贵州省科学技术基金(2003-3015)
- 作品数:4 被引量:38H指数:3
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- 单核细胞趋化蛋白-1诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡被引量:5
- 2007年
- 目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(hUVEC)凋亡的影响.方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度MCP-1(0.1,1.0,10,100μg/L)对其作用24,48h;Annexin V/PI双染细胞,流式细胞仪观察内皮细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测细胞染色体“DNA ladder”的形成.结果:MCP-1能诱导hUVEC的凋亡,其效应随浓度和时间的增加而增强(P<0.01);Annexin V/PI显示凋亡细胞明显增加;细胞DNA呈明显的“DNA ladder”.结论:MCP-1能诱导hUVEC凋亡.
- 李琴山刘洋冯赞杰钱民章
- 关键词:脐静脉内皮细胞
- 一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法被引量:27
- 2007年
- 目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法.方法:采用胰蛋白彰胶原酶(1:1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),当原代培养细胞80%以上汇合后用胰蛋白酶消化传代;用形态学、免疫细胞化学法进行鉴定.结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长,48~96h生长最快,7—10d汇合.内皮细胞呈单层铺路石样外观,Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ:Ag)和内皮细胞生长因子受体2(KDR)鉴定内皮细胞纯度达95%以上.结论:用混合酶液灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型.
- 李琴山冯赞杰刘洋徐海燕钱民章
- 关键词:内皮细胞脐静脉细胞培养
- 单核细胞趋化蛋白-1对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响被引量:3
- 2007年
- 目的研究单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(human um-bilical vein endothelial cells,hUVEC)凋亡的影响。方法培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;用不同浓度MCP-1(0.1、1.0、10、100μg/L)对其作用24、48h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞技术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其对hUVEC凋亡的影响。结果单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡(P<0.05),其效应随浓度和时间的增加而增强:MTT明显减低;细胞DNA含量减少,出现明显亚G0/G1峰(凋亡细胞峰)。结论单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞凋亡。
- 李琴山刘洋冯赞杰张亚玲钱民章
- 关键词:单核细胞趋化蛋白-1人脐静脉内皮细胞凋亡动脉粥样硬化
- 金雀异黄素抑制单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡被引量:3
- 2007年
- 目的:研究金雀异黄素对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)诱导人脐静脉内皮细胞(hUVECs)凋亡的影响及可能机制。方法:培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;用不同浓度金雀异黄素(0.1μmol、1μmol、10μmol、50μmol)和终浓度为10μg/L的MCP-1作用24h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞技术检测细胞DNA含量及细胞周期,观察其对hUVECs生长的影响,流式细胞技术及Western印迹法检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2、Bax的表达,探讨金雀异黄素对MCP-1诱导hUVECs凋亡干预的可能机制。结果:金雀异黄素抑制单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,抑制效应随剂量增加而增强(P<0.01,P<0.01,P<0.01)。MTT值明显增高;凋亡细胞明显少于对照组(10μg/LMCP-1),Bcl-2表达明显高于对照组,Fas、Bax表达明显低于对照组。结论:金雀异黄素能抑制单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞的凋亡,抑制作用有量效相关性,抑制机制可能与下调Fas、Bax蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达有关。
- 李琴山刘洋冯赞杰钱民章
- 关键词:单核细胞化学吸引蛋白质1染料木黄酮脐静脉内皮细胞蛋白质BAX细胞凋亡