中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2011JBFC05)
- 作品数：7 被引量：43H指数：5
- 相关作者：殷国俊贾睿曹丽萍杜金梁丁炜东更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心南京农业大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广东省渔业生态环境重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 丹参提取物对CCl_4诱导建鲤肝损伤血清和肝脏生化指标的影响被引量：5
- 2012年
- 为了研究丹参提取物对建鲤肝损伤生化指标的影响,选取体质健康、无伤的建鲤120条,随机分成6组,每组20条。5个处理组,1个对照组。每日饲喂2次,连续饲喂8周。I组(CCl4)、II组(0.5%丹参提取物)、III组(1%丹参提取物),按0.05 mL/10g体重体内注射30%CCl4;IV组(0.5%丹参提取物)、V组(1%丹参提取物)体内不注射CCl4,只注射同体积植物油;VI为空白对照组,也注射同体积植物油。注射72h后采集建鲤的血清及肝组织进行化验。结果表明:与I组(CCl4)相比,III组(1%丹参提取物)血清中丙氨酸转氨酶(GPT)、天冬氨酸转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性显著降低(P<0.05);总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的活性有所增加(P>0.05);超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量显著提高,丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)含量显著提高(P<0.05)。而IV,V组的上述指标则无明显变化,这说明1%丹参提取物对于抗CCl4诱导的肝损伤有较好的效果。
- 杜金梁曹丽萍贾睿殷国俊
- 关键词：丹参提取物四氯化碳建鲤肝损伤生化指标
- 鲫鱼肝细胞分离与原代培养方法的优化被引量：5
- 2011年
- 通过不同的分离方法和培养条件探索鲫鱼肝细胞的原代培养,以建立稳定的鲫鱼肝细胞原代培养模型。用台盼蓝染色检测细胞存活率;用WST-1检测细胞活力,同时观察长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果显示:组织块培养4～5 d后肝细胞从组织块中迁出并增殖,但这种方法所需时间长且细胞不易收集;机械分散法收集的细胞少,细胞存活率低;而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离和培养效果。用0.1%胰蛋白酶消化30 min,每克肝重可收集1.47×108个细胞,平均存活率为91.43%。培养基和血清浓度均会影响肝细胞的贴壁和生长。在含有10%(V/V)胎牛血清(FCS)M199培养基中,4%CO2、28℃,肝细胞培养8～9 d后传代。
- 贾睿曹丽萍丁炜东杜金梁徐跑殷国俊
- 关键词：鲫鱼肝细胞胰蛋白酶原代培养
- 建鲤急性肝损伤模型的建立及当归提取物的保肝和抗氧化作用研究被引量：17
- 2012年
- 通过四氯化碳(CCl4)诱导建鲤Cyprinus carpio var.Jian肝损伤并建立急性肝损伤模型,以研究当归提取物(Extract from Angelica sinennsis,EAS)对肝脏组织的保护和抗氧化作用。采用CCl4腹腔注射法造模,分别测定不同时间和剂量下建鲤血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性及丙二醛(MDA)的含量,确定出建模的合适注射浓度和作用时间;用添加0.5%和1.0%(质量分数,下同)的EAS饲料,预防性喂养建鲤60 d后,通过测定鲤血清和肝脏组织中相关生化指标来观察EAS的保肝和抗氧化作用。结果表明:用体积分数为15.00%的CCl4-橄榄油一次性腹腔注射(剂量为0.1 mL/10 g体质量)建鲤72 h后,能诱导鲤血清中GPT、GOT和LDH活性显著性升高(P<0.05),MDA大量生成;投喂含0.5%和1.0%的EAS饲料均能显著抑制CCl4致建鲤血清中GOT、GPT和LDH活性的升高(P<0.05),提高血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量及肝组织总抗氧化能力(T-AOC),抑制肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)水平下降;同时,0.5%的EAS还能显著恢复血清中SOD水平和肝组织中谷胱甘肽(GSH)水平,抑制MDA生成。本研究结果表明,EAS对CCl4诱导的建鲤肝组织损伤具有保护作用,该作用与EAS的清除自由基和抗氧化能力有关。
