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广东省医学科学技术研究基金(A2012325)

作品数:1 被引量:4H指数:1
相关作者:王跃春陈志明苏仲春陈家劲王圳更多>>
相关机构:暨南大学更多>>
发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家级大学生创新创业训练计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛样细胞
  • 1篇胰岛样细胞团
  • 1篇人脐
  • 1篇人脐带
  • 1篇脐带
  • 1篇转化酶
  • 1篇细胞
  • 1篇间充质
  • 1篇间充质干细胞
  • 1篇干细胞
  • 1篇充质干细胞
  • 1篇MSCS

机构

  • 1篇暨南大学

作者

  • 1篇王圳
  • 1篇陈家劲
  • 1篇苏仲春
  • 1篇陈志明
  • 1篇王跃春

传媒

  • 1篇中国病理生理...

年份

  • 1篇2013
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
诱导人脐带MSCs分化为胰岛样细胞团的促成熟方案及机制被引量:4
2013年
目的:通过各种生物化学制剂的不同组合在体外诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向胰岛样细胞团(ILCs)分化,筛选出能表达激素原转化酶(PC)1和PC2的促成熟方案。方法:用胶原酶Ⅱ消化、过滤离心和不完全消化传代的方法从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞术、RT-PCR和免疫细胞荧光技术检测其干细胞标志物。选用A、B、C 3种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化:方案A为含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10μg/L表皮生长因子(EGF)、10 mg/L银杏提取液(GBE)及2%胎牛血清(FCS)的高糖培养基IM-DM;在方案A基础上加入10μg/L尼克酰胺为方案B;在方案B基础上加入10μg/L肝细胞生长因子(HGF)为方案C。在hUC-MSCs诱导前后,通过倒置显微镜观察其形态变化,采用RT-PCR、qPCR和Western blotting检测胰岛相关mRNA和蛋白,特别是PC1和PC2的表达情况。结果:(1)细胞形态、表面相关抗原、干细胞特异基因的表达等情况表明hUC-MSCs可以从人脐带中被成功地分离和纯化;hUC-MSCs普遍表达nestin,轻微表达Isl1。(2)RT-PCR检测发现方案A诱导的ILCs有Glut-2和MafA mRNA表达,方案B诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1和PC2mRNA表达,方案C诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1、PC2、Ngn3、Pdx1、PC1和胰岛素mRNA表达,提示A、B和C3种方案诱导的细胞有逐渐成熟的趋势。qPCR检测也证实了PC1 mRNA仅在方案C中有表达,PC2 mRNA在方案B和方案C中均有表达,但方案C中PC2 mRNA的表达量显著高于方案B(P<0.01);Western blotting结果也表明PC1蛋白只在方案C中有表达;PC2酶原(ProPC2)与PC2在方案B和方案C中都有表达,且它们在方案C中的表达量均显著高于方案B(P<0.01)。结论:(1)hUC-MSCs具有向胰岛祖细胞或胰岛细胞分化的潜能;(2)方案C中尼克酰胺和HGF可促进hUC-MSCs向ILCs分化,使ILCs表达PC1并上调PC2;相对于方案A和B,方案C是一种促成熟方案。
苏仲春陈家劲王圳陈志明王跃春
关键词:脐带间充质干细胞胰岛样细胞团
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