国家自然科学基金(30871794)
- 作品数:6 被引量:37H指数:3
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- 基于高通量转录组测序的山羊睾丸和附睾头差异表达基因分析被引量:14
- 2014年
- 为探明山羊睾丸和附睾差异表达基因,挖掘与精子成熟和贮存密切相关的功能基因。采用Illumina HiSeqTM2000高通量转录组测序RNA-seq技术对3只成年种公羊睾丸和附睾头进行测序,将组装得到的Unigene比对到Nr、GO和KEGG数据库中注释,并进行差异表达基因聚类分析。结果显示,睾丸和附睾头Unigene总数分别为57 727个和51 395个,GO功能分类注释到生物过程、分子功能和细胞组成数据库中的分别有25 201、25 456和27 318个,其中差异表达基因数分别为9 150、9 172和10 003个;注释到KEGG通路中所有基因数23 222个,其中差异表达基因数8 219个,差异基因显著富集的信号通路:mRNA监视通路和mTOR信号通路;睾丸和附睾头中差异表达的基因共有24 592个,其中上调基因有8 420个,下调基因有16 172个。在附睾头中上调幅度最大的前3位:gDEFB124、gDEFB109和gDEFB108,下调幅度最大的前3位:GTSF1L、SRRM1和FNDC8。附睾头中表达量最高的前3位基因依次为Lcn5、gDEFB124和GPx5。睾丸中表达的基因数量大于附睾头中数量;β防御素家族、Lipocalin家族和GPx5可能在附睾头精子成熟、贮存和受精中发挥重要作用。
- 张春香张国林郭丽娜赵辉任有蛇
- 关键词:转录组差异表达基因睾丸公山羊
- 山羊精子发生不同阶段的显微与超微结构观察被引量:1
- 2010年
- 应用光镜和透射电镜技术研究山羊精子发生不同阶段各级生精细胞显微、超微结构及山羊精子分化成熟过程。结果表明:山羊精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞及变态精子阶段发育成成熟的精子。精原细胞期核呈椭圆形,染色质凝集成团分布于核质中,线粒体开始出现;精母细胞期有高尔基体分布;精子细胞经过核质浓缩、线粒体迁移等过程发育成成熟精子,成熟的山羊精子头部细长,核质高度浓缩,中段膨大,线粒体丰富。线粒体、中心粒对精子变态发生起重要作用,同时观察到头部与中段脱落的畸形精子。
- 施力光荀文娟岳文斌杨茹洁张春香任有蛇雷福林
- 关键词:山羊精子发生精原细胞精母细胞精子细胞精子超微结构
- 山羊PHGPx基因干扰质粒构建及其抑制效应评价
- 2012年
- 为了构建高效的靶向山羊PHGPx基因的干扰质粒,并在山羊共培养生精细胞中验证其抑制效应,利用Am-bion在线软件设计4对针对山羊PHGPx有潜在干扰效果的siRNA,体外退火后形成具有发夹结构的shRNA,将其与线性化的pGPU6/GFP/Neo载体相连形成质粒,然后经Pst I和BamH I酶切和测序鉴定;利用脂质体将其转染到体外共培养生精细胞中,用RT-PCR和Western印迹方法检测其PHGPx基因的抑制效应。结果表明:经Pst I和BamH I酶切和测序确定了150、182、214和248共4种pGPU6/GFP/Neo-PHGPx-shRNA的阳性克隆质粒;Lipo-fectamine 2000TM脂质体瞬时转染的共培养生精细胞的Real-time PCR结果表明,pGPU6/GFP/Neo-PHGPx-150、214和248质粒能够显著降低共培养细胞PHGPx mRNA的表达,蛋白免疫印迹结果图像分析免疫条带的平均光密度结果表明,pGPU6/GFP/Neo-PHGPx-214质粒极显著降低了共培养生精细胞PHGPx蛋白表达(P<0.01)。pG-PU6/GFP/Neo-PHGPx-shRNA质粒载体构建成功,pGPU6/GFP/Neo-PHGPx-214质粒瞬时转染共培养生精细胞后可以明显抑制PHGPx基因表达,可用于进一步PHGPx基因功能的研究。
