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牙龈卟啉单胞菌脂多糖影响单核细胞表达Th17细胞分化相关因子的研究被引量：3: 2015年; 目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人外周血CD14+单核细胞表达Th17细胞分化相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-23和TGF-β的影响。方法:采用脂多糖提取试剂盒提取牙龈卟啉单胞菌标准株ATCC33277和高毒力株W83脂多糖;免疫磁珠法分选健康志愿者外周血CD14+单核细胞。以大肠杆菌脂多糖为对照,1μg/ml牙龈卟啉单胞菌脂多糖处理单核细胞,分别培养12、24、36h后收集细胞和上清液,实时定量PCR及ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-23、TGF-βm R NA和蛋白水平的表达。结果:各型脂多糖均可显著上调单核细胞四种细胞因子m RNA及蛋白水平的表达;上调作用具有时间效应,在12h达到高峰。并且三种菌株脂多糖对不同细胞因子表达的影响存在一定差异。结论:牙龈卟啉单胞菌脂多糖可显著上调CD14+单核细胞表达IL-1β,IL-6,IL-23,TGF-β,可能与牙周炎症环境中Th 17细胞的分化相关。; 张莉平高雳赵雅静张弛王兴羽赵川江; 关键词：牙龈卟啉单胞菌脂多糖 TH17细胞细胞因子单核细胞

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫抑制功能的影响被引量：2: 2009年; 目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcells,Tregs)免疫抑制功能的影响。方法采用酚水法提取Pg ATCC 33277株脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)。免疫磁珠法分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Tregs并进行体外培养,同时给予不同剂量(0～500 ng/ml)Pg-LPS干预,培养48 h后收集细胞及上清液。Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10、TGF-β水平;采用体外淋巴细胞混合培养法对Pg-LPS干预后的CD4+CD25+Tregs进行功能抑制试验。结果Pg-LPS干预不影响CD4+CD25+Tregs分泌IL-10和TGF-β,但是能够显著上调CD4+CD25+Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用;当Pg-LPS浓度低于300 ng/ml时,CD4+CD25+Tregs Foxp3 mRNA表达以及免疫抑制作用的增强与Pg-LPS浓度之间呈剂量-效应关系。结论Pg-LPS能够增强CD4+CD25+Tregs的免疫抑制作用,这种免疫抑制增强效应可能与CD4+CD25+Tregs Foxp3基因表达的上调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。; 赵川江徐琛蓉俞少杰章锦才; 关键词：牙龈卟啉单胞菌脂多糖 CD4^+CD25^+调节性T细胞 FOXP3

健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫抑制功能的影响被引量：5: 2010年; 目的:探讨健脾护齿方对伴放线放线杆菌(actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)超声提取物作用下CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcells,Tregs)免疫抑制功能的影响。方法:免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Tregs并进行体外培养,将300μg/mlAα超声提取物和不同剂量健脾护齿方药液加入培养液中,72h后收集细胞及上清液,Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10,TGF-β水平。结果:Aa超声提取物能够显著上调CD4+CD25+Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用,但不影响CD4+CD25+Tregs分泌IL-10和TGF-β;健脾护齿方抑制Aa超声提取物上调CD4+CD25+Tregs Foxp3mRNA表达的作用,并且Foxp3 mRNA表达的抑制作用与健脾护齿方剂量之间呈剂量—效应关系。结论:健脾护齿方有抑制Aa超声提取物上调CD4+CD25+Tregs免疫抑制功能的作用,这种抑制效应可能与Foxp3基因表达的下调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。; 赵川江金钊左渝陵; 关键词：伴放线放线杆菌 CD4+CD25+调节性T细胞 FOXP3

慢性牙周炎病人外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞的检测和免疫抑制功能分析被引量：4: 2009年; 目的:探讨慢性牙周炎病人外周血中CD4+CD25+调节性T细胞与牙周炎病变程度的相关性,并进一步分析CD4+CD25+调节性T细胞的免疫抑制功能。方法:应用流式细胞仪检测牙龈炎、慢性牙周炎病人和健康对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;以体外淋巴细胞混合培养法检测CD4+CD25+调节性T细胞对同源CD4+CD25-T细胞增殖的抑制效应,ELISA法检测培养体系中转化生长因子-β、白细胞介素-10的分泌水平。结果:轻度和中度慢性牙周炎组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例分别为(19.33±7.04)%和(18.56±5.79)%,显著高于健康对照组和牙龈炎组(P<0.05);重度慢性牙周炎组为(9.31±3.04)%,显著低于健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组(P<0.05)。当与CD4+CD25-T细胞1∶1混合培养时,重度慢性牙周炎者CD4+CD25+调节性T细胞的抑制率较健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组降低(P<0.05),各培养组之间转化生长因子-β、白细胞介素-10的分泌水平无显著差异。结论:轻度和中度慢性牙周炎病人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达上调,而重度慢性牙周炎病人则显著下降;重度慢性牙周炎病人CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能存在异常,可能与其接触抑制途径缺陷有关。; 徐琛蓉赵川江江丽; 关键词：慢性牙周炎调节性T细胞流式细胞仪混合淋巴细胞反应

侵袭性牙周炎患者外周血CD4＋CD-25＋调节性T细胞的检测及功能分析被引量：2: 2009年; 目的探讨侵袭性牙周炎患者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞比例及其免疫抑制功能的变化，以期加深对侵袭性牙周炎免疫调节机制的认识。方法应用流式细胞仪计数牙周健康者17例、慢性牙周炎患者17例和广泛型侵袭性牙周炎患者16例外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞的比例；免疫磁珠法分离受试者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞和CD4＋CD-25＋T细胞，体外淋巴细胞混合培养法检测CD4＋CD-25＋调节性T细胞对同源CD4＋CD-25-T细胞增殖的抑制效应。结果侵袭性牙周炎患者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞占CD-4＋T细胞的比例为（9．71±4．01）％，显著低于牙周健康者[（14．72±3．51）％]和慢性牙周炎患者[（17．01±5．16）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）；当CD4＋CD-25＋调节性T细胞与CD4＋CD-25-T细胞的比例为2：1、1：1、1：2时，侵袭性牙周炎患者CD4＋CD-25＋调节性T细胞的抑制率[分别为（31．37±5．12）％、（24．47±5．53）％及（19．36±3．58）％]较慢性牙周炎患者[分别为（54．14±8．23）％、（41．72±6．35）％及（28．21±5．31）％]和牙周健康者[分别为（58．02±9．62）％、（45．25±8．11）％及（29．56±4．23）％]显著降低（P〈0．05）。结论侵袭性牙周炎患者外周血CD-4＋CD-25＋调节性T细胞在数量上存在异常，并可能伴有抑制功能缺陷。; 赵川江徐琛蓉周玉竹苏小鹏; 关键词：T淋巴细胞调节性侵袭性牙周炎

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国家自然科学基金(30801296)

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