国家教育部博士点基金(200804760003)
- 作品数：19 被引量：30H指数：4
- 相关作者：陈广文张合彩刘德增孙健石长应更多>>
- 相关机构：河南师范大学黑龙江省科学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金河南省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 日本三角涡虫河南八种群基于COⅠ基因片段的分子系统学研究被引量：1
- 2010年
- 对采自河南4大山系8产地的日本三角涡虫线粒体DNA细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基(COⅠ)基因进行PCR扩增和测序,用MEGA4.0、PAUP*4.0等程序对所得序列进行分析和系统树重建。结果表明,采自大别山系商城县的两个种群XYshangcheng1和XYshangcheng2的COⅠ片段序列同源性最高,为100%;而采自伏牛山系嵩县的种群LYsongxian与其它7种群的COⅠ片段序列同源性最低,在84.3%～89.0%之间。NJ树、MP树和贝叶斯树拓扑结构完全一致,从系统树上可以看出LYsongxian种群与其它7种群的亲缘关系最远;另外7种群又聚为2支。该聚类结果基本和各种群的山系分布相符合。同时结合基于Hsp70基因的分子系统学研究以及涡虫形态学、细胞遗传学等方面的证据初步推测:LYsongxian种群可能不是日本三角涡虫,而是三角涡虫属另外一个种,该推测是否正确尚待进一步的组织解剖学验证。
- 张合彩孙健陈广文刘德增
- 关键词：日本三角涡虫系统发育树
- 河南省桐柏县两产地日本三角涡虫核型分析
- 2010年
- 利用空气干燥法对采自河南省桐柏县下虎山和盘古溪两产地日本三角涡虫(Dugesia japonica)的染色体及核型进行了研究。结果表明,日本三角涡虫下虎山种群体细胞中染色体数目以16条为主,染色体基数x=8,为2倍体,核型公式为2n=2x=16=16m;日本三角涡虫盘古溪种群体细胞中染色体数目以24条为主,染色体基数x=8,为3倍体,核型公式为2n=3x=24=24m。
- 武丽敏陈广文刘德增
- 关键词：日本三角涡虫染色体核型
- 热休克蛋白(HSPs)基因家族在涡虫中的研究进展
- 2016年
- 热休克蛋白(HSPs)广泛存在于从细菌到人类的各种有机体中,在生物生命活动中具有重要生理功能,如作为分子伴侣参与细胞增殖和分化以及免疫应答等;同时某些HSPs表达水平的高低可作为衡量环境污染或者人类恶性肿瘤疗效和预后的重要指标.涡虫是扁形动物门的代表动物,因其在动物系统演化中的特殊地位和极强的再生能力而作为研究发育和再生的模式动物之一.概述了HSPs基因家族成员在涡虫抗逆和再生研究中的主要成果和最新进展,并对目前存在的问题及未来的发展方向进行了总结和展望.以期为揭示HSPs在高等动物中的作用机制提供参考.
- 程方方董自梅陈静詹会娜陈广文
- 关键词：涡虫热休克蛋白基因
- 3种提取淡水涡虫基因组DNA方法比较
- 2009年
- 分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高,试剂盒法是最适合涡虫基因组DNA制备的方法.相同起始物质量条件下,3种方法从活体涡虫中提取的DNA量和纯度均高于95%酒精固定的涡虫标本,但试剂盒法提取95%酒精固定半年以上的涡虫标本,所得DNA产率较高、质量较好,可满足PCR扩增等分子生物学实验的要求.
- 孙健张合彩陈广文刘德增
- 关键词：淡水涡虫DNA提取改良CTAB法
- 三肠亚目(扁形动物门：涡虫纲：序列目)涡虫系统发育研究进展被引量：5
- 2009年
- 比较分析了基于形态特征和分子序列数据的三肠亚目涡虫的系统发育关系,总结出现今大家公认的该亚目的系统发生关系:Tricladida是一个亚目级阶元,即三肠亚目,隶属于扁形动物门、涡虫纲、序列目.该亚目下分4个次目:海栖次目、陆栖次目、沼栖次目和穴居次目,其中海栖次目是一个单系,为亚目内较原始的类群;沼栖次目是一个并系,其内的三角涡虫科和陆栖次目有最近共同祖先;陆栖次目为单系起源.三肠亚目涡虫的演化路线是由海生到淡水再到陆生,之后又有逆转现象,即个别类群(如Spathula、Romankenkius)又返回淡水生活.文中还对未来该亚目系统发育研究的焦点进行了展望和预测.
