广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013091)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：潘艳陈泽祥谢宇舟闭炳芬禤雄标更多>>
- 相关机构：广西兽医研究所广西大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪源大肠杆菌 O157：H7与 O157的差异蛋白质组学分析被引量：5
- 2012年
- 为了阐述O157:H7与O157的致病力差异与蛋白质表达差异之间的关系,我们利用双向电泳技术和质谱技术对大肠杆菌两类菌株之间进行蛋白质组学差异分析。菌体蛋白经双向电泳技术分离后,利用软件Image Master TM2DPlatinum7.0对所得双向电泳图谱进行差异分析并借助质谱技术对差异蛋白质点进行鉴定,获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的菌体总蛋白的双向电泳图谱。两样品图谱差异分析结果表明,共确定了28个有效的蛋白质差异点(Av.ratio>2.0,ANOVA<0.05),经质谱鉴定将这28个差异点注释成23种蛋白质。对得到注释的23种蛋白质进行功能分类,发现7类蛋白质与致病性密切相关,即溶菌酶抑制剂、通用应激蛋白、LuxS、鞭毛蛋白以及3种外膜蛋白。本结果将为进一步研究O157:H7菌株的致病因子,探究O157:H7与其它大肠杆菌菌株的致病力差异,以及建立快速鉴别诊断O157:H7的试剂盒提供重要的依据。
- 谢宇舟密克李军陈泽祥许力干杨威闭炳芬禤雄标潘艳胡帅
- 关键词：大肠杆菌肠出血性大肠杆菌O157H7O157蛋白质组学
- 猪源大肠杆菌O_(157)∶H_7菌体蛋白双向电泳方法的建立被引量：2
- 2012年
- 为了建立大肠杆菌O157∶H7菌体蛋白的双向电泳技术,获得背景清晰,蛋白点分辨率高,重复性好的双向电泳图谱。对双向电泳技术中的样品制备方法、上样量、染色等关键步骤进行了优化。最终选用冰浴超声(9s/间隔9s,200w)3min,再置4℃24h后离心提取蛋白样品,以上样量为0.5mg菌体蛋白在pH值4-7的24cm IPG胶条上进行电泳,最后用考马斯亮蓝G-250染色,获得了较好的双向电泳图谱,得到了850±20个蛋白质点,蛋白主要集中在pH值4.06-7.53之间,匹配率为95.3%。随机选取10个蛋白质点进行质谱鉴定,检出率100%,10个蛋白质除了一个蛋白质为假定蛋白以外,其他蛋白质分属于乙酰辅酶A合成、能量代谢、氨基酸代谢等代谢途径。建立的大肠杆菌O157∶H7菌体蛋白双向电泳方法,为开展大肠杆菌O157∶H7强弱毒力菌株的差异蛋白质组学研究奠定了基础。
- 谢宇舟密克李军陈泽祥彭昊马春霞禤雄标胡帅许力干谢永平杨威闭炳芬潘艳
- 关键词：蛋白质组双向电泳
