国家教育部博士点基金(20111106120056)
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
- 相关作者：俞建昆马春霞姚宇峰杨梦莉马千里更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院昆明医科大学昆明理工大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- ERCC1新的mRNA剪接异构体及其在顺铂处理细胞中的变化
- 2016年
- 为了考察用顺铂处理肺癌和宫颈癌细胞后,ERCC1的mRNA选择性剪接是否发生变化,通过提取处理的肿瘤细胞和对照细胞的总RNA,进行RT-PCR检测,对出现的剪接异构体目的条带进行TA克隆、测序鉴定。结果发现了2个新的ERCC1的mRNA剪接异构体,其中缺失外显子7-9的异构体在所检测的多种癌细胞中普遍存在,并且在顺铂处理下,其所占比例会随顺铂浓度的升高而增加。该异构体的变化揭示细胞可能会通过pre-mRNA选择性剪接调控ERCC1的功能。
- 陈香岭杨梦莉隋旭廉亚茹马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆
- 关键词：生物化学顺铂核苷酸切除修复
- 构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系被引量：2
- 2017年
- 目的:构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系。方法:合成能与EB病毒(EBV)编码的EBV-miR-BART16、EBV-miR-BART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22 miRNAs特异结合的miRNA海绵(miRNA sponge)序列,用PITA软件预测构建的sponge是否结合非特异性miRNAs;构建pLVshRNA-EGFP-EBVsponge载体,与慢病毒包装质粒pH1、pH2共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染SNU719细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞株;Real-time PCR检测细胞中EBV-miR-BART16、EBV-miRBART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22表达水平。结果:成功构建pLVshRNA-EGFP-EBVspong(命名为pEGFP-EBV-sp);与对照组相比,pEGFP-EBV-sp组中4种microRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建稳定表达pEGFP-EBV-sp的SNU719细胞系。
- 陈香岭杨梦莉马春霞俞建昆
- 关键词：细胞系胃肿瘤MIRNASPONGE
- WEE1激酶及其抑制剂在抗肿瘤治疗中的应用进展被引量：3
- 2016年
- WEE1激酶是一种细胞周期调节蛋白,能调控细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)的磷酸化状态,从而调节CDK1与细胞周期蛋白B(cyclin B)复合物的活性从而实现对细胞周期的调控,且对DNA损伤检查点具有重要的调节作用。WEE1是G2/M期阻滞的关键基因,起着重要的监测作用,在一些癌症中过表达,抑制或下调WEE1激酶均能引发有丝分裂灾难,因此WEE1激酶抑制剂可能在抗癌治疗中有关键作用。在癌症的治疗过程中,WEE1抑制剂与DNA损伤剂、化学药物等联合使用会得到比单独使用更为有效,且在p53缺失的癌细胞中能发挥更好的效果。目前WEE1已成为许多癌症治疗的关键靶点之一,其抑制剂MK-1775已处于临床研究阶段,且能增强一些DNA损伤剂对p53缺失的癌细胞的杀伤能力。本文就WEE1激酶及其抑制剂在抗癌治疗中的应用作一综述。
- 隋旭韩斌杨梦莉陈香岭俞建昆牛华
- 关键词：有丝分裂检查点癌症治疗
- SRSF2基因的生物信息学分析与蛋白质预测
- 2017年
- 目的:分析富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子2(SRSF2)基因序列和表达产物的特征。方法:运用生物信息学相关软件分析和预测人类和小鼠SRSF2基因的同源区段、开放读框、启动子区域、转录因子结合位点、CpG岛分布情况,分析预测小鼠SRSF2基因蛋白产物的功能结构域以及与其他蛋白的相互作用。结果:人类和小鼠SRSF2基因共有3个同源区段、19个开放读框、4个相同的转录因子结合位点,2个基因的CpG岛各项参数基本一致;小鼠SRSF2蛋白会与至少10种其他蛋白因子发生相互作用。结论:SRSF2基因及其蛋白产物的生物信息学分析,为相关研究提供了重要的信息基础。
