国家科技重大专项(2008ZX08005-004)
- 作品数:37 被引量:241H指数:8
- 相关作者:祝建波张锐郭三堆王爱英张晓更多>>
- 相关机构:中国农业科学院生物技术研究所石河子大学新疆农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项新疆生产建设兵团博士基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 大叶补血草质膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因SOS1的克隆及对番茄的遗传转化被引量:8
- 2010年
- 根据大叶补血草(Limonium gmelinii(Wildl.)Kuntze)SOS1基因序列(登录号:EU780458)设计特异性引物,通过RT-PCR方法从叶片中克隆得到质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因LgSOS1,将该基因重组于质粒pCAMBIA1390的CaMV35S启动子下游,构建含LgSOS1基因植物表达载体pCAMBIA1390-LgSOS1。通过根癌农杆菌介导法转化番茄(Lycopersicon esculen-tum),在1.2 mg/L6-BA、0.2 mg/L IAA、20 mg/L潮霉素和200 mg/L羧苄青霉素的MS培养基上进行选择培养,从抗性愈伤组织中获得再生植株。经PCR和RT-PCR检测,初步证实LgSOS1基因已整合至番茄的基因组中。
- 马苏勇祝建波王爱英周玲玲
- 关键词:大叶补血草番茄
- 陆地棉萌发出苗期耐盐鉴定方法的研究及应用被引量:10
- 2010年
- 采用耐盐性不同的2个品种对棉花萌发出苗期的耐盐性进行了研究,结果表明:在盐土含盐量为0.3%时耐盐品种中9806与盐敏感品种Tam cot CAB-CS的出苗率差异极显著,所以盐土含盐量为0.3%的出苗率可以用来鉴定棉花萌发期的耐盐性。14个品种(系)萌发期耐盐性筛选表明:不同基因型的棉花品种萌发期耐盐性存在显著差异,证明此鉴定方法准确可靠;萌发期耐盐性较强的品种有3个(分别为豫棉21、中棉所35、鲁棉研16),萌发期耐盐水平中等的品种(系)有2个(分别为东保0617和鲁棉研21)。
- 王俊娟樊伟莉叶武威王德龙
- 关键词:棉花耐盐性耐盐品种
- 玉米新品种锦单1021在海南制种应注意的问题
- 2012年
- 锦单1021是由锦州农科院选育的玉米新品种,2007年通过辽宁省农作物品种审定委员会审定,审定编号为辽审玉[2007]350号。该品种为晚熟优良玉米杂交种,具有增产潜力大、抗性强、米质好、马齿深等优点,其生产面积正逐年增加。2007年11月至2008年3月底和2010年10月至2011年3月初,分别在海南省三亚市梅山一带制种。三亚地处热带,冬季少雨,
- 李明月
- 关键词:玉米新品种制种玉米杂交种增产潜力生产面积
- 棉酚及其衍生物合成途径的研究进展被引量:6
- 2011年
- 棉酚作为一种倍半萜烯类植物抗菌素广泛存在于棉花的根、种子等表皮组织的色素腺体里。该化合物已在医药、工业和农业等领域得到广泛应用。近来对棉酚及其衍生物合成途径的研究日趋深入,许多关键酶基因已得到克隆和分析。掌握棉酚及其衍生物的生物合成途径,并试图通过基因工程改造的方法来控制植物体棉酚的合成具有重要意义。概述了棉酚及其衍生物合成途径和关键酶的研究进展并展望其应用前景。
- 张程程吴燕民唐益雄
- 关键词:棉酚色素腺体
- 陆地棉质体转录活性因子基因GhPTAC的克隆及其耐盐性分析
- 2011年
- 为了挖掘新的耐盐基因及调控途径,利用基因芯片技术及抑制性差减文库技术筛选到质体转录活性因子,通过RACE及RT-PCR技术克隆到该基因的cDNA全长,命名为GhPTAC。该cDNA全长1564bp,其中ORF1038bp,推测编码345个氨基酸残基的多肽。生物信息学分析表明GhPTAC为拟南芥PTAC13同源基因,同源性60.6%。编码蛋白为转录活跃的染色体(TAC)的一个组分,参与叶绿体基因组转录终止/抗终止调节。real-timePCR分析结果表明,GhPTAC受盐胁迫诱导上调表达,在耐盐材料中9806中表达水平明显高于盐敏感材料中S9612,这与芯片结果一致。
- 周凯叶武威王俊娟王德龙樊保香王帅
- 关键词:陆地棉盐胁迫PTAC
- 大叶补血草Na^+/H^+逆向转运蛋白基因NHX1的克隆及番茄的遗传转化
- 2009年
