深圳市科技计划项目(201101001)
- 作品数：6 被引量：37H指数：4
- 相关作者：肖德明雷鸣崔文岗石岩刘弼更多>>
- 相关机构：广州医学院深圳市第二人民医院北京大学深圳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SIRT1经p53和NF—κB的相关蛋白途径调控软骨细胞凋亡的体外研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨S1RT1经p53／bax和NF-κB／过氧化物酶体增殖物受体1共激活因子-1α（PGC．1a）途径调控软骨细胞凋亡的作用机制。方法常规培养新西兰兔关节软骨细胞，分为3组（n：10）：SIRTI激活剂（白藜芦醇）组、对照组、SIRT1抑制剂（尼克酰胺）组，用硝普钠诱导细胞凋亡。采用噻唑蓝法俭测各组软骨细胞活性及增殖、4＇，6-二脒基-2-苯幕吲哚（DAPI）染色和流式细胞术检测各组细胞捌亡，采用WesternBlot技术检测各组细胞SIRT1、p53、NF-κB、bax、PGC-α的表达，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组细胞SIRTⅠ、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达。结果SIRT1激活剂组、对照组、SIRT1抑制剂组OD值平均分别为0．139±0．016、0．098±0．006、0．079±0．002，细胞凋亡率平均分别为9．8％±0．7％、27．3％±1．6％、41．9％±2．0％，以上项目3组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0。05）。SIRT1激活剂组细胞SIRT1、PGC-1α的表达较对照组增高，而SIRT1抑制剂组较对照组降低；SIRTI激活剂组p53、NF。KB、bax的表达较对照组降低，而SIRT1抑制剂组较对照组升高。SIRT1激活剂组细胞SIRTI、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达最高，对照组次之，SIRT1抑制剂组最低。结论SIRT1可通过调控p53、NF-κB的表达改变其下游bax、PGC-1α的表达，从而调控软骨细胞的凋亡。
- 刘弼肖德明雷鸣王大平熊建义马经野许蕴史敦云张晓丽
- 关键词：软骨细胞细胞凋亡体外研究基因表达调控
- 白藜芦醇对组织工程化软骨的保护作用及其机制的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究白藜芦醇对骨髓间充质干细胞组织工程化软骨的保护作用并探讨其机制。方法首先将体外单层扩增的大鼠骨髓间充质干细胞在藻酸钠微球中行三维立体软骨细胞定向培养，其定向分化程度通过甲苯胺蓝染色、免疫组织化学等方法鉴定。然后将从微球释放的分化软骨细胞接种于壳聚糖．明胶复合支架，培养3周后制备组织工程化软骨，其内部软骨细胞以及支架形态用扫描电镜和激光共聚焦显微镜观察。将白细胞介素（IL）-1B作用于该细胞．支架材料上，并用白藜芦醇和（或）特异性的抗整合素81亚单位抗体进一步干预，蛋白印迹法检测Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶（MMP）-13以及核因子．KB的表达，扫描蛋白印迹条带灰度并进行半定量计算，采用方差分析进行统计学处理。结果在定向培养过程中，藻酸盐微球中的软骨细胞在细胞周围可形成明显的细胞外基质，促进分化，软骨细胞特异性Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达显著增高。定向分化后的软骨细胞在壳聚糖．明胶复合支架材料上能良好地贴壁、增殖和迁徙，形成组织工程化的软骨。蛋白印迹半定量分析：软骨Ⅱ型胶原对照组表达量0．484±0．006；白藜芦醇干预后表达量0．474±0．014，两者差异无统计学意义（P〉0．05）；IL-1β干预后，表达量下降至0．155±0．009，差异有统计学意义（P〈0．05）；而白藜芦醇能阻断IL-1β的负面效应，使Ⅱ型胶原表达量恢复至0．468±0．014，差异有统计学意义（P〈0．05），同对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；而抗β1整合素能阻断白藜芦醇对IL-18的拮抗作用，使胶原表达量下降至0．169±0．011，差异有统计学意义（P〈0．05），与IL-1β单独作用比较差异无统计学意义（P〈O．05）。蛋白聚糖半定量统计和Ⅱ型胶原的表达趋势相同，同时伴随MMP-13、核因子