- 李明阳马春霞吴翰欣吴小海杨渊俞建昆
- 关键词：生物信息学蛋白质相互作用
- 过量人参皂苷对小鼠脑组织谷氨酸代谢的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨过量人参皂苷对小鼠脑组织中谷氨酸代谢的影响。方法:常规饲养昆明小鼠,按照最终浓度低(8 mg/kg)、中(40mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量连续灌胃人参皂苷24天,记录小鼠体重变化。第25天颈脱臼处死小鼠,取出全脑匀浆后测定谷氨酸水平,谷氨酰胺酶活力。结果:各实验组与对照组相比,体重明显下降;低、中、高实验组谷氨酸水平分别高与对照组13.66%、21.67%、39.83%,其中中剂量组和高剂量组显著高于空白组(P<0.05);谷氨酰胺酶活力较对照组分别增高2.06%、2.91%、10.11%,高剂量与空白组差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量人参皂苷能使神经系统兴奋,可能与增高谷氨酰胺酶活力、从而提高脑组织中谷氨酸含量有关。
- 李明阳马春霞吴翰欣吴小海俞建昆
- 关键词：人参皂苷谷氨酸谷氨酰胺酶
- 云南汉族人群内质网氨肽酶2基因多态性与非小细胞肺癌遗传易感性的相关性被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨内质网氨肽酶2 （ERAP2）基因多态性与非小细胞肺癌（NSCLC）的相关性.方法 收集云南地区汉族人群NSCLC患者223例,健康体检者205名.采用Taq Man探针基因分型方法对ERAP2基因单核苷酸多态性（SNP） rs2248374和rs2549782位点进行基因分型,并构建单倍型,评估上述2个SNP位点及单倍型与NSCLC的相关性.结果 病例组和对照组ERAP2基因rs2248374等位基因频率A和G分别为45.5％（203/446）、54.5％（243/446）和37.8％ （155/410）、62.2％（255/410）,差异有统计学意义（x2=5.220,P＜0.05）,rs2549782位点GG、GT、TT基因型频率分别为21.5％（48/223）、48.9％（109/223）、29.6％（66/223）和11.7％（24/205）、49.8％（102/205）、38.5％（79/205）;等位基因频率G和T分别为46.0％（205/446）、54.0％（241/446）和36.6％（150/410）、63.4％（260/410）,差异有统计学意义（x2值为8.656和7.741,均P＜0.05）,由rs2248374和rs2549782位点构建的单倍型AG和GT的频率分别为44.6％ （199/446）、36.1％ （148/410）和53.1％（237/446）、61.7％ （253/410）,差异有统计学意义（x2值为6.567,均P＜0.01）.病例组中吸烟和非吸烟患者rs2248374位点的等位基因频率A和G分别为52.9％（72/136）、47.1％ （64/136）和42.3％（131/310）、57.7％ （179/310）,rs2549782位点的等位基因频率G和T分别为54.4％（74/136）、45.6％（62/136）和42.3％ （131/310）、57.7％ （179/310）,差异有统计学意义（x2值为4.498和5.831,均P＜0.05）,而鳞癌和腺癌患者的rs2248374位点AA、AG、GG基因型频率分别为17.3％（24/139）、56.1％ （78/139）、26.6％（37/139）和27.8％（22/79）、38.0％（30/79）、34.2％（27/79）,rs2549782位点GG、GT、TT的基因型频率分别为18.7％（26/139）、55.4％（77/139）、25.9％（36/139）和27.8％ （22/79）、36.7％（29/79）、35.4％（28/79）,差异有统计学意义（x2值为6.999和7.093,均P＜0.05）.结论 ERAP2基因�
- 周竞贤马千里郭晨史荔姚宇峰俞建昆张晓琳
- CDH13基因变异与非小细胞肺癌的相关性被引量：2
- 2016年
- 目的探讨CDH13基因变异与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的相关性．方法采用TaqMan探针基因分型方法对NSCLC患者（n＝115）及健康体检人群（n＝110）CDH13基因rs11646213及rs71954092个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNPs）位点进行基因分型，评估上述2个SNPs与NSCLC发生发展的相关性．结果CDH13基因SNP-rs16146213基因型和等位基因频率在病例组和对照组中的分布均存具有统计学意义（＜0.05）（OR＝0.464，95%CI：0.273～0.789）．SNP-rs7195409基因型和等位基因频率在不同临床分期中的分布均有统计学意义（＜0.05）（OR＝0.491，95%CI：0.243～0.991）．结论CDH13基因SNP-rs11646213与NSCLC的发生相关性，G等位基因对NSCLC的发生可能具有保护性作用．CDH13基因SNP-rs7195409与NSCLC的恶性程度有关，G等位基因可能在NSCLC的发展中起到保护性作用．
