19务逆转录转座子序列（DQ410748-DQ410766）进化关系发现．逆转录酶基本各自聚类。但是Bprt9、Bprtll和OQ4m750进化关系比较接近，Bprt15、Bprt19、DQ410751和DQ410753聚为一类，证明逆转座子存在水平传递。
- 梁楠松曾凡锁李博郭梁詹亚光
- 关键词：白桦逆转录酶转录活性
- 水分、氮肥及MeJA处理对白桦三萜积累特性的影响被引量：11
- 2012年
- 以一年半生白桦幼树为试材,研究水分、氮肥和茉莉酸甲酯(MeJA)处理对白桦三萜物质积累的影响,并对白桦植株中三萜积累规律进行了探讨。结果表明:(1)白桦幼树植株中总三萜主要分布在茎皮和叶片,根皮中最低,平均含量分别为71.94、81.60和25.45mg.g-1;叶片中总三萜积累高峰出现在6、7月份,茎皮和根皮中总三萜积累高峰分别出现在8月份和7月份。(2)干旱胁迫早期(6月)中度和重度干旱胁迫显著促进了叶中总三萜积累,分别是对照的1.24和1.27倍。茎皮中,除7月水分胁迫处理显著高于对照外,其它各月份水分胁迫不利于茎皮中总三萜含量积累,干旱胁迫不利根皮中三萜积累。(3)施氮早期(6月)不利于三萜在叶片和根皮中积累,中后期(7～10月),氮肥处理对三萜积累有显著促进作用;而施氮早期(6～7月)促进茎皮中三萜积累作用。(4)MeJA喷施处理对叶片和根皮中三萜积累(7月～10月)均具有显著的促进作用,在积累高峰期分别是对照的1.42倍和1.52倍。(5)轻度干旱、氮肥均促进了白桦幼树株高的增长和生物量的积累,而MeJA处理对整株生物量的积累不利。
- 李春晓尹静詹亚光任春林王智慧
- 关键词：水分氮茉莉酸甲酯
- 温度胁迫对白桦悬浮细胞中三萜积累及防御酶活性的影响被引量：7
- 2013年
- 以白桦悬浮培养细胞为试材,悬浮培养第7d进行高温(50℃热处理1h)和低温(4℃冷胁迫3h)胁迫处理,此后不同时间(0h～7d)收获白桦细胞,研究细胞干重、三萜积累及防御酶活性的变化。研究结果表明,高温和低温胁迫后均表现在24h～3d收获细胞显著促进了白桦总三萜的合成,且以高温处理效果最佳,48h收获细胞时分别比对照(25℃)和冷胁迫处理提高36.4%和12.87%;而在冷胁迫处理后4d～7d表现显著刺激了总三萜的合成,其中在第7d总三萜的含量比对照增加了22.1%,且两温度胁迫处理后15h～4d显著促进了齐墩果酸三萜的积累,24h收获时,热处理和冷胁迫均比对照提高38.1%和39.65%。两温度胁迫后不同程度促进了超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸裂解酶(PAL)、过氧化物酶(POD)活性提高及丙二醛的积累,但各酶活性出现高峰及变化规律存在差异,明确各酶相互协调、补充是保证细胞适应温度胁迫,减轻自由基伤害,并促进次生产物合成的原因。
- 赵微尹静詹亚光任春林王艳马泓思苏欣
- 关键词：温度胁迫防御酶
- 高温胁迫诱导对白桦悬浮细胞三萜积累及防御酶活性的影响被引量：2
- 2015年
- 通过研究不同高温胁迫下白桦细胞的细胞活力,防御酶活性和总三萜含量的变化,确定诱导白桦细胞合成三萜的最适高温胁迫条件。35℃、40℃、45℃、50℃和55℃胁迫白桦细胞1、2和4 h,测定其细胞活力,防御酶(SOD、CAT和PAL)活性和总三萜含量。结果显示,45-55℃高温胁迫下,细胞活力显著下降,以50℃2 h处理下降最显著,是对照细胞活力的6.8%;SOD和PAL活性显著增加,以55℃4 h处理后24 h时SOD和PAL活性最高,分别较对照提高164.9%和159.6%;CAT活性受到抑制,以55℃2 h和4 h处理在12 h后取样最低。50℃处理2 h后24 h取样,细胞总三萜含量最高,浓度为76.66 mg/g,比对照提高105.6%。最终确定50℃胁迫2 h后24 h取样为利用高温胁迫诱导白桦悬浮细胞合成三萜类物质的最适温度胁迫条件。
- 常志凯白祎杰董恒尹静詹亚光