- 曹丽萍贾睿丁炜东杜金梁殷国俊
- 关键词：四氯化碳建鲤当归抗氧化
- 鱼类肝细胞分离、原代培养与应用研究综述被引量：8
- 2012年
- 鱼类肝细胞分离与原代培养技术已有30多年的历史,目前已有40多种鱼的肝细胞被分离、培养并用于各种研究中。主要讨论鱼类肝细胞的分离与培养方法以及不同条件对细胞生理的影响;概括鱼类肝细胞体外培养在生理学、环境毒理学和药理学等方面的应用研究,旨在为建立更多的鱼类肝细胞原代培养模型并应用于相关的研究领域提供参考依据。
- 贾睿曹丽萍丁炜东杜金梁徐跑殷国俊
- 关键词：鱼类肝细胞原代培养细胞分离
- 五味子提取物对用t-BHP损伤的异育银鲫原代肝细胞的影响被引量：7
- 2011年
- 以叔丁基氢过氧化物(t-BHP)诱导异育银鲫Carassius auratus gibel原代培养肝细胞损伤模型,采用不同的给药顺序,通过检测肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT/GPT)、微量丙二醛(MDA)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量以及肝细胞的增殖活性,研究了五味子提取物对急性肝细胞损伤的保护作用。结果表明:以浓度为1 mmoL/L的t-BHP作用肝细胞2 h诱导肝损伤模型,加入五味子提取物后能通过提高上清液中GSH-PX和SOD酶活力以及抑制脂质过氧化产物MDA的生成来减轻t-BHP对肝细胞的损伤,减少GPT的释放,使GPT活力水平的升高受到明显抑制,显著提高了肝细胞的存活率(P<0.05或P<0.01);预防治疗组(DT)中五味子提取物对损伤肝细胞的保护效果明显要优于预防组(D)和治疗组(T)。说明五味子提取物对由t-BHP造成的肝细胞急性损伤具有一定的保护作用,该保护作用可能与其抗氧化、清除自由基的能力有关;中药与损伤剂的给予顺序会影响五味子提取物对肝细胞的保护作用。
- 曹丽萍贾睿丁炜东殷国俊
- 关键词：异育银鲫五味子提取物原代培养
- 建鲤体内外急性肝损伤模型的建立被引量：3
- 2012年
- 以四氯化碳(CCl4)为肝毒剂,建立建鲤体内外急性肝损伤模型。体内,采用腹腔注射法造模,按0.1 mL/10g一次性分别注射0、6.25%、12.5%和15%CCl4-橄榄油溶液(v/v),于造模后24～144 h取血,测定建鲤血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平;体外,0、2、4、8、16、32 mmol·L-1CCl4分别作用于原代培养的建鲤肝细胞4 h后,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存状况,同时收集细胞培养上清,测定其GPT、GOT、LDH、MDA、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活力。结果显示,12.5%、15%CCl4-橄榄油溶液腹腔注射建鲤24 h后即能引起血清中GOT、GPT和MDA显著升高,15%CCl4溶液造模组48 h能显著提高血清中LDH水平,4个指标均在CCl4作用96 h后恢复到接近正常水平;8～32 mmol·L-1CCl4作用体外培养肝细胞4 h时,细胞上清中GPT、GOT、LDH和MDA含量显著升高、SOD和GSH活力显著下降,肝细胞存活率显著下降,分别为空白对照组的66.29%、54%和37%,且有剂量依赖性。结果表明,分别采用15%CCl4-橄榄油腹腔注射建鲤72 h和8 mmol·L-1CCl4作用体外培养肝细胞4 h可以构建体内外急性肝损伤模型。
- 曹丽萍贾睿丁炜东杜金梁殷国俊
- 关键词：四氯化碳建鲤MTT
- 虎杖提取物对CCl_4致建鲤肝损伤抗氧化系统的影响被引量：6
- 2012年
- 主要探讨基础饲料中添加虎杖提取物对建鲤肝损伤中抗氧化性能的影响。建鲤被随机分为6个组,每组20条,即I组(CCl4)、II组(0.5%虎杖提取物)、III组(1%虎杖提取物),按每10 g体质量0.05 mL体内注射30%CCl4;IV组(0.5%虎杖提取物)、V组(1%虎杖提取物)体内不注射CCl4,只注射同体积植物油;VI为空白对照组,也注射同体积植物油。每日饲喂2次,连续8周,注射72 h后模型建立成功。检测建鲤血清中LDH、GPT、GOT、TP、ALB的表达水平;检测肝组织匀浆中SOD、GSH-Px、MDA、CAT、T-AOC含量的变化。结果表明:1%的虎杖提取物(V组)对于清除自由基,防治肝损伤有很好的效果,能显著提高SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量;显著提高T-AOC和CAT含量;显著增加TP、ALB活性;显著降低血清中GPT、GOT、LDH的活性,与空白对照组相比,差异不显著(P>0.05);与CCl4组相比,差异显著(P<0.05),而0.5%和1%虎杖提取物对照组则无明显变化。
- 杜金梁贾睿曹丽萍殷国俊
- 关键词：虎杖提取物四氯化碳建鲤抗氧化性能