- 崔文岗雷鸣石岩肖德明
- 关键词：软骨间质干细胞NF-KB白藜芦醇
- 抗衰老基因SIRT1对骨关节炎的防治影响被引量：6
- 2012年
- 去乙酰化酶Sir2（silenceinformationregulator2，Sir2）基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用，可能是所有生物共同的寿命控制基因之一。SIRT1是存在于哺乳动物的酵母染色质沉默子Sir2同源体，是一种依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）的组蛋白去乙酰化酶。它与多种细胞生物学功能如基因转录沉默、细胞生长周期调节、能量代谢包括糖异生和脂质累积、胰岛素分泌、血管生成、神经保护、病毒感染以及细胞衰老有着密切关联。
- 刘弼雷鸣肖德明
- 白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡bax及bcl-2表达的影响被引量：6
- 2012年
- [目的]探讨白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡及凋亡调控基因bax及bcl-2表达的影响。[方法]常规培养关节软骨细胞后,按不同浓度白藜芦醇(分别为25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)处理后分组并用硝普钠(SNP)(2.5 mmol/L)诱导细胞凋亡。采用MTT法检测各组软骨细胞活性、DAPI染色和流式细胞术检测各组细胞凋亡,采用western-blot技术检测各组细胞sirt1、bax、bcl-2的表达,RT-PCR法检测各组细胞sirt1mRNA的表达。[结果]随着白藜芦醇浓度的升高,MTT法结果显示处理后细胞活性依次增高;DAPI染色、流式细胞术检测显示处理后细胞凋亡相对较少;western-blot检测显示随着白藜芦醇浓度的升高,处理后细胞sirt1、bcl-2依次增高,而bax逐渐降低;RT-PCR法检测显示白藜芦醇处理后细胞sirt1 mRNA表达随浓度逐渐增高。[结论]白藜芦醇激活sirt1,使bcl-2/bax表达增高,是白藜芦醇抑制软骨细胞凋亡、预防骨关节炎的机制之一。
- 刘弼肖德明雷鸣王大平熊建义马经野许蕴张晓丽
- 关键词：白藜芦醇SIRT1软骨细胞
- 硫酸钙人工骨修复骨缺损的应用研究进展被引量：10
- 2013年
- 目前由严重创伤、感染、骨肿瘤等因素导致的大块骨吸收、缺损日益成为临床外科医生面临的一大挑战。针对骨缺损的治疗，自体骨移植是金标准，但是局限于供体来源，并且对供体自身造成残疾等，严重影响自体骨的广泛应用。同种异体骨是现如今在临床应用最广泛的替代材料之一，但是由于炎症反应、不能满足治疗大块骨缺损等缺点，一定程度上限制了其应用前景。对理想人工骨材料的需求促使临床医生进行不断的实验研究，期望获得一种组织相容性良好、成骨活性、生物力学强度都能够和自体骨相近的替代材料。
- 崔文岗石岩肖德明
- 关键词：大块骨缺损人工骨材料硫酸钙自体骨移植生物力学强度供体来源
- 腰椎椎间融合器临床研究进展被引量：11
- 2013年
- 生物型、金属型、复合材料型、可吸收型椎间融合器是目前临床研究最多的腰椎椎间融合器。生物型腰椎椎间融合器仍为评价其他植骨技术的金标准;金属型腰椎椎间融合器在设计理念、临床适应证、植入方式等方面有一些进展,仍具有明显优势;复合材料型腰椎椎间融合器与骨替代材料、骨形态发生蛋白联合应用日益成熟,临床疗效良好,为理想的椎间融合器;可吸收型腰椎椎间融合器作为一种新兴技术,因出现骨溶解、骨不融合及炎症反应明显而尚需逐步发展完善。该文就腰椎椎间融合器临床研究情况作一综述。
- 石岩崔文岗肖德明
- 关键词：腰椎椎间融合器腰椎退行性变
