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肠源性内毒素水平与肝脏Toll样受体4表达在大鼠重症急性胰腺炎肝损伤中变化被引量：4: 2013年; 目的:探讨肠源性内毒素(ET)与肝脏Toll样受体4(TLR4)表达在重症急性胰腺炎(SAP)肝损伤中的关系。方法:48只Wistar大鼠随机均分为模型组和对照组,模型组用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠法制作SAP模型,对照组行假手术。两组分别于术后3,6,12 h随机各取8只大鼠,收集胰腺、肝脏组织及外周动脉血,行病理学检查,检测血淀粉酶(AMY),谷丙转氨酶(ALT)和ET水平,并用Western blot法检测肝脏TLR4表达。结果:与对照组比较,模型组胰腺与肝脏病理学评分、血AMY,ALT,ET水平,以及肝组织TLR4蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05),且各指标均随时间不断升高;对照组各指标在各时间点上无明显变化(均P>0.05);模型组肝脏TLR4蛋白表达水平与血ET呈明显正相关(r=0.863,P<0.01)。结论:SAP时血ET水平升高与肝脏TLR4蛋白的表达上调存在相关性,两者的相互作用可能参与了SAP肝损伤的机制。; 陈炳合李文星范晓彬赵倩申素纲温勃阳; 关键词：肝损伤 TOLL样受体4 内毒素类

重症急性胰腺炎肝损伤中Toll样受体4与外周血调节性T细胞的关系被引量：1: 2013年; 重症急性胰腺炎（SAP）的发病机制十分复杂，免疫调节参与病程始末及因免疫紊乱所致复杂多变的临床表现是难以争辩的事实。Toll样受体4（TLR4）作为一种重要的脂多糖（LPS）跨膜信号转导受体拉引，参与内毒素诱发的炎性反应过程，在感染所致炎性反应信号转导中作用重要，作为被最早发现且研究最多的TLR亚型之一，其信号传导通路也最明确。调节性T细胞（Treg）是近年来发现的一类具有独特免疫抑制功能的T细胞亚型，常态下其上有少量TLR4表达；感染状态下，Treg最主要的功能是调节在机体对抗病原体时T细胞的反应平衡。; 李文星陈炳合范晓彬熊泽翼申素纲温勃阳段吉明张毅; 关键词：TOLL样受体4 重症急性胰腺炎外周血肝损伤跨膜信号转导 T细胞亚型

连翘对重症急性胰腺炎大鼠肝组织中NF-κB和Foxp3表达的影响被引量：6: 2013年; 目的探讨核因子NF-κB和Foxp3在重症急性胰腺炎(SAP)肝损伤中的作用及连翘对其表达活性的影响。方法雄性Wistar大鼠80只,随机分成假手术组(SO组)、SAP组和干预组,其中干预组分连翘高、中、低剂量组和阳性对照组(PDTC)。牛磺胆酸钠溶液在胰胆管远端注射造模,SO和SAP组于术后3、6、12 h,干预组于术后12 h处死大鼠,分别留取标本。测各组血淀粉酶(AMY)、ALT及TNFα水平,鲎试剂法测血浆内毒素水平,流式细胞术测外周血Treg百分数,对胰腺及肝脏进行病理学检查及评分,RT-PCR法检测肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达量。组间比较采用单因素方差分析,进一步进行多重比较,采用LSD法进行统计学处理,各指标间相关性分析采用直线相关分析。结果与SO组比较,SAP组中各项指标均随时间升高,于12 h达高峰。与SAP12 h组相比,干预组(大鼠死亡率为0)肝脏组织中的NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达明显降低(P<0.01),与Treg呈正相关(r=0.738,P<0.01)。随连翘剂量增加,AMY、ALT及TNFα水平均明显降低,肝脏和胰腺组织炎症明显减轻,高剂量组和阳性对照组相比较无明显差异(P>0.05)。结论 NF-κB的激活参与SAP肝损伤的发生,连翘能显著降低NF-κB的活性及肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA的表达,减轻SAP肝损伤的严重程度。; 范晓彬李文星陈炳合熊泽翼段吉明; 关键词：NF-ΚB 连翘

连翘对内毒素作用下大鼠脾脏淋巴细胞Toll样受体4、核因子-κB及白细胞介素-6、白细胞介素-10的影响被引量：8: 2015年; 目的观察连翘对内毒素（ET）作用下大鼠脾脏淋巴细胞Toll样受体4（TLR4）、核因子-κB （NF-κB）、白细胞介素（IL）-6及IL-10的影响,探讨其抗炎及免疫调节的作用.方法无菌操作分离大鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含20％胎牛血清的DMEM培养基培养,分为对照组（Control）、ET组、连翘高、中、低剂量组[连翘水煎液（AFS）1＋ET、AFS2＋ ET、AFS3＋ ET]及多黏菌素B组（Ploy B＋ET）;AFS1＋ ET、AFS2＋ ET、AFS3＋ ET组及Ploy B＋ET组分别加入AFS 50.0、25.0、12.5 g/L及多黏菌素B 10 mg/L培养0.5h后,再分别加入10 μg/L ET培养12h;实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测TLR.及NF-κB表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞分泌IL-6及IL-10的水平.结果与Control组比较,ET组TLR4、NF-κB表达水平明显升高（1.38 ±0.05比0.47±0.01;2.37±0.09比0.68±0.09,P＜0.01）,IL-6及IL-10分泌水平明显增高[（65.96±0.26）ng/L比（16.59±0.23） ng/L; （21.01 ±0.16） ng/L比（9.17±0.14）ng/L,P＜0.01];AFS1＋ ET、AFS2＋ ET、AFS3＋ ET组均能显著减轻上述变化,并呈剂量依赖关系;AFS1＋ ET组与Ploy B＋ET组比较差异无统计学意义[0.67±0.03比0.74±0.02;1.22±0.12比1.35±0.10; （21.54 ±0.47） ng/L比（22.20士0.40）ng/L;（11.37 ±0.21） ng/L比（11.85±0.20） ng/L,P＞0.05].结论连翘预处理能降低ET作用下大鼠脾脏淋巴细胞TLR4、NF-κB的表达及IL-6、IL-10的分泌,有抗炎及免疫调节作用.; 李文星张毅温勃阳段吉明申素纲熊泽翼尹金祥武彩虹; 关键词：连翘内毒素淋巴细胞 TOLL样受体4