- 张春香施力光荀文娟王茜任有蛇岳文斌
- 关键词:山羊干扰质粒
- 母源硒对黎城大青羊后代生长发育性能的影响
- 妊娠是母畜在生殖过程中一个特殊而又重要的阶段,妊娠后母体出现各种生理性的负荷,在妊娠期,
- 岳文斌石磊张春香任有蛇雷福林
- 文献传递
- 山羊PHGPx基因在不同组织中的表达特点及性腺中的定位被引量:5
- 2010年
- 【目的】研究磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)在山羊各种组织中的表达特点及在性腺中的定位情况。【方法】提取各种组织总RNA,应用实时荧光定量PCR方法检测各种组织PHGPx mRNA表达规律,利用免疫组化技术对睾丸和附睾PHGPx进行定位分析。【结果】PHGPx mRNA在各种组织表达水平由高到低依次为:睾丸>>心>脑>附睾>肾>肝>肺>脾>背最长肌,在性腺和附睾中:睾丸>>附睾尾>附睾头>附睾体;免疫组化结果显示睾丸间质组织、生精细胞均有阳性产物,附睾头部平滑肌纤维表达弱阳性,附睾尾部附睾管中的单层柱状上皮表达呈强阳性。【结论】PHGPx在不同组织广泛表达,发挥重要的生物学功能,免疫组化结果直观显示了睾丸及附睾表达差异的部位,需深入研究其作用机制。
- 施力光荀文娟岳文斌张春香王茜武晓英任有蛇石磊杨茹洁雷福林
- 关键词:荧光定量PCR睾丸附睾
- GPxs家族基因在山羊不同组织和睾丸不同发育时期的表达特性研究被引量:22
- 2011年
- 为了研究谷胱甘肽过氧化酶家族(GPxs)在山羊不同组织表达的特异性及在睾丸不同发育时期的表达特性。采用SYBR Green荧光定量PCR的方法对太行青山羊公羊各组织和不同发育时期睾丸GPxsmRNA的表达进行了定量分析。结果表明:GPx1、GPx3、GPx4和GPx7在各组织广泛表达,其表达量由高到低的顺序:GPx1是肝脏>肺脏>心脏>睾丸、脾脏>肾脏>背最长肌,肝脏GPx1mRNA表达量是肌肉组织的6.7倍;GPx3是肾脏>心脏>肝脏、睾丸>脾脏、肺脏、背最长肌,肾脏GPx3mRNA表达量分别是肝脏和肺脏表达量的12和24倍;GPx4是睾丸>心脏>肾脏、肝脏、肺脏>脾脏、背最长肌,睾丸GPx4mRNA表达量分别是肝脏和肌肉的21和137倍;GPx7是肝脏>脾脏、肺脏、背最长肌>心脏>肾脏、睾丸。GPx5和GPx6仅在睾丸和附睾中表达,且GPx5在附睾头中的表达是睾丸的114倍;睾丸中GPx3表达量随日龄增加而降低,GPx1和GPx4表达量随日龄增加而增加,GPx5在90d开始表达且直接到达高峰平台,GPx6和GPx7在60d开始表达,90d到高峰平台,而后其表达量降低。山羊GPxs mRNA表达具有明显的组织特异性,山羊睾丸中GPxs mRNA表达具有时间依赖性。
- 张建新王茜荀文娟任有蛇岳文斌张春香
- 关键词:山羊MRNA睾丸
- 磷脂氢谷胱苷肽过氧化酶
- 2009年
- 磷脂氢谷胱苷肽过氧化酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,PHGPx)是硒谷胱苷肽过氧化酶家族中独特的一员,它不仅具有GPx的抗氧化作用,还具有清除生物膜内及其脂蛋白质上酯脂过氧化物的作用,还是构成精子的结构蛋白,在细胞调亡中也发挥重要作用。作者综述了PHGPx的生物学功能、结构特征、分布、组织表达及分子水平上表达调控的研究进展。
- 王茜张春香岳文斌任有蛇
- 关键词:PHGPX生物学功能结构特征