- 洪超李盈甫马千里蔡秋龙姚宇峰俞建昆廖国阳
- 关键词：非小细胞肺癌单核苷酸多态性
- 复制状态下EB病毒对宿主细胞中ZEB1基因表达的影响
- 2018年
- 目的:探究EB病毒(EBV)在潜伏感染和裂解复制状态下对ZEB1、ZEB2、ZEB1-AS1基因表达的影响。方法:将EBV相关癌细胞系Raji、SNU-719、AGS分为实验组(TPA及Na B诱导EBV)和对照组(加入等体积DMSO),将稳定表达p LVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU-719细胞系设为sponge组,未经转染RNA sponge的SNU-719细胞系设为control组(2组细胞均使用TPA及Na B进行诱导),TPA及Na B处理48 h后提取细胞总RNA进行RT-PCR,从mRNA水平检测ZEB1、ZEB2及ZEB1-AS1基因的表达。结果:与对照组相比,EBV复制期间,在Raji、SNU-719、AGS细胞中ZEB1 mRNA表达量显著升高(P<0.05),ZEB1-AS1 mRNA的表达量仅在AGS细胞中显著降低(P<0.05),在SNU-719和AGS细胞中未检测到ZEB2的表达;稳定表达p LVshRNA-EGFPEBVsponge的SNU-719细胞比未转染RNA sponge的SNU-719细胞,ZEB1表达量明显降低(P<0.05)。结论:EBV依靠自身编码的miRNA在复制期间促进ZEB1的表达,同时也对ZEB1-AS1有抑制作用。
- 李明阳马春霞陈香岭吴翰欣吴小海俞建昆
- 关键词：EB病毒MIRNA
- 顺铂处理后几种hTERT mRNA剪接异构体的变化
- 2016年
- 目的:利用顺铂处理肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞,检测人类端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)mRNA的选择性剪接是否发生变化。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,用顺铂处理实验组细胞,DMSO处理对照组细胞;设计hTERTα+β+、α+β-、α-β+、INS3及DEL[e2]引物,提取两组细胞的总RNA,利用RT-PCR检测hTERT mRNA剪接异构体表达。结果:与对照组细胞相比,随着顺铂浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞以及人胚肾293FT细胞中hTERTα+β-和INS3异构体比例升高,而DEL[e2]异构体变化不明显。结论:在顺铂引起的DNA损伤情况下,细胞可利用hTERT mRNA选择性剪接调控机制进行调节,通过改变不同异构体的量和所占比例,从而调节端粒酶功能活性。
- 杨梦莉陈香岭隋旭廉亚茹马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆
- 关键词：宫颈肿瘤人胚肾细胞顺铂
- 顺铂处理癌细胞后CDC25 mRNA剪接异构体的变化被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨顺铂(CDDP)对肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞CDC25磷酸酶mRNA的选择性剪接的影响。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa、CaSki细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,实验组细胞用CDDP处理,对照组细胞用DMSO处理,设计CDC25A、CDC25B、CDC25C引物,利用RTPCR检测CDC25 mRNA剪接异构体的表达变化。结果:与对照组细胞比较,随着CDDP浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和CaSki细胞以及人胚肾293FT细胞中CDC25B、CDC25C mRNA剪接异构体比例有明显变化,而CDC25A mRNA剪接异构体变化不明显。结论:CDDP引起细胞DNA损伤时,可发生CDC25mRNA选择性剪接异构体的比例发生变化,这可能与肿瘤药物治疗时的抗性有关。
- 杨梦莉陈香岭马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆
- 关键词：顺铂聚合酶链式反应DNA损伤
