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拟南芥类锌指基因AT3G02790/AT5G16470纯合双突变的筛选及其表型分析被引量：2: 2012年; 以拟南芥T-DNA插入突变体AT3G02790和AT5G16470为亲本,通过人工杂交技术获得杂合体后,结合基因分离定律和PCR技术筛选出拟南芥纯合双突变株,并对拟南芥纯合突变体的表型进行了初步分析,结果显示:突变体与野生型植株表型无明显差异,推测该基因为功能未知的新基因。; 郑唐春施晓文臧丽娜朱银凤王亚军曲冠证; 关键词：拟南芥表型胁迫

杨树类锌指基因ZFL的功能分析: 2013年; 以毛果杨叶片cDNA为模板,采用PCR技术分离出杨树ZFL基因,序列分析结果表明该基因序列开放读码框315 bp,共编码104个氨基酸,推导的蛋白质分子量为11.202 kDa,理论等电点9.83,命名为PtrZFL。对ZFL基因进行实时荧光定量PCR表达分析,结果表明:甘露醇、NaCl、H2O2、ABA、低温胁迫都能诱导PtrZFL基因的表达,且PtrZFL表达量在ABA处理3 h时达到最高,然后随处理时间延长而逐渐降低;低温(4℃)胁迫在6 h后能显著诱导PtrZFL基因表达,并随着低温处理能一直保持较高水平的表达。根据毛果杨基因组信息设计引物,获得了PtrZFL基因上游1 000 bp的启动子序列,序列分析结果表明该启动子包含有多个与胁迫相关的元件,如抗冻、缺水、抗寒、脱落酸响应元件ABRE、MYB和WRKY。GUS活性检测发现,该启动子在转基因拟南芥整株中都有表达,但在根部和成熟叶片中表达较强,其他位置表达微弱。; 赵学彩郑唐春臧丽娜曲冠证; 关键词：杨树 QRT-PCR 启动子胁迫

白桦BpMADS3基因的功能分析被引量：3: 2014年; 利用RT-PCR技术,揭示了BpMADS3基因在白桦不同组织中的差异表达模式:BpMADS3基因仅在花器官中强烈表达,在茎、叶组织中不表达。采用染色体步移法克隆BpMADS3基因上游启动子,获得1 426 bp长度启动子序列,构建BpMADS3基因启动子驱动GUS基因植物表达载体,在拟南芥转基因植株中GUS染色表明,GUS活性集中在萼片和心皮中。在拟南芥ap1突变体中过量表达BpMADS3基因,能恢复拟南芥ap1突变体花器官的正常发育。BpMADS3基因转化烟草发现,转基因植株出现早花表型,且转基因烟草植株中相关开花基因表达水平均上调。; 郑唐春臧丽娜丁浩曲冠证; 关键词：白桦突变体早花启动子

烟草类锌指基因NtZFL基因的功能分析被引量：2: 2012年; 从烟草cDNA中分离出一个类锌指基因NtZFL,开放读码框321 bp,编码106个氨基。QRT-PCR分析表明MV、H2O2、ABA、冷胁迫处理都提高了NtZFL在烟草的表达,Northern blot分析表明该基因在烟草的不同组织中具有组织特异性,在幼叶和花中表达量较高。亚细胞定位表明NtZFL蛋白是定位在细胞壁中的蛋白。NtZFL基因启动子驱动GUS基因转烟草植株显示在幼苗中整株有表达,但在根部和叶脉处表达量较高。; 曲冠证郑唐春马麟邵龙婷曹凤娟李开隆; 关键词：胁迫处理亚细胞定位启动子

植物激素对不同烟草遗传瘤诱导的研究: 2012年; 通过观察烟草品种N.glauca、N.langsdorffii和杂种N.glauca×N.langsdorffii的形态差异,利用IAA、6-BA、ABA等不同激素处理杂种N.glauca×N.langsdorffii探究激素对于遗传瘤产生的影响。实验结果显示生长素能显著抑制实生幼苗的遗传瘤产生,而分裂素则明显促进遗传瘤的产生。本实验还首次从烟草N.glauca中诱导产生遗传瘤,这说明种间杂交并不是诱导产生遗传瘤的唯一因素。电镜扫描结果显示遗传瘤中的细胞分化很不规则,可能是由于细胞分化及细胞间协作失控引起的。; 曲冠证郑唐春马麟赵学彩李爽李开隆; 关键词：烟草植物激素

烟草组织的环境扫描电镜观察被引量：3: 2012年; 以烟草的不同组织为材料,采用改进的环境扫描电镜(ESEM)技术,对烟草的叶表皮、腺毛、花表皮和种子表皮微形态进行了显微观察及拍照。结果表明,改良的环境扫描电镜技术分辨率更高,能更真实地呈现组织的结构特点。同时发现烟草不同组织间细胞形态存在较大差异,一些基因的表达差异也能影响细胞的特征,这为转基因植株的微观性状描述提供了新的研究途径。; 朱银凤郑唐春赵学彩曲冠证; 关键词：显微结构

柽柳类锌指基因ThZFL的功能分析被引量：2: 2012年; 为了研究柽柳ThZFL基因的功能,将ThZFL基因过表达转入烟草后,对转基因烟草进行盐胁迫、干旱胁迫,并利用酵母双杂交及染色体步移技术,获得柽柳ThZFL基因的互作蛋白与启动子。结果表明:柽柳ThZ-FL基因能显著提高转基因烟草盐胁迫下种子的发芽率、离体叶片的分化和植株的生长能力;通过酵母双杂交筛选出两个与ThZFL蛋白互作的蛋白;ThZFL基因启动子驱动GUS活性显示,在幼苗的整体、叶脉和毛状体中表达显著,但在幼叶和茎尖处表达微弱。; 曲冠证郑唐春杜兆伟赵思雯夏德安; 关键词：柽柳盐胁迫酵母双杂交启动子

柽柳类锌指基因ThZFL酵母诱饵表达载体的构建及其表达验证被引量：5: 2011年; 利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,经检验后提取质粒,用BamH I和EcoR I限制性内切酶双酶切pMD18-T-ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4 DNA连接酶连接过夜后转化大肠杆菌DH5α感受态获得目的基因转化子pGBKT7-ThZFL,对转化子进行质粒PCR检验、质粒酶切检验、DNA测序鉴定。将测序检验正确的pG-BKT7-ThZFL转化子,转化酵母Y2Hgold菌株,对转化后的酵母涂布SD/-Trp、SD/-Trp/X、DDO、TDO平板,验证目的基因的自激活作用,通过对酵母生长曲线的测量验证诱饵蛋白的毒性作用。试验结果表明:用于筛选与ThZ-FL表达蛋白相互作用的靶蛋白的酵母诱饵载体构建成功。; 郑唐春王英臧丽娜王亚军曲冠证夏德安; 关键词：柽柳自激活作用

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国家自然科学基金(31070595)