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排序方式：

TLR4基因SNP检测及在中外鸡种中的群体变异分析被引量：5: 2010年; 以9个地方鸡种(北京油鸡、白耳鸡、溧阳鸡、河南斗鸡、泰和乌骨鸡、大骨鸡、狼山鸡、仙居鸡、茶花鸡)和3个引进品种(隐性白羽肉鸡、科宝鸡、来航蛋鸡)为素材,利用DNA直接测序技术对Toll样受体4(TLR4)蛋白基因(登陆号为AY064697)的全部外显子、部分内含子及5’调控区共4373bp的序列进行单核苷酸多态性检测,共检测到36个SNPs,其中19个SNPs位于编码区(cSNPs),12个集中于第三外显子的特定区域上(蛋白的TRR结构域);10个为错义突变,21个为新发现的SNPs。对集中于第三外显子上的12个SNP位点,在12个品种的688个个体进行了PCR-SBT检测,这些SNPs产生的不同基因型及等位基因在12个鸡品种间分布存在显著的差异,推测与该基因的功能存在相关。; 宋咏梅庞建建赵桂苹刘冉冉李鹏赵兴旺郑麦青文杰; 关键词：SNP

鸡TLR4基因表达水平与沙门氏菌感染关系的研究被引量：10: 2009年; 为了研究鸡TLR4(toll like receptor 4)基因表达在调控鸡沙门氏菌感染中的作用,80只3日龄SPF鸡按随机分为2组,处理组经口注射鸡白痢沙门氏菌悬液108CFU/mL 0.50 mL,对照组注射同剂量生理盐水。每个处理组分别在感染后1、3、7和14 d随机取8只鸡处死,迅速取脾脏样品用于RNA提取。采用SYBR GreenⅠ染料实时荧光定量PCR(QPCR),比较处理组和对照组TLR4基因mRNA相对表达量的变化。结果显示,在4个时间点,与对照组相比,处理组TLR4基因高表达,差异显著(P<0.05);尤其在感染后3和7 d,差异达到极显著水平(P<0.01)。结果表明,鸡沙门氏菌感染后,TLR4基因mRNA表达上调,TLR4基因在沙门氏菌感染中发挥重要作用。; 李鹏夏平安宋咏梅赵桂苹; 关键词：沙门氏菌荧光定量PCR

鸡MyD88-TIR的同源模建: 2011年; 髓样分化因子(MyD88)是Toll受体(TLR)信号通路中的一个关键接头分子,在传递信息和介导炎症反应中具有重要的作用。对鸡MyD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88)的TIR(Toll-interleukin1-resistance)区域进行同源建模,并评估其可用性,为进一步研究MyD88与TLR(Toll receptor)相互作用的原理奠定基础。通过结构域分析、模板相似性搜索和序列比对、初始建模、精修和动力学优化,立体化学结构和能量合理性评估,获得未知三维结构的鸡MyD88-TIR三维模型。结果表明,鸡MyD88包含DEATH和TIR两个结构域,所模拟的MyD88-TIR三维模型二面角构象和氨基酸能量分布以及主侧链立体化学特性合理。; 赵兴旺刘冉冉郑麦青文杰陈继兰赵桂苹; 关键词：同源建模

鸡髓样分化因子88的原核表达及单克隆抗体制备被引量：2: 2011年; 目的:克隆、表达、纯化鸡髓样分化因子88(MyD88),制备其单克隆抗体。方法:从脾脏cDNA中扩增857bp的MyD88基因片段,插入pMAL-c5X表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE分析MBP(麦芽糖结合蛋白)-MyD88重组融合蛋白的表达,切胶纯化目的蛋白;免疫BALB/c小鼠,制备针对MyD88的单克隆抗体,Western印迹检测抗体特异性,制备腹水并进行抗体亚型鉴定和效价测定。结果:构建了鸡MyD88原核表达载体pMAL-MyD88,并在大肠杆菌中获得高表达,目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在;建立了3株抗鸡MyD88单克隆抗体细胞株,制备了腹水,亚型分别为IgG1、IgG1和IgG2a,轻链均为κ,腹水抗体的效价均为1∶2×105。结论:在原核表达系统中表达、纯化了重组鸡MyD88,制备了针对鸡MyD88的单克隆抗体,为后续的MyD88定量和功能研究奠定了基础。; 赵兴旺刘冉冉郑麦青文杰陈继兰赵桂苹; 关键词：原核表达单克隆抗体

鸡Toll样受体4信号通路及在鸡沙门菌抗病研究中的应用进展被引量：3: 2009年; Toll样受体作为一种模式识别受体,在先天免疫中通过识别病原体相关的分子模式,诱导炎症因子和细胞因子产生,在机体对抗感染过程中发挥重要作用。Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)是Toll样受体家族中识别细菌脂多糖最重要的模式受体。研究表明,TLR4及其信号通路的基因变异和表达调控与沙门菌的抗性有关。本文综述了TLR4/MyD88/NF-кB信号通路及其在鸡沙门菌抗病研究中的应用,并对其进行了展望。; 李鹏夏平安宋咏梅赵桂苹; 关键词：沙门菌

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国家自然科学基金(30871776)