- 张合彩陈广文孙健刘德增
- 关键词：涡虫系统发育
- 日本三角涡虫染色体和分子分类特征研究被引量：2
- 2009年
- 日本三角涡虫是国际上研究涡虫再生和发育的模式动物,三角涡虫传统的分类学基础是以其生殖解剖学特征为依据.通过核型分析和RT-PCR技术,从核学和分子生物学水平对三角涡虫的分类学特征进行研究,结果表明:染色体和分子分类特征可以有效地辅助三角涡虫的分类.
- 费利娜马克学陈广文石苛刘德增
- 关键词：日本三角涡虫染色体核型RT-PCR
- 涡虫再生过程中乳酸脱氢酶同工酶变化分析
- 2009年
- 采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直板活性电泳技术,分析了涡虫切割后再生过程中乳酸脱氢酶同工酶的变化.结果表明:在涡虫去头后再生(第1 d至第7 d)过程中乳酸脱氢酶的表达存在差异,同一种酶在再生不同时期表达量不同,不同种酶在同一时期的表达量也不相同.
- 周亚静张合彩陈广文刘德增
- 关键词：涡虫同工酶PAGELDH
- 日本三角涡虫hsp70 cDNA克隆及原核表达被引量：1
- 2010年
- 热休克蛋白70是热休克蛋白家族中的重要成员,它在保护生物体免受各种胁迫中发挥重要作用。由于其惊人的再生能力,淡水涡虫作为研究再生和发育的模式动物受到研究者关注。但是,有关涡虫抗逆性的分子机制却少有报道。研究采用RACE(Rapid amplification of cDNA end)技术首次从日本三角涡虫中克隆出hsp70(Djhsp70)全长cDNA序列。Djhsp70 cDNA全长2066bp,含有1947bp的开放阅读框,编码648个氨基酸,分子量71.18kD,GenBank登录号EU380241。DjHSP70的氨基酸含有真核生物HSP70家族蛋白的三个标签序列(9–16位的IDLGTTYS、199—206位的DLGGGTFD、334–339位的IVLVGG)和末端高度保守序列EEVD。经BLAST检索分析,Djhsp70的核苷酸序列和推定的氨基酸序列与目前已知HSP70家族成员高度同源。有趣的是,HSP70亲缘关系分析表明:涡虫更靠近脊椎动物,而与无脊椎动物果蝇和线虫相距较远。为了制备抗体研究DjHSP70的组织学定位,实验还成功构建了DjHSP70表达载体,在IPTG诱导下表达出约76kD的融合蛋白。Djhsp70 cDNA的克隆与表达载体的构建为下一步工作奠定了基础。
- 马克学陈广文娄昊费利娜
- 关键词：日本三角涡虫HSP70克隆
- 日本三角涡虫热休克蛋白70(DjHSP70)C-端多肽表达及其抗血清制备
- 2011年
- 首先运用在线生物学软件对日本三角涡虫(Degusia japonica)热休克蛋白70(DjHSP70)氨基酸序列进行亲水区分析,发现该蛋白C-端含有较多亲水性氨基酸,然后以该段多肽序列为基础构建原核表达载体。采用PCR方法扩增450 bp cDNA片段,编码DjHSP70 C-端150个氨基酸多肽。将双酶切的cDNA片段与pET-28a载体连接后导入BL21受体菌,在IPTG诱导下表达出21 ku融合蛋白,分子量与预期相符。该融合蛋白采用Ni2+-NTA agarose树脂进行纯化,纯化结果电泳检测后经灰度扫描分析显示纯度在95%以上。融合蛋白免疫新西兰大白兔获得高效价的抗血清,Western blot检测显示该抗血清不仅具有很强的特异性,而且还识别小鼠HSP70。此项工作为进一步研究淡水涡虫抗逆性奠定了基础。
- 马克学娄昊陈广文刘德增
- 关键词：涡虫蛋白纯化抗血清
- 淡水涡虫眼点形态发生相关基因研究进展被引量：3
- 2015年
- 涡虫是动物界最早出现两侧对称、三胚层、营自由爬行生活的动物类群,在动物系统演化中占有重要地位。由于涡虫眼点结构简单,再生能力极强,因此成为研究视觉系统形成、进化及再生的理想模型。我们以日本三角涡虫(Dugesia japonica)为例,对淡水涡虫眼点的结构、形态发生过程及眼点再生相关基因进行概述,重点介绍眼点形态发生过程中与眼点前体细胞分化、视神经纤维生长、视觉系统功能恢复及眼点视杯形成相关基因的表达模式及功能分析,并对目前存在的问题及未来的发展进行总结和展望。为探索高等动物包括人类的视觉系统的形成机制提供参考。
- 董自梅李小艳陈静程方方陈广文
- 关键词：基因淡水涡虫