淋巴细胞在内毒素导致全身炎症反应综合征中作用机制的研究现状被引量：4: 2014年; 内毒素可以激活机体多种免疫细胞释放大量的细胞因子和炎症介质,使得炎症反应失控,导致全身反应炎症综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）。淋巴细胞是机体参与免疫反应的重要细胞,其在细胞免疫和体液免疫反应中发挥重要的作用,而近些年研究表明,淋巴细胞在内毒素引发的SIRS的发生及发展中亦发挥重要作用。; 段吉明李文星; 关键词：内毒素淋巴细胞全身炎症反应综合征

重症急性胰腺炎的免疫紊乱与免疫治疗进展被引量：6: 2014年; 重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）是临床上常见的急腹症,起病急,病程快,病情凶险,早期即可发生全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）和多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome,MODS）,病死率高达20％～30％.迄今为止,SAP发病的确切机制尚未完全阐明.传统的酶异常激活理论和自身消化学说己不能全面解释SAP的发病机制及其复杂的病理进程.近期研究表明,免疫功能紊乱在SAP病理生理机制中的作用受到广泛关注.; 张毅李文星; 关键词：重症急性胰腺炎免疫紊乱 INFLAMMATORY 全身炎症反应综合征病理生理机制免疫功能紊乱

内毒素对大鼠淋巴细胞表达TLR4及NF-κB与分泌IL-6的影响被引量：1: 2014年; 目的研究内毒素干预离体大鼠淋巴细胞后TLR4 mRNA、NF-κB mRNA的表达及IL-6分泌的变化,探讨淋巴细胞在全身炎症反应综合征(SIRS)发生及进展中的作用机制。方法制备健康雄性Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,培养至对数期,随机分为对照组和实验组。对照组不做处理。实验组加入不等量内毒素,调整浓度为低浓度组(10 ng/ml)、高浓度组(100 ng/ml),培养3、6、12 h。RT-PCR技术检测TLR4及NF-κB的mRNA表达水平,ELISA技术测定IL-6的分泌量。结果干预3 h后,低浓度组:TLR4及NF-κB的mRNA表达与对照组比较无显著差异(P>0.05),IL-6的分泌与对照相比差异有统计学意义(P<0.05)。高浓度组:TLR4 mRNA的表达及IL-6的分泌与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),NF-κB的mRNA表达与对照组比较无显著差异(P>0.05)。干预6、12 h后,低、高浓度组:TLR4及NF-κB的mRNA表达与IL-6的分泌分别与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,TLR4及NF-κB的mRNA表达水平及IL-6的分泌量随时间延长增加。结论内毒素能刺激大鼠淋巴细胞高表达TLR4、NF-κB及分泌包括IL-6在内的各种细胞因子与炎症介质,促进SIRS的发生及发展。; 段吉明李文星张毅温勃阳申素纲魏星尹金祥; 关键词：内毒素类淋巴细胞 TOLL样受体4 NF-ΚB 白细胞介素6

内毒素作用下淋巴细胞中CD4^+CD25^+调节性T细胞变化及连翘对其的影响被引量：2: 2014年; 目的探讨不同时间点内毒素(LPS)对CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cell,Treg)的影响及连翘(forsythia suspensa,FS)干预后CD4+CD25+调节性T细胞的变化。方法体外培养Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,分为对照组、LPS(10ng/ml)组、LPS(10ng/ml)+多黏菌素B组(10μg/ml)、LPS(10ng/ml)+连翘(12.5、25、50mg/ml)组,分别于3、6、12h收集标本,流式细胞术检测CD4+CD25+调节性T细胞在淋巴细胞中的百分比,荧光定量RT-PCR法检测Foxp3mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测TNF-α、IL-10分泌水平。结果脾脏淋巴细胞中CD4+CD25+Treg的百分比和Foxp3mRNA的表达在12h较3、6h明显升高(P<0.01);TNF-α、IL-10的分泌随时间点的延长均显著升高(P<0.01);随连翘剂量增加,TNF-α、IL-10分泌水平,Foxp3mRNA表达和CD4+CD25+Treg百分比均明显降低(P<0.05)。结论内毒素参与并诱导了CD4+CD25+Treg在淋巴细胞中的变化,其随内毒素作用时间延长呈上升趋势。连翘能显著降低CD4+CD25+Treg在淋巴细胞中的百分比。; 温勃阳李文星熊泽翼张毅段吉明申素纲魏星; 关键词：重症急性胰腺炎内毒素调节性T细胞连翘

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山西省回国留学人员科研经费资助项目(2012-090)

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