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浙江省“钱江人才计划”(2011R10031)
作品数:
1
被引量:18
H指数:1
相关作者:
张萍华
洪华嫦
林红军
丁林贤
横田明
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相关机构:
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发文基金:
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相关领域:
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张萍华
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2012
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藤黄微球菌Rpf活性蛋白的制取及其对红球菌VBNC菌体的复苏作用
被引量:18
2012年
【目的】克隆藤黄微球菌Micrococcus luteus IAM 14879(=NCIMB 13267)的复苏促进因子Rpf(resuscitation promoting factor)的基因,在大肠杆菌中表达获取基因重组蛋白,考察对近缘高GC革兰氏阳性菌红球菌Rhodococcus sp.DS471活的非可培养VBNC(viable but non-culturable)菌体的复苏促进生长能力。【方法】抽提制备藤黄微球菌的DNA,确定rpf基因引物进行PCR扩增,利用pET15b质粒载体并转化大肠杆菌DE3表达,以SDS-PAGE检验获取纯化重组蛋白;在培养基中添加Rpf,以MPN(most probable number)法计数、评价对VBNC状态菌体的复苏促进生长效果。【结果】基因测序证实获得藤黄微球菌的rpf基因并在大肠杆菌中表达;SDS-PAGE分析表明获得rpf基因的重组蛋白;该蛋白对处于VBNC状态的红球菌具有近100倍的复苏促进生长能力。【结论】成功克隆了藤黄微球菌的rpf基因,在大肠杆菌中获得了表达,表明了Rpf蛋白对处于VBNC状态的红球菌具有复苏促进生长效果。
丁林贤
张萍华
洪华嫦
林红军
横田明
关键词:
藤黄微球菌
VBNC
红球菌
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