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mTOR特异性siRNA重组表达载体的构建及鉴定: 2013年; 目的构建mTOR siRNA重组表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制巨噬细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法设计具有短发夹结构的DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,并进行序列测定。再转染入巨噬细胞RAW264.7,进行荧光摄像和阳性克隆筛选。Western blot方法检测巨噬细胞mTOR蛋白表达。结果 DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR siRNA重组表达载体。Western blot结果显示转染该重组载体的巨噬细胞mTOR蛋白表达下降约41%。结论mTOR靶向RNA干扰重组表达载体构建成功,可以进行稳定筛选,该载体对巨噬细胞mTOR蛋白表达有抑制作用。; 张才成陈静陈唐勇章登珊郑晓丰李俊明; 关键词：MTOR RNA干扰重组表达载体

小干扰RNA靶向系统的研究进展被引量：1: 2013年; 小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）是RNA干扰（RNA interference,RNAi）发挥效应的关键分子,可高效、特异地抑制靶基因的表达,实现转录后的基因沉默.RNAi现象的发现及其研究的不断发展,为探查基因功能和开展基因治疗带来了新的契机.目前,siRNA已被广泛应用于各种人类疾病的基因治疗研究,成为一种具有潜在临床应用价值的有力工具.但作为一种新兴技术,siRNA仍然面临许多问题,如稳定性不理想,在体内的分布和作用缺乏靶向性以及可能存在的脱靶效应等[1].如何实现siRNA在活体内的靶向作用是其在走向临床应用过程中遇到的主要瓶颈之一.本文就近年来有关siRNA靶向表达和靶向递送系统的研究中特异性启动子的应用、siRNA表达调控系统、化学修饰及靶向载体等方面的研究进展作一综述.; 李玮婷张才成李俊明; 关键词：小干扰RNA 靶向表达递送系统 SIRNA表达特异性启动子 RNA干扰

结核分枝杆菌感染与自身免疫病相互关系的研究进展被引量：2: 2014年; 结核病（ TB ）是一种严重危害人类健康的感染性疾病。目前，全球约有三分之一人口感染结核分枝杆菌（ MTB），每年还有约900万的新发病例，约200万人死于TB［1］。由于MTB本身并不产生内、外毒素，也不产生侵袭性酶类，TB的病理作用主要是由机体自身的免疫应答介导的，因此其致病机制与自身免疫病（ AID）存在一定的相似性。值得关注的是，近年越来越多的临床研究发现，AID患者中TB的发生率较正常人群明显升高，同样，TB患者并发AID的概率也显著上调，而且AID的发生也会促进TB的发生和发展。这些研究提示MTB感染与AID之间可能存在某些紧密的相互作用。而对这种相互关系发生的先后顺序仍存在着较大争议，其作用机制也尚未阐明，国内外对于此类研究仍缺乏系统的综述。为较为全面地理解TB与AID间的相互关系，本文就近年来有关这两者在相互作用关系、机制以及两者的相互作用对临床诊疗的影响等方面的研究进展作一综述。; 陈洁张才成李俊明; 关键词：结核分枝杆菌感染自身免疫病 MTB感染 TB患者 AID 感染性疾病

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国家自然科学基金(30901284)