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辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(L2010309)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
王高频
佟玉娜
曹程
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相关机构:
辽宁医学院附属第一医院
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发文基金:
辽宁省教育厅高等学校科学研究项目
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相关领域:
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2013
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腺病毒介导的hHCN4表达载体的构建及其转染人胚肾细胞
2012年
目的构建人超极化激活环核甘酸门控通道基因4(hHCN4)的重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP,并对其进行鉴定、包装。方法利用Gateway技术构建pAV-hHCN4-IRES/eGFP,酶切鉴定并进行阳性克隆测序。将构建好的质粒转染人胚肾细胞HEK293,检测病毒液滴度。结果测序符合Genbank中的hHCN4的编码序列。转染HEK293细胞见绿色荧光蛋白表达,病毒滴度为1.26×108 pfu/ml。结论成功构建了重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP。
曹程
王高频
关键词:
腺病毒
人胚肾细胞
携带hHCN4基因重组腺病毒载体体外转染大鼠BMSCs的实验研究
被引量:3
2013年
目的构建重组腺病毒载体Ad-hHCN4-IRES/eGFP在体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs),检测目的基因在BMSCs中mRNA和蛋白水平是否有表达。方法采用贴壁培养法分离纯化大鼠BMSCs;将携带hHCN4基因的重组腺病毒转染大鼠BMSCs,用荧光显微镜观察转染后BMSCs绿色荧光蛋白的表达,用RT-PCR和Western Blot法检测转染后hHCN4基因mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 BMSCs成功贴壁分离传代。转染目的基因24 h后荧光显微镜下即观察到绿色荧光蛋白的表达;RT-PCR法检测到有hHCN4 mRNA的表达,Western blot法检测到有其蛋白水平的表达。结论重组腺病毒载体转染的BMSCs能够表达hHCN4基因。
佟玉娜
王高频
关键词:
重组腺病毒
骨髓间充质干细胞
生物起搏
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