- 关键词：白桦防御酶三萜温度胁迫
- 多胺介导真菌诱导子促进白桦三萜积累的初步研究被引量：3
- 2014年
- 目的明确内源多胺是否介导真菌诱导子诱导白桦三萜的合成。方法将40μg/mL真菌诱导子、1 mmol/L腐胺(Put)和2 mmol/L多胺合成抑制剂D-精氨酸(D-Arg)添加到培养8 d的白桦悬浮培养体系中,利用HPLC法和比色法分析多胺量和三萜量。采用药理学和恢复实验分析多胺在真菌诱导子诱导白桦三萜合成中的作用。结果真菌诱导子或Put处理后,白桦悬浮细胞中的多胺量、三萜量和产量均呈增加趋势,其中处理24 h时,三萜量达最大值,分别增加了68.54%和30.34%。真菌诱导子和Put共同处理虽提高了三萜量,但其产量却低于真菌诱导子单独处理。真菌诱导子和D-Arg共同处理后三萜量低于真菌诱导子单独处理,处理24 h时降低程度最高,为40.57%。恢复实验发现,随着恢复时间的延长,真菌诱导子、Put以及真菌诱导子与D-Arg对白桦三萜合成的影响逐渐减弱,恢复到对照水平。结论多胺介导了真菌诱导子促进白桦悬浮细胞中三萜的合成。
- 刘英甜王晓东周文洋詹亚光范桂枝
- 关键词：白桦多胺真菌诱导子三萜腐胺
- 茉莉酸甲酯结合高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响被引量：9
- 2016年
- 目的研究茉莉酸甲酯(Me JA)和高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响。方法利用不同浓度(25、50、100、150μmol/L)Me JA和高温(50℃处理2 h)处理白桦细胞,进行生长量、细胞活力、抗逆酶活性、丙二醛和总三萜量及其合成关键酶基因相对表达量分析。结果高温和Me JA的复合处理对白桦细胞三萜合成的诱导作用比单独的Me JA和高温处理更强。高温胁迫1 d后加入150μmol/L的Me JA处理,细胞总三萜量最高,为76.6 mg/g,分别比空白对照、单独的Me JA和高温处理增加81.3%、159.9%和13.1%;三萜合成关键酶鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、羽扇醇合酶(BPW)和β-香树酯醇合酶(BPY)基因的相对表达量也分别比空白对照增加297.1%、83.7%、1 032.6%和282.4%。高温胁迫1 d后加入Me JA处理,超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性高于空白对照;生长量和细胞活力被抑制。结论在高温胁迫后加入Me JA的复合处理可能通过影响白桦细胞生长量、细胞活力、丙二醛量和防御酶活性变化,调节三萜合成关键酶基因的表达,最终促进三萜物质的高效合成与积累。
- 常志凯朱珠董恒尹静詹亚光
- 关键词：白桦茉莉酸甲酯高温胁迫三萜鲨烯合酶
- H_2O_2介导真菌诱导子促进白桦酯醇积累被引量：5
- 2013年
- 以产白桦酯醇的白桦悬浮细胞系为试材,利用药理学试验,结合高效液相色谱和荧光显微镜技术,探讨过氧化氢(H2O2)在拟茎点霉属真菌诱导子促进白桦酯醇积累中的作用。结果表明:外源H2O2降低了细胞的活力和干质量的积累量,却提高了白桦酯醇的含量。其中,1mmol·L-1H2O2处理12h,白桦酯醇的含量比对照增加89.45%,0.1mmol·L-1H2O2处理24h,白桦酯醇的含量比对照增加73.72%。真菌诱导子促进了白桦悬浮细胞中H2O2和白桦酯醇的生成,在处理24h时,分别比对照增加391.67%和185.22%。H2O2的清除剂过氧化氢酶减弱真菌诱导子对H2O2和白桦酯醇的诱导效应。由上述结果初步推断,H2O2参与了真菌诱导子诱导白桦酯醇积累的过程。
- 孙美玲李晓灿王晓东詹亚光范桂枝
- 关键词：白桦白桦酯醇真菌诱导子过氧化氢
- 真菌诱导子促进白桦悬浮细胞三萜的积累被引量：12
- 2011年