- 根据NCBI公布的大叶补血草NHX1基因序列设计特异性引物,经RT-PCR方法克隆得到大叶补血草液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因NHX1,构建植物融合表达载体pCAMBIA1301-NHX1,重组质粒通过农杆菌介导转化番茄,经PCR和RT-PCR鉴定,获得转基因番茄植株。本研究为大叶补血草耐盐基因NHX1的进一步功能分析和应用奠定了一定的理论基础。
- 宋晓丽祝建波周玲玲
- 关键词:大叶补血草番茄
- HARDY转录因子原核表达的研究被引量:4
- 2009年
- HARDY(HRD)是AP2/ERF-like家族转录因子,它的过量表达可以增强水稻的抗旱性、提高水稻的水分利用率。本研究从拟南芥中克隆了HRD转录因子基因,利用DNA重组技术,构建了HRD原核表达载体PET-HRD,并将PET-HRD重组质粒转化E.coli BL21(DE3),经lmmol/LIPTG诱导其蛋白质表达,获得了高表达量的分子量约为42kD的HRD融合蛋白。本研究结果为进一步制备HRD转录因子的抗体,并利用该抗体来分析和克隆不同物种的HRD基因奠定了基础。
- 赵红英祝建波王爱英沈海涛张煜星
- 关键词:HRD拟南芥转录因子原核表达
- 棉花CBF基因的克隆及其转基因烟草的抗寒性分析被引量:20
- 2011年
- 从中棉12(Gh12)、中棉36(Gh36)和海岛棉7124(Gb7124)品种中克隆并鉴定了棉花的CBF基因,该基因编码一个由184个氨基酸组成的蛋白CBF,该蛋白具有CBF转录因子典型的序列标签"PKRRAGRKKFQETRHP"和"FADSAW"。Southern杂交表明,CBF基因在3个棉花品种中均以基因家族的形式存在。围绕海岛棉7124的CBF基因(GbCBF1)开展的逆境表达谱分析表明,GbCBF1基因受低温、干旱、盐和ABA等多种逆境条件的诱导表达。将GbCBF1基因构建到由强启动子35S和弱启动子NOS这2种启动子控制的植物表达载体pCambia2301上并转化烟草NC89,经过筛选及PCR鉴定,共获得26株转基因烟草。对部分T1代植株进行的PCR和RT-PCR检测表明,GbCBF1基因可以在烟草中正常转录并遗传。在低温下,转基因烟草的电解质渗漏率普遍低于野生型烟草,而游离脯氨酸含量和可溶性糖含量均高于野生型烟草,说明转GbCBF1基因提高了烟草的耐寒性。
- 郭惠明李召春张晗信月芝程红梅
- 关键词:棉花转基因烟草CBF转录因子抗寒性
- 海岛棉DREB基因的克隆及植物表达载体的构建被引量:2
- 2010年
- 根据GenBank上公布的棉花GhDREB1基因序列设计特异性引物,从海岛棉中克隆了一个与DREB类基因同源的cDNA序列,命名为XHDREB。序列分析表明,该cDNA序列长度为651 bp,推测含有216个氨基酸,分子量为24.6 kDa,等电点为9.46。同源性分析表明,它与GhDREB1的氨基酸序列同源性为85.19%。所编码蛋白具备DREB1转录因子的特征:含有58个氨基酸组成的AP2 DNA结合域以及两个DREB1/CBF特征氨基酸序列PKKRAGRKKFRETR和DSAWR。然后将XHDREB基因连接到pCAMBIA2300-35SOCS质粒上,构建了植物表达载体。
- 张艳妮陈全家张桦郑鹏周丽容曲延英
- 关键词:抗逆DREB基因植物表达载体
- 陆地棉耐盐相关基因GhSAMS的克隆及表达被引量:7
- 2011年
- 为了挖掘棉花耐盐相关基因,根据陆地棉耐盐性抑制消减文库中的一个S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的同源EST设计引物,利用RACE结合RT-PCR技术克隆陆地棉S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的cDNA全长,命名为GhSAMS。该cDNA全长1576bp,ORF为1182bp,编码393个氨基酸的多肽。生物信息学分析表明GhSAMS蛋白与拟南芥、盐地碱蓬、水稻中该蛋白的相似性分别为91%、93%和93%。系统发育树结果显示GhSAMS与盐地碱蓬中该蛋白的亲缘关系最近。Real-time PCR分析结果表明,GhSAMS的表达受盐胁迫诱导,在盐敏感材料中诱导被推迟,而且,该基因表达水平在耐盐材料中9835中明显高于在盐敏感材料中S9612中。构建了原核表达载体pET28-GhSAMS,经IPTG诱导,实现了GhSAMS在大肠杆菌中的表达,为进一步开展GhSAMS的遗传转化工作奠定了有益基础。
- 周凯宋丽艳叶武威王俊娟王德龙樊保香
- 关键词:陆地棉盐胁迫原核表达