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转哺乳动物cyp2e1基因烟草植株再生及其分析被引量：2: 2012年; 哺乳动物肝细胞中cyp2e1基因所编码的蛋白CYP2E1在代谢异型有机物方面起着重要作用,转cyp2e1基因植物可以代谢多种小分子有机污染物;但cyp2e1基因在植物体内的表达调控和代谢机理尚不完全清楚。文中将含有cyp2e1基因的质粒pSLD50-6和对照gus基因的质粒pKH200转入根癌农杆菌GV3101,利用根癌农杆菌转基因技术将cyp2e1基因和对照gus基因成功转入烟草,分别获得了转cyp2e1和gus基因再生植株。选取PCR鉴定的再生植株进行荧光定量PCR(qRT-PCR)分析,结果表明:在转录水平上,转cyp2e1基因烟草中,乙醇处理后cyp2e1基因的表达明显下降,苯和甲苯处理后cyp2e1基因的表达量稍有下降;而丙酮、甲醛处理和缺氧条件下cyp2e1基因的表达有不同程度的升高。此外,苯处理后,转cyp2e1基因烟草中NADPH-P450氧化还原酶和细胞色素b5酶的基因活性显著提高,说明烟草中NADPH-P450氧化还原酶和细胞色素b5酶与CYP2E1酶的解毒过程有关,可能起到哺乳动物体内的NADPH-P450氧化还原酶和细胞色素b5的功能,参与CYP2E1酶催化过程的电子传递链。; 李佩菡向太和谢军冯婷陆文怡; 关键词：烟草 CYP2E1基因细胞色素B5

黄瓜多抗自交系NC-46转基因不定根的高频诱导及其cDNA文库的构建被引量：1: 2010年; 利用发根农杆菌K599(带有质粒pBIN-35S-GFP),以具有抗爪哇根结线虫和花生根结线虫等多种抗性基因的黄瓜自交系NC-46离体子叶为外植体,高效诱导出转基因不定根(诱导率达76.7%);并在此基础上成功构建了转基因不定根的cDNA文库。构建的cDNA文库重组率为98.3%,原始库容量达2.02×106cfu,其中基因的完整性比率为47.6%,Unigene比例为66.7%。选用转基因不定根构建根的cDNA文库,克服了实生苗难以获得大量均一状态根的缺陷;克服了实生苗根受到土壤根际微生物、线虫等对根生理状态的影响以及对提取RNA的污染问题;利用改良的SmartcDNA文库构建法,获得的文库克隆含有完整的5′端非翻译区的全长cDNA;此外,构建的文库由于利用改良的pUC19载体替代了λTripIEx2噬菌体载体,获得的克隆无需再将插入到噬菌体载体上的cDNA转染到质粒载体,可直接用于杂交和测序筛选,因此在基因克隆筛选时更加方便。; 孟莎莎向太和王琳; 关键词：黄瓜转基因毛状根 CDNA文库

一种利用黄瓜苗繁殖根结线虫的方法被引量：4: 2011年; 为建立繁殖根结线虫的新方法,利用黄瓜实生苗为宿主,在透明的玻璃瓶中成功繁殖了南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫,为有效分离根结线虫提供了一条新途径.该方法不仅丰富了繁殖根结线虫的宿主,而且便于随时观察线虫侵染根形成根结的动态过程,也避免了在繁殖过程可能造成线虫逃逸对周围土壤的污染问题.; 孟莎莎向太和程慢成; 关键词：黄瓜根结线虫繁殖

矮牵牛矮小突变体Pdrawfl的初步分析: 从矮牵牛QL01自交结实的后代中获得了一个自然突变体,植株矮小,尤其是花特别小,但种子大小与亲本未见差异,将该突变体命名为Petunia hybrida drawfl(简称:Pdrawfl)。将矮牵牛突变体Pdrawfl...; 向太和张婷张粒; 关键词：矮牵牛突变体; 文献传递

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杭州市科技发展计划项目(20091133B07)