教育部留学回国人员科研启动基金(1101)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 相关作者：陈静宏杨占田曹峻岭马天有王伟更多>>
- 相关机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基质金属蛋白酶与大骨节病的相关性研究被引量：4
- 2014年
- 目的：观察基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases，MMPs）在大骨节病（Kashin-Beck disease， KBD）儿童软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠软骨中的表达，以及T-2毒素对软骨细胞MMP-13启动子的激活作用，探讨MMPs与KBD发病的关系。方法以5例尸检KBD儿童（KBD组）和5例因车祸死亡或畸形手术的正常儿童（对照组）手指节软骨为研究对象，采用免疫组织化学染色的方法，检测软骨中MMP-1和MMP-13的表达。雄性健康SD大鼠32只，按体质量采用随机数字表法分为常规饲料组、低硒饲料组，每组各16只。常规饲料硒含量为101.500μg/kg，低硒饲料硒含量为1.118μg/kg。大鼠低硒动物模型建造成功后，常规饲料组分为常规组和常规＋T-2组，低硒饲料组分为低硒组和低硒＋T-2组，每组8只。 T-2毒素（100μg·kg-1·d-1）灌胃饲养，30 d后处死大鼠，取左侧膝关节，用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞MMP-1和MMP-13的表达水平。体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞，分成空载体组、MMP-13启动子载体组、MMP-13启动子载体＋T-2毒素20μg/L组、MMP-13启动子载体＋T-2毒素40μg/L组，将-1602/＋20-MMP13-Luc启动子重组荧光素酶报导质粒以及空载体瞬时转染C28/I2细胞，24 h后，加入20μg/L和40μg/L T-2毒素，继续培养24 h，用荧光素酶报告基因检测T-2毒素对MMP-13启动子的作用。结果 KBD组儿童关节软骨表层和中层MMP-1表达阳性率[（29.73±10.12）%、（28.27±0.91）%]均高于对照组[（2.47±0.11）%、（0.00±0.00）%，P均〈0.05]，KBD组儿童关节软骨表层和中层 MMP-13表达阳性率[（13.21±4.32）%、（41.85±6.32）%]明显高于对照组[（5.72±0.31）%、（0.00±0.00）%，P均〈0.05]。低硒＋T-2毒素组大鼠关节软骨MMP-13在表层和中层表达水平[（13.21±4.32）%、61.85±8.68）%]明显高于常规组和低硒组[（2.43±0.22）%、（5.89±0.69）%，（3.03±0.29）
- 陈静宏曹峻岭王治伦马天有王梦莹何颖杨占田陈晨
- 关键词：大骨节病基质金属蛋白酶T-2毒素硒
- 大骨节病儿童软骨白细胞介素-1β、白细胞介素-6及肿瘤坏死因子-α的表达被引量：6
- 2014年
- 目的：通过检测大骨节病儿童软骨细胞中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，探讨细胞因子与大骨节病（KBD）之间的关系。方法5例KBD儿童（KBD组）手指软骨组织来自西安交通大学医学院地方病研究所保存的大骨节病患儿尸检样本；5例正常儿童（对照组）手指软骨组织来自陕西省西安市非KBD病区，其中3例来自车祸死亡儿童，2例为先天6指畸形手术标本。采用免疫组织化学染色的方法，分别检测软骨中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达；并将关节软骨细胞分层（表层、中层、深层），分析软骨各层中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达。结果 KBD组关节软骨表层、中层、深层IL-1β阳性软骨细胞密度（63.50±7.19、54.75±5.50、66.20±9.91）均高于对照组（5.75±1.26、0.00±0.00、0.00±0.00，P均〈0.05）；KBD组关节软骨表层IL-6阳性软骨细胞密度（55.25±6.24）高于对照组（0.00±0.00，P〈0.05）；KBD组关节软骨表层、中层、深层TNF-α阳性软骨细胞密度（33.25±6.50、3.75±0.96、29.80±1.92）均高于对照组（3.74±0.82、0.00±0.00、0.00±0.00，P均〈0.05）。结论 KBD儿童软骨细胞中IL-1β，IL-6和TNF-α表达显著升高，细胞因子的过量表达可能参与KBD软骨细胞死亡与软骨破坏过程。
- 陈晨陈静宏曹峻岭王伟张增铁杨占田于伯泉马天有
- 关键词：大骨节病软骨白细胞介素-1Β白细胞介素-6肿瘤坏死因子-Α
- 核心蛋白聚糖表达减少与大骨节病软骨坏死的相关性研究被引量：2
- 2016年
