山东省医药卫生科技发展计划项目(2011QZ024)
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
- 相关作者：成敏张晓芸崔晓栋李鑫刘建华更多>>
- 相关机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CaCCs通道钙离子依赖性机制的研究进展被引量：1
- 2015年
- 钙激活氯离子通道(Ca CCs)是一种广泛存在的氯离子通道,参与众多生理功能,如:上皮细胞的离子分泌、嗅觉传导以及平滑肌收缩等。由于通常情况下很难将Ca CCs介导的电流和钙离子依赖性阳离子流以及非钙离子依赖性氯离子流分开,因此其钙离子依赖性机制的研究远远滞后于其他离子通道。本文综述了最新报道的Ca CCs分子基础跨膜蛋白TMEM16A的发现和确立、结构特点、钙离子结合位点、其电流发生机制,及其相关生理作用以及病理和药理功能的热点问题,并展望该领域的研究发展趋势。
- 刘建华张晓芸李鑫崔晓栋成敏
- 尼氟酸对晚期内皮祖细胞生物学特性的影响
- 2015年
- 目的:探讨ClCa通道抑制剂--尼氟酸(Niflumic,NFA)对大鼠骨髓来源的晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物学特性的影响。方法:密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2完全培养液进行体外培养,以第三代或第四代的晚期EPCs作为靶细胞,应用RT-PCR检测晚期EPCs上是否存在Cl Ca通道标志基因TMEM16A和Cl Ca4的表达。采用CCK-8法、Ed U标记法、划痕实验、Boyden小室实验及Matrigel法分别检测10μmol/L NFA对细胞增殖、迁移及体外血管形成能力的影响;应用荧光定量PCR及流式细胞术检测内皮分化标志v WF和CD31基因及蛋白的表达。结果:晚期EPCs表达ClCa通道标志基因TMEM16A和ClCa4;NFA抑制晚期EPCs的迁移功能(P<0.05);但对EPCs的增殖、分化及成血管能力有促进作用。NFA上调了晚期EPCs的CD31和v WF基因和蛋白表达。结论:NFA能促进EPCs的增殖、分化及成血管能力,抑制EPCs的迁移能力。NFA对EPCs生物学特性的这类影响将为心血管疾病治疗药物选择方面提供一定的参考依据。
- 刘建华张晓芸崔晓栋王钢成敏
- 关键词：内皮祖细胞
- 流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响被引量：8
- 2014年
- 目的研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外及体内生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β-半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RT-PCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。结果 1.2 Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力(P<0.01),上调VEGF的基因表达,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡(P<0.01);移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复,减缓内膜的增生。结论流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力,这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。
- 成敏尹青令崔晓栋张晓芸李鑫李宏官秀梅王建英
- 关键词：剪切应力内皮祖细胞细胞黏附再内皮化
- 吲哚美辛对受损颈动脉再内皮化的作用及机制
- 2014年
- 目的研究吲哚美辛对受损颈动脉再内皮化的作用及机制。方法在SD大鼠体内通过球囊法制备颈动脉损伤模型,腹腔注射吲哚美辛,观察其对血管内皮修复的影响;密度梯度离心法获得大鼠单核细胞,应用EGM-2培养基体外诱导培养获得内皮祖细胞(EPCs)。采用不同浓度的吲哚美辛处理晚期EPCs24 h后,MTT法检测细胞的增殖活性,细胞差异贴壁法检测EPCs的粘附能力,改良的Boyden小室检测EPCs的迁移能力,Matrigel基质胶检测EPCs的成血管能力。结果吲哚美辛可明显促进损伤血管内皮的修复,其机制可能与吲哚美辛增强EPCs的增殖、粘附、迁移及成血管能力有关。结论吲哚美辛促进了损伤血管内皮的再内皮化进程。
- 李鑫张晓芸金成文成敏
- 关键词：内皮祖细胞吲哚美辛
- 内向整流钾通道阻断剂对内皮祖细胞功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的：研究内向整流钾通道阻断剂氯化钡（Ba Cl2）和氯化铯（Cs Cl）对内皮祖细胞（EPCs）功能的影响。方法：利用密度梯度离心法体外分离大鼠骨髓单核细胞,并进行体外诱导培养。待细胞培养至3-5代时将细胞消化并等密度接种于六孔板中,待细胞融合至80%时用含2%胎牛血清的M199对其进行同步化处理,然后分组进行干预。本实验主要分两组：1Ba Cl2（100μmol/L）及其无Ba Cl2的台氏液组;2Cs Cl（1 mmol/L）及其正常对照组。依照上述分组加入阻断剂干预12 h后,检测迁移、粘附功能及基质细胞衍生因子（SDF-1）、前列环素（PGI2）基因表达的变化。此外,收集各组处理3 d后的细胞上清,用ELISA试剂盒检测上清中SDF-1的含量。并进一步通过信号通路阻断剂预先干预内皮祖细胞（EPCs）,然后重复上述处理,并用荧光定量RT-PCR检测SDF-1基因表达的变化来推测其作用机制。结果：与对照组相比,用Ba Cl2、Cs Cl处理后的EPCs迁移、粘附能力显著增强,SDF-1、PGI2基因表达量增加;ELISA检测结果显示,SDF-1分泌量较对照组明显增加。Ba2＋、Cs＋促进SDF-1分泌与e NOS信号通路有关;促进PGI2的分泌与P38信号通路相关。结论：Ba2＋、Cs＋具有促进EPCs迁移、粘附和分泌功能;SDF-1分泌增加的机制可能是通过e NOS信号通路来完成的,而PGI2与P38信号通路有关联。
- 李文凭崔晓栋侯宁宁张晓芸刘建华张静成敏
- 关键词：内皮祖细胞内向整流钾通道分泌
