中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008hzs1J014) 作品数:5 被引量:40 H指数:4 相关作者: 贺春萍 余贤美 郑服丛 王义 林超 更多>> 相关机构: 中国热带农业科学院 海南大学 海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 国家科技支撑计划 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
枯草芽孢杆菌CAS15嗜铁素基因dhbC的克隆、表达及功能鉴定 被引量:5 2009年 通过PCR技术扩增得到dhbC基因,对其进行序列分析发现,dhbC基因片段长为1197bp,预期编码398个氨基酸,蛋白分子量大小为43.8kD。将目的片段连接到表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)获得重组菌株BL21(DE3)/pET-30a-dhbC,以IPTG在30oC诱导4h实现高效表达,获得一个分子量为48.8kD的融合蛋白。重组蛋白可溶性分析结果表明:融合蛋白主要为可溶性蛋白。Western blotting分析结果表明:重组蛋白可与兔抗His-tag多克隆抗体发生特异性反应,在48.8kD处有特异条带,与预期结果一致,证明重组质粒中含有dhbC基因。通过同源重组的策略将dhbC基因敲除后重新导入,验证了dhbC基因与嗜铁素的生物合成密切相关。 余贤美 林超 郑服丛 贺春萍 张修国关键词:枯草芽孢杆菌 基因克隆 原核表达 基因敲除 土壤嗜铁细菌C19的筛选、分子鉴定及其对炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用 被引量:10 2009年 利用LB液体培养基进行生物富集,采用CAS(Chrome Azurol S)检测平板法,从海南岛橡胶树等作物根际土壤中分离获得43个产嗜铁素细菌菌株。通过室内平板对峙培养法研究其中嗜铁能力较强的菌株C19对12个常见炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用,结果表明,该菌株对Fusarium solani等9个菌株有不同程度的拮抗作用,显示该菌株具有较好的生防潜能。扩增菌株C19的16S rDNA序列,序列测定结果显示,该片段长度为1 525 bp,经Blastn搜索进行序列比对,该细菌为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)。 林超 余贤美 王春妮 李书莹 贺春萍 郑服丛关键词:RDNA 分子鉴定 拮抗作用 土壤解磷微生物研究进展 被引量:18 2009年 综述了具有解磷能力的微生物在不同土壤、作物根际中的数量及种群分布,论述了解磷微生物的种类、分布、数量、解磷机制、解磷效果的研究进展。 王义 贺春萍 郑肖兰 杨芩 郑服从关键词:土壤 解磷微生物 一株热带土壤解磷细菌的筛选鉴定及拮抗初探 被引量:7 2009年 [目的]研究热带土壤解磷微生物种群结构,筛选鉴定高效解磷菌株,为热带土壤解磷细菌的筛选和菌肥制备奠定基础。[方法]以有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板法从海南、广东、云南等地热带土壤中筛选出解磷效果较好的一株解磷细菌PSB13。[结果]通过细菌16 S rRNA通用引物PCR扩增该菌株的16 S rDNA序列,测得序列长度为1 088 bp,经B lastn搜索进行序列比对,结果表明,该菌株属于Burkholderiasp。进一步的室内平板对峙培养试验表明,PSB13对Fusarium oxysporum piperis等11个供试病原菌中的9个具有不同程度的拮抗作用。[结论]PSB13是一株高效的具有开发前景的热带土壤解磷菌株。 王义 余贤美 贺春萍 郑服丛关键词:热带土壤 解磷细菌 RDNA 分子鉴定 拮抗 热带土壤解磷细菌PSB26的筛选鉴定及拮抗初探 被引量:2 2009年 以有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板法从海南、广东、云南等地热带土壤中筛选出解磷效果较好的一株解磷细菌PSB26。通过细菌16S rRNA通用引物PCR扩增菌株的16SrDNA序列,测得该菌株的序列长度为1095bp,经B lastn搜索进行序列比对,结果表明:该菌株属于Klebsiellasp.。进一步的室内平板对峙培养实验表明,PSB26对Fusarium oxysporum piperis等11个供试病原菌中的6个具有不同程度的拮抗作用。 王义 余贤美 郑服丛关键词:热带土壤 解磷细菌 分子鉴定 拮抗