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悬浮芯片定量检测鼠疫菌的方法研究被引量：2: 2009年; 目的利用编码微球悬浮芯片技术,探讨直接从"白色粉末"样品中检测鼠疫菌的可行性,为建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种生物恐怖因子的技术平台奠定基础。方法用抗体包被编码微球作为反应载体,双抗体夹心法为反应模式,建立鼠疫菌F1抗原悬浮芯片检测方法,对"白色粉末"中的鼠疫耶尔森菌进行检测。通过盲样和标准实验室检测评估对现场样品的适用性。结果建立的定量检测鼠疫菌F1抗原的悬浮芯片方法具有较高的特异性和敏感性,并在0.154～4514ng/ml浓度范围内具有良好的动力学响应特性,比ELISA方法有较高的灵敏度和较宽动态检测范围。结论定量检测鼠疫菌的悬浮芯片方法能快速、敏感、特异地定量检测"白色粉末"中鼠疫菌,在早期识别、快速诊断和应对生物恐怖威胁、传染病暴发中具有广阔的应用前景。; 王静单麟军杨永利孙肖红杨宇胡孔新侯友松丁艳丽; 关键词：悬浮芯片鼠疫菌流行病学

五种生物恐怖细菌基因悬浮芯片多重检测方法的建立被引量：9: 2009年; 目的建立5种生物恐怖细菌的快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法,即炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西斯菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的多重检测。方法针对炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西菌、类鼻疽伯克霍尔德菌的特异性基因序列设计6对引物和相应的特异性探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,标记的PCR产物与包被在不同编码微球上的相应探针杂交,用悬浮芯片扫描仪检测。结果多重PCR悬浮芯片检测体系能够正确的检测和鉴定5种生物恐怖细菌,特异性好,灵敏度高,可用于恐怖样本的高通量筛查。结论建立了多重PCR基因悬浮芯片快速检测几种生物恐怖细菌的方法。; 文海燕王静刘衡川杨宇胡孔新孙肖红; 关键词：悬浮芯片多重PCR

悬浮芯片法与生物素-亲和素ELISA法检测炭疽杆菌芽孢比较研究被引量：1: 2009年; 〔目的〕建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种病原体的技术方法。〔方法〕建立基于双抗体夹心免疫学检测的编码微球悬浮芯片和生物素-亲和素ELISA方法,比较2种方法对炭疽芽孢杆菌定量检测以及直接从＂白色粉末＂样品中检测的能力。〔结果〕悬浮芯片对炭疽杆菌芽孢检测具有很好的敏感性和特异性,最低检出限为4.2×103cfu/ml,动态范围为103-107cfu/ml;生物素-亲和素ELISA最低可以检测到1.4×104 cfu/ml,线性范围为104-107cfu/ml。〔结论〕悬浮芯片方法检测炭疽杆菌芽孢比ELISA方法具有更高的灵敏度和更宽的动态检测范围,在病原菌的早期识别、快速诊断、应对生物恐怖威胁、控制传染病爆发中具有广阔的应用前景。; 王静杨韵乔舜周蕾张晓龙朱紫雯孙肖红杨宇胡孔新丁艳丽; 关键词：悬浮芯片芽孢杆菌炭疽

快速检测日本脑炎病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立被引量：5: 2009年; [目的]建立一种能快速区分、简便诊断日本脑炎病毒的胶体金标记免疫层析试纸条方法，并对其进行评价。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，并标记日本脑炎病毒的NS1的抗体，制成免疫层析检测试纸条。对试纸条进行特异性和敏感性评价，并对三带喙库蚊进行模拟添加日本脑炎病毒检测。[结果]用三带喙库蚊研磨悬液上清、正常的昆虫细胞液进行测试，呈阴性反应；检测日本脑炎病毒的灵敏度均为1×10^5pfu／ml，对三带喙库蚊添加日本脑炎病毒进行检测也取得同样结果，并在10～15min即可得到结果。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测日本脑炎病毒的胶体金免疫层析方法，为进一步大规模应用奠定了基础。; 杨鹏飞米超平芮巾张丽萍王静张乐胡孔新; 关键词：日本脑炎病毒胶体金试纸条免疫层析法

建立金黄色葡萄球菌肠毒素B悬浮芯片定量检测方法被引量：3: 2009年; 目的建立金黄色葡萄球菌肠毒素B悬浮芯片定量检测方法。方法利用双抗体夹心法免疫学原理,以金黄色葡萄球菌肠毒素B的特异性抗体包覆微球为载体,利用悬浮芯片(Bio-Plex)系统建立检测模型;检测不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B,测定方法的灵敏性;通过该方法对大肠杆菌、普通变型杆菌、蓖麻毒素和禽流感病毒HA、NH蛋白和金黄色葡萄球菌热休克毒素的检测,判断方法的特异性;将不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B添加到奶粉中验证方法的实用性和稳定性。结果悬浮芯片方法对金黄色葡萄球菌肠毒素B的检测线性范围为0.2～1653.4ng/ml,最低检测值为203pg/ml,均优于酶联免疫吸附实验;除与2.3μg/ml金黄色葡萄球菌热休克毒素有交叉反应外,和其他几种细菌、毒素、蛋白均无交叉反应;对添加相同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B奶粉的检测的相对标准偏差在1.30%～16.93%。结论悬浮芯片定量检测方法对于模拟添加的金黄色葡萄球菌肠毒素B具有良好的检测效果。; 孙肖红王静姜永强张晓龙杨宇胡孔新单麟军杨永莉; 关键词：肠毒素类葡萄球菌悬浮芯片芯片分析技术超抗原

胶体金免疫层析技术快速定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素B被引量：12: 2010年; 目的建立胶体金免疫层析技术快速定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素B的方法。方法利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素B的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测;在牛奶样品中添加金黄色葡萄球菌肠毒素B作为模拟污染样品进行检测。结果该法可在5～10min内完成定性和半定量检测,检出限为8ng/ml,线性范围8～1000ng/ml。结论建立的检测金黄色葡萄球菌肠毒素B的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的金黄色葡萄球菌肠毒素B,并可实现定量,适用于现场快速检测。; 谢士嘉王静姜永强张然杨宇孙肖红胡孔新周文君; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 胶体金免疫层析双抗体夹心

液态芯片技术及其应用被引量：3: 2008年; 液态芯片（liquid array）或液相芯片（liquid chip）也称悬浮芯片（suspension array），是20世纪70年代美国Luminex公司研制出的新一代生物芯片技术，利用带编码的微球体作为载体，流式细胞技术作为检测平台，对核酸、蛋白质等生物分子进行大规模测定。最早的报道是1977年Horan等将该技术用于免疫学检测。至今，该技术已广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、抗体筛选及受体与配体的识别分析等领域。笔者就液态芯片的原理、特点以及在疾病诊断、病原体检测领域的应用进行综述。; 王静侯友松; 关键词：生物芯片技术流式细胞技术免疫学检测病原体检测液相芯片

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国家科技支撑计划(2006BAK10B07)