- 目的 观察大骨节病（KBD）儿童手指关节软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨核心蛋白聚糖（Decorin）的表达,以及T-2毒素和硒对培养软骨细胞Decorin表达的影响,分析Decorin与KBD软骨坏死的相关性.方法 以5例尸检KBD儿童（KBD组）和5例因车祸死亡或畸形手术儿童（对照组）手指关节软骨为研究对象,采用免疫组织化学染色法检测儿童手指关节软骨Decorin的表达情况.选取雄性健康SD大鼠32只,按体质量采用随机数字表法分为常规组、低硒组,每组16只,常规组饲料硒含量为101.5 μg/kg,低硒组饲料硒含量为1.1 μg/kg,30 d后常规组又分为常规组和常规＋T-2组,低硒组分为低硒组和低硒＋T-2组,每组8只,T-2毒素（100 μg/kg,每日2次）采取灌胃饲养,30 d后处死大鼠,取左侧膝关节,用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞Decorin表达.体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞,加入不同浓度的T-2毒素（0、1、6、12 μg/L）和硒（0、0.1 rmg/L）作用72 h,采用实时荧光定量PCR法检测Decorin mRNA表达.结果 KBD组儿童手指关节软骨表、中、深层Decorin阳性软骨细胞密度[（1.75土0.95）％、（8.92±3.45）％、（0.00±0.00）％]均低于对照组[（21.27±3.44）％、（78.70±8.82）％、（93.12±6.99）％,t=11.76、12.87、31.09,P均＜0.05].低硒＋T-2组大鼠膝关节软骨Decorin表达阳性率[（19.33±2.82）％]明显低于常规组、低硒组及常规＋T-2组[（62.67±5.33）％、（53.17±2.41）％、（34.50±2.64）％,P均＜0.05].在硒为0 mg/L时,6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（0.38±0.01、0.26±0.03）明显低于0μg/L T-2毒素（对照）组（1.00±0.00,P均＜0.05）.在硒为0.1 mg/L时,0、6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（1.53±0.06、1.92±0.04、2.50±0.01）高于相同剂量单纯T-2毒素组（1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00,P均＜0.05）.结论 KBD儿童和低硒�
- 王梦莹陈静宏刘慧中王伟王治伦杨占田杨浩杰薛森海
- 关键词：大骨节病核心蛋白聚糖T-2毒素
- T-2毒素和硒对人软骨蛋白聚糖酶的影响被引量：3
- 2012年
- 目的 研究T-2毒素和硒对人软骨蛋白聚糖代谢的影响.方法 体外培养胎儿软骨细胞,根据施加的实验措施将其分为8组,对照组（T-2毒素：0 mg/L,硒：0 mg/L）、1、10、20μg/L T-2毒素组、加硒（0.1mg/L）组、1、10、20 μg/L T-2毒素加硒（0.1 mg/L）组,每组设3个平行样.在T-2毒素和（或）硒作用5d后,采用免疫蛋白印迹法检测软骨细胞蛋白聚糖的蛋白表达水平,用RT-PCR方法检测软骨细胞蛋白聚糖酶-1和蛋白聚糖酶-2的mRNA表达水平.结果 硒、T-2毒素对蛋白聚糖的蛋白表达量、蛋白聚糖酶-1 mRNA表达水平、蛋白聚糖酶-2的mRNA表达水平有影响（F=0.294、27.71,107.45、362.25,34.68、22.26,P均＜0.05）,硒与T-2毒素存在交互作用（F=79.99、230.76、388.33,P均＜0.05）,表现为拮抗作用.在硒水平为0 mg/L时,1、10、20 μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖的蛋白表达（0.278±0.015、0.235±0.029、0.195±0.028）均低于0 mg/L的T-2毒素组（0.472±0.0358,P均＜0.05）；在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20 μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖的蛋白表达（0.399±0.028、0.299±0.020、0.263±0.019）均高于0 mg/L的T-2毒素组（0.197±0.018,P均＜0.05）.在T-2毒素分别为1、10、20μg/L时,0.1 mg/L硒组的蛋白聚糖的蛋白表达均高于0 mg/L硒组（P均＜ 0.05）.在硒水平为0 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖酶-1 mRNA表达（0.535±0.033、1.071±0.043、1.454±0.058）均高于0 mg/L的T-2毒素组（0.481±0.023,P均＜0.05）；在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖酶-1 mRNA表达（1.057±0.048、0.555±0.036、0.902±0.045）均高于0 mg/L的T-2毒素组（0.346±0.020,P均＜0.05）.在硒水平为0 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖酶-2 mRNA表达（0.596±0.038、0.656±0.033、0.949±0.049）均高于0 mg/L的T-2毒素组（0.387±0.020,P均＜0.05）；在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖酶-2 mRNA表达（0.600±0
- 于伯泉曹峻岭陈静宏师钟丽王伟杨占田马天有王世捷
- 关键词：硒软骨细胞大骨节病T-2毒素
