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人4IgB7-H3对结肠癌细胞SW480中β3GnT8表达的影响: 2013年; 目的探索人结肠癌细胞SW480转染4IgB7-H3后对糖基转移酶133GnT8和细胞表面多聚乳糖胺糖链表达的影响。方法脂质体介导的重组表达载体plRES2-EGFP／4IgB7-H3转染SW480细胞，筛选并获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株；RT-PCR、WesternBlot检测B3GnT8的表达；流式细胞术检测多聚乳糖胺寡糖链的表达。结果成功获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株SW480／4IgB7-H3；转染4IgB7-H3的SW480细胞中B3GnT8和多聚乳糖胺糖链的表达均明显下调（P〈0．05）。结论人肠癌细胞中4IgB7-H3过表达能抑制p3GnT8的表达，进而抑制多聚乳糖胺糖链的表达。; 石小蕊姜彧滕邹士涛倪建龙高利平徐徐于美云姜智周迎会吴士良; 关键词：转染 SW480

一株鼠抗人TLT-2单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定: 2011年; 为了制备鼠抗人TLT-2单克隆抗体(mAb)并对其生物学特性进行初步的研究。以TLT-2基因转染细胞株免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗人TLT-2 mAb,收集腹水,并用ProteinG亲和层析法纯化。以流式细胞术、IP和Western blot等方法鉴定该单抗的特异性。并通过流式细胞术、CCK8和ELISA等方法对单抗的生物学特性进行了初步分析。结果:获得一株持续稳定分泌鼠抗人TLT-2 mAb的杂交瘤细胞株,命名为8C10。杂交瘤细胞分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ)。IP和Western blot分析证明,8C10能特异性识别人TLT-2分子。经8C10荧光染色后流式细胞术的结果表明:TLT-2在T细胞表面呈弱阳性表达,在单核细胞和B细胞表面呈强阳性表达。细胞增殖实验结果显示,该mAb对T细胞的增殖有抑制作用。提示,成功获得了一株特异性鼠抗人TLT-2 mAb,该mAb对T细胞体外增殖及其细胞因子IFN-γ、IL-2、和IL-10的分泌均有明显的抑制作用。; 徐俊驰傅丰庆高菲周斌胡玉敏张学光; 关键词：单克隆抗体杂交瘤真核表达质粒

转染Lgr5基因对结肠癌细胞株体外生物学特性影响的研究被引量：1: 2013年; 目的构建pIRES2-EGFP-Lgr5重组表达载体，获得SW480／Lgr5瞬时基因转染细胞株，并探讨转染Lgr5基因对结肠癌细胞株生物学特性的影响。方法运用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）技术从结肠癌组织中获得Lgr5全长基因，经双酶切（XhoI和BamHI）连接入真核表达载体pIRES2-EGFP中，利用脂质体法转染SW480细胞，经流式细胞术、Westernblot、免疫细胞化学法检测Lgr5分子的表达；CCK-8法和悬滴实验分析Lgr5对结肠癌细胞增殖率和成球能力的影响，划痕实验分析Lgr5对结肠癌细胞迁移能力的影响。结果成功构建真核表达载体pIRES2。EGFP／hLgr5，并获得SW480／Lgr5瞬时基因转染细胞株；转染Lgr5基因的结肠癌细胞体外增殖速度加快，形成的细胞球大而紧密但迁移能力下降。结论Lgr5基因转染促进结肠癌细胞株体外的生长，为进一步研究人Lgr5分子的生物学特性及其在结肠癌中的作用机制奠定了基础。; 高菲傅丰庆徐俊驰高兵胡玉敏张学光; 关键词：转染 SW480细胞生物学特性

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国家自然科学基金(30901313)