- 将促进白桦三萜积累的拟茎点霉属的内生真菌诱导子添加到白桦悬浮培养体系中,研究40,100,400μg·mL-1的真菌诱导子对生长初期、指数生长期和生长末期的悬浮细胞干质量和三萜积累的影响。结果表明:真菌诱导子的不同诱导方案均促进白桦悬浮细胞中三萜的积累,而细胞干质量积累却被抑制;其中最佳诱导条件为在指数生长期的白桦细胞中添加40μg·mL-1的真菌诱导子诱导1天,诱导后细胞中的三萜含量达29.47mg·g-1,比对照增长78%。在优化诱导条件下,考察培养液pH和电导率、细胞苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)活性,发现真菌诱导后6～10h内,引发培养液的碱化和电导率的升高,特别是白桦细胞中PAL和POD酶活性均显著高于对照,分别是对照的5.70倍和5.74倍。研究结果初步说明真菌引发白桦悬浮细胞的防御反应,苯丙烷类代谢途径和氧迸发可能参与真菌诱导三萜的合成。
- 翟俏丽范桂枝詹亚光
- 关键词：白桦真菌诱导子三萜悬浮细胞培养
- 水杨酸对白桦悬浮细胞中齐墩果酸积累及防御酶活性的影响被引量：14
- 2012年
- 目的研究水杨酸(SA)对白桦悬浮细胞生长、齐墩果酸积累及防御酶活性的影响。方法在白桦悬浮培养第7、10、13、15天,分别添加不同质量浓度(10、25、50、100、250 mg/L)的SA,进行细胞生长、齐墩果酸量及抗逆酶活性分析。结果添加低质量浓度SA(10～25 mg/L)对细胞活力和生长量影响不大,高质量浓度的SA(100～250 mg/L)处理可显著抑制细胞活力和生长,但可促进齐墩果酸的积累,在第7天添加250 mg/L SA后齐墩果酸量最高,达1.71 mg/g(干质量),是对照的3.1倍;而第7天添加50 mg/L SA后齐墩果酸的产量为0.473 mg,比对照提高了42.04%。悬浮培养第7天添加50 mg/L SA,过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)两种酶活性分别在0～24 h和0～48 h比对照显著提高,而PAL活性在SA处理12 h后始终高于对照。结论适宜浓度的SA可刺激白桦细胞防御酶活性提高,并促进白桦悬浮细胞中齐墩果酸的积累。
- 任春林尹静潘亚婕詹亚光李春晓赵微
- 关键词：白桦水杨酸齐墩果酸防御酶活性
- SNP与K^+、Ca^(2+)互作促进白桦悬浮细胞中白桦酯醇累积的初步研究被引量：2
- 2016年
- [目的]探究一氧化氮供体硝普钠(SNP)对白桦悬浮细胞中K^+、Ca^(2+)和白桦酯醇累积的影响及外源K^+、Ca^(2+)与SNP互作对白桦酯醇累积的影响。[方法]利用高效液相色谱法、原子吸收光谱法及比色法分别测定白桦酯醇、K^+及Ca^(2+)含量。[结果]SNP处理对白桦悬浮细胞中K^+、Ca^(2+)的累积存在浓度和时间效应,其中1 mmol·L-1SNP处理12 h时K^+含量最高,是对照组的1.47倍,而Ca^(2+)含量在5 mmol·L-1SNP处理96 h时最高,是对照组的1.50倍。1 mmol·L-1SNP与不同浓度KCl共同处理后,白桦酯醇含量高于单独SNP与KCl处理,其中,SNP与0.1 g·L-1KCl共同处理时,白桦酯醇的积累量最大,是单独SNP处理1.72倍,是单独KCl处理2.33倍。1 mmol·L-1SNP与不同浓度Ca Cl2互作处理后,白桦酯醇含量高于单独SNP与Ca Cl2处理,其中,SNP与0.1 g·L-1Ca Cl2共同处理时,白桦酯醇的积累量最大,是单独SNP处理2.75倍,是单独Ca Cl2处理2.18倍。[结论]SNP处理诱导了白桦悬浮细胞中K^+和Ca^(2+)的合成和白桦酯醇的累积,SNP分别与K^+或Ca^(2+)互作可以更好的促进白桦悬浮细胞中白桦酯醇的累积,同时推测SNP诱导的K^+、Ca^(2+)在一定程度上介导了白桦酯醇的累积。
- 黄雅婷詹亚光马明媚范桂枝
- 关键词：白桦酯醇硝普钠
