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草地早熟禾转录因子PpNAC的克隆和表达载体的构建: 利用RT-PCR和RACE技术获得了草地早熟禾转录因子PpNAC的cDNA序列。序列分析表明,PpNAC核苷酸序列长1147bp,其开放阅读框为837bp,编码278个氨基酸,含有一个典型的NAC结构域,具有NAC转录因...; 李伟韩蕾巨关升钱永强孙振元; 关键词：草地早熟禾转录因子 RACE 基因克隆植物表达载体; 文献传递

应用SMARTer cDNA合成技术扩增落地生根叶片的总RNA被引量：1: 2011年; 以落地生根(Kalanchoe daigremontiana)未长芽和长芽的叶片为材料,提取落地生根的总RNA,采用SMAR-Ter cDNA合成技术合成cDNA第1链,优化扩增第2链,通过设置梯度PCR扩增循环数,电泳分析后鉴定cDNA质量。结果表明:未长芽和长芽的材料各1μg总RNA分别成功扩增质量较高的双链cDNA。此方法的应用解决了研究材料有限的问题,可由微量的总RNA扩增出足够多的高质量双链cDNA,为进一步从基因水平研究落地生根奠定基础。; 钟天秀曾会明; 关键词：RNA CDNA合成

植物NAC转录因子的种类、特征及功能被引量：46: 2011年; 综述了NAC转录因子的发现及其家族成员、结构特点和生物学功能.NAC类蛋白是近年来发现的一类植物特有、数量众多的转录因子家族,其成员广泛分布于陆生植物中.NAC家族成员的N端具有一个保守的约150个氨基酸组成的NAC结构域,含有A、B、C、D、E 5个亚结构域,C端具有一个高度变异的转录激活区.分析表明,NAC蛋白结构与其功能密切相关.NAC转录因子具有诸多方面的功能,如参与植物次生生长,在细胞分裂和植株衰老中发挥作用,参与激素调控和信号转导,参与矿质元素营养和农作物品质改良等.同时,NACs还参与生物胁迫中植物的防御反应以及在非生物逆境中发挥作用.目前对NAC基因的研究主要集中于模式植物拟南芥和水稻,对于NAC蛋白涉及的调控途径及其组成因子知之甚少,因此NAC基因的功能还有待深入研究;同时,利用基因工程手段导入或改良关键的NAC转录因子,使作物综合品质的提高已成为可能.; 李伟韩蕾钱永强孙振元; 关键词：转录因子 NAC 结构域生物学功能

植物ERFs类转录因子在逆境胁迫中的作用被引量：5: 2011年; Ethylene responsive factors(ERFs)是植物中特有的一类重要的转录因子。ERFs转录因子含有一段高度保守的DNA结合区域,被称之为ERF区域。ERFs类转录因子可以直接与GCC-box等启动子结合,从而转录激活功能基因的表达,调节植株的抗性应答。它们参与植物的生长发育、代谢、生物胁迫和非生物胁迫相关的应答过程,并且在水杨酸和脱落酸和茉莉酸信号转导途径中发挥一定的作用,调控植物多个信号转导途径。现针对ERFs类转录因子在植物逆境胁迫中的研究进展进行讨论。; 李聪郭天麒梁小红王英博韩烈保; 关键词：植物 ERF转录因子逆境应答

非生物逆境胁迫相关NAC转录因子的生物信息学分析被引量：9: 2012年; 通过生物信息学手段,对22种NAC蛋白(14种非生物逆境胁迫相关NAC蛋白、8种涉及不同生物学功能的NAC蛋白)进行氨基酸序列比对和系统发生树构建,对14种非生物逆境胁迫相关NAC蛋白氨基酸组成、理化性质、亲/疏水性、保守结构域、亚细胞定位、二级结构及三级结构等进行了分析、预测。结果显示,22个NAC蛋白中,非生物逆境相关的NAC蛋白聚成一类,其余NAC蛋白聚为另一类;非生物逆境胁迫相关的NAC蛋白序列分析显示,N-端具有A、B、C、D、E 5个保守的亚结构域,共同组成NAC结构域,C-端含有多个保守的酸性氨基酸位点,具有转录激活功能,同时蛋白中含有多个丝氨酸(S)、苏氨酸(T)和酪氨酸(Y)磷酸化位点;非生物逆境胁迫相关NAC蛋白主要亲水区域位于A、C、D亚域,大多定位于细胞核,个别定位于细胞质或线粒体,二级结构则以α-螺旋和β-折叠片为主;拟南芥RD26和ANAC三级结构上的一致性暗示了功能上的相似。; 李伟韩蕾钱永强巨关升孙振元; 关键词：非生物逆境 NAC转录因子生物信息学

NaCl、PEG双重胁迫下转DREB1A基因多年生黑麦草T1代萌发期抗性研究被引量：3: 2011年; 对转DREB1A基因多年生黑麦草(Lolium perenne)T1代种子和多年生黑麦草非转化植株F1代种子分别用1.5%NaCl溶液、15%PEG溶液、1.5%NaCl+15%PEG进行处理。测定了相对发芽势、相对发芽率、胚芽长、胚根长、细胞膜透性、相对含水量、叶绿素含量、萎蔫幼苗数、存活率等指标,研究了供试材料对单独胁迫和双重胁迫的抗性,并进行对比。相对发芽势、相对发芽率、胚芽长、细胞膜透性、叶绿素含量等指标的测定结果显示,DREB1A对三种胁迫的抗性强度依次为NaCl>PEG>NaCl+PEG。叶片相对含水量、存活率等指标的测定结果表明DREB1A对三种胁迫的抗性强度依次为PEG>NaCl>NaCl+PEG。萎蔫幼苗株数的测定结果显示,DREB1A对三种胁迫的抗性强度依次为NaCl>NaCl+PEG>PEG。胚根长在三种胁迫下的响应差异不显著。DREB1A对NaCl、PEG单独胁迫和NaCl+PEG双重胁迫均具有一定程度抗性,比非转化植株的抗性明显增强。转DREB1A基因多年生黑麦草T1代种子可以作为干旱、盐碱地区改良和利用的植物资源。; 包永霞满达韩烈保; 关键词：多年生黑麦草 DREB1A基因萌发期抗性

麦冬OjRCA基因植物表达载体的构建被引量：1: 2011年; Rubisco活化酶(RCA)对光合关键酶Rubisco具有重要的调节作用。以植物表达载体pBI121为基础,设计分别带有酶切位点SmaⅠ和SacⅠ的一对特异引物,以麦冬叶片总RNA反转录得到的第一条cDNA链为模板,扩增得到目的基因OjRCA。用SmaⅠ和SacⅠ双酶切目的基因及表达载体pBI121,回收后利用T4 DNA连接酶连接,获得植物表达载体pBI121-OjRCA。通过冻融法将所获得的植物表达载体导入根癌农杆菌EHA105菌株中,为该基因的功能鉴定及通过农杆菌介导法将OjRCA基因导入植物提高相关抗性提供参考。; 郭天麒李聪王英博韩烈保; 关键词：麦冬植物表达载体

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国家高技术研究发展计划(2009AA10Z109)