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国家自然科学基金(31100664)

作品数：16 被引量：71H指数：3
相关作者：邵红伟黄树林沈晗吴凤麟薄华本更多>>
相关机构：广东药学院南方医科大学广东药科大学更多>>
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文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 16篇医药卫生

主题

  • 11篇细胞
  • 4篇抗原
  • 3篇特异
  • 3篇特异性
  • 3篇分子
  • 3篇TCR
  • 3篇T细胞
  • 2篇受体
  • 2篇肿瘤
  • 2篇转染
  • 2篇小鼠
  • 2篇淋巴
  • 2篇淋巴细胞
  • 2篇抗原肽
  • 2篇活化
  • 2篇分化
  • 2篇干细胞
  • 2篇肝癌
  • 2篇T淋巴细胞
  • 2篇VΒ

机构

  • 14篇广东药学院
  • 3篇南方医科大学
  • 2篇广东药科大学
  • 1篇华南师范大学
  • 1篇暨南大学附属...
  • 1篇东莞市人民医...

作者

  • 14篇邵红伟
  • 13篇黄树林
  • 8篇沈晗
  • 6篇吴凤麟
  • 3篇何免
  • 3篇薄华本
  • 3篇张文峰
  • 2篇聂建云
  • 2篇袁茵
  • 2篇林燕梅
  • 2篇肖兰凤
  • 2篇陈璇
  • 2篇向静
  • 2篇徐畅
  • 1篇邵宏伟
  • 1篇陈骁
  • 1篇贾筠
  • 1篇陈丹亮
  • 1篇区裕升
  • 1篇鲁欣

传媒

  • 4篇中国免疫学杂...
  • 2篇广东药学院学...
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  • 1篇中国中药杂志
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  • 1篇广东医学
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  • 1篇中药材
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 5篇2014
  • 5篇2013
  • 4篇2012
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
建立一种survivin抗原肽诱导T淋巴细胞优势取用TCR Vβ基因的方法
2013年
目的:探讨survivin抗原肽体外诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC)后T淋巴细胞活化情况及TCRVβ表达谱变化。方法:分离健康人PBMC经rhIL-4、rhGM-CSF诱导DCs,将成熟DCs分为阴性组(不负载肽)、未洗脱负载组(负载survivin肽)、洗脱负载组(经酸液洗脱并多聚甲醛固定后负载survivin肽),分别与自体淋巴细胞共培养诱导抗原特异性T淋巴细胞。分别于24小时、48小时、96小时和7天以Elisa法检测诱导后T淋巴细胞中IFN-γ的分泌,并于第7天通过流式细胞仪分析TCRVβ表达谱。结果:随着时间延长两实验组IFN-γ的分泌比阴性组显著增高,且洗脱负载组增加更为显著。流式细胞仪分析结果显示洗脱负载组相比于阴性组及未洗脱负载组引起TCR Vβ表达谱的改变更为明显,其中TCR亚家族Vβ7.2、Vβ12、Vβ14、Vβ16、Vβ20、Vβ22最为显著。结论:DCs经酸液洗脱表面多肽并固定的方法更能有效地诱导TCRVβ亚家族优势取用。
林燕梅沈晗邵红伟吴凤麟黄树林肖兰凤
关键词：SURVIVINTCR
嵌合型TCR分子的表达与组装效率分析
2016年
目的通过对外源TCR分子结构域的定向改造,对嵌合型TCR双链分子的表达与组装情况进行研究,探讨其对TCR基因修饰T细胞(TCR-T)内外源TCR分子与内源TCR分子错配减少的贡献,为改善TCR基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定基础。方法将结构域未改造的野生型TCR分子、恒定区结构域经过改造的嵌合TCR(chim-TCR)分子及杂合TCR分子转染7402细胞,通过报告基因的表达分析TCR分子的表达情况,利用荧光共振能量转移(FRET)技术计算不同的TCR分子组合在细胞中的组装效率。结果 TCR分子经过结构域定向改造后,能够在细胞内有效地表达和组装。荧光共振能量转移(FRET)分析表明嵌合型TCR与野生型TCR分子之间形成的杂合分子FRET值明显小于嵌合型或野生型自身配对的FRET值。结论结构域定向改造的嵌合型TCRα、β链与野生型α、β双链能有效得到表达及组装,并且嵌合型TCRα、β链与野生型α、β链组装配对的效率显著降低,这为改善基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定了基础。
苏畅刘婷黄帼蓉陈楚如向静徐畅张文峰沈晗邵红伟
当归补血汤调控骨髓造血机理及对造血微环境的影响被引量：39
2013年
目的探讨当归补血汤调控骨髓造血的机理。方法 50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外其他组小鼠连续腹腔注射多柔比星4 mg·kg^(-1)·d^(-1),共3 d,正常组给予同等体积的生理盐水。注射多柔比星3 d后,当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射补血汤5、15、25 g·kg^(-1)·d^(-1),共7 d,正常组和模型组给予同等体积的生理盐水。给药结束制备骨髓单细胞悬液,体外培养观察骨髓基质细胞生长状态,流式细胞仪检测骨髓细胞增殖和黏附情况。结果当归补血汤组骨髓基质细胞生长状态好于正常组和模型组,骨髓细胞之间的聚集明显。模型组聚集细胞数占总细胞比例为(4.00±1.10)%,低于正常组[(3.07±2.35)%],但无显著差异(P>0.05)。当归补血汤低、中、高剂量组聚集细胞数目占总细胞数比例分别为(5.40±2.91)%、(7.36±2.32)%和(9.27±3.35)%,均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。正常组G2期细胞比例高于其他四组(P<0.05),当归补血汤各剂量组G2/M期细胞比例与模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论当归补血汤可能通过改善基质细胞的状态、增强骨髓细胞之间的黏附来改善骨髓造血微环境。
薄华本陈启助沈晗吴凤麟邵宏伟黄树林
关键词：当归补血汤骨髓造血干细胞细胞黏附造血微环境
Calcein-AM荧光扫描测定细胞毒方法的建立被引量：1
2014年
目的：建立和优化基于钙黄绿素-AM（Calcein-AM）荧光扫描的细胞毒测定方法。方法：首先使用Calcein-AM染色靶细胞,扫描检测Calcein-AM荧光值,确定Calcein-AM最佳激发波长和发射波长;然后优化Calcein-AM染色的浓度和时间;最后以效靶比为30∶1～1∶1,共孵育时间为4 h,荧光扫描测定靶细胞裂解的百分率。结果：荧光染料Calcein-AM能有效标记靶细胞,最佳激发波长和发射波长为485 nm和515 nm;Calcein-AM对细胞毒性低,不影响细胞活性;4 h内的自发释放率低于15%;CIK（Cytokine induced killer）效应细胞与靶细胞共孵育4 h的细胞毒效应随效靶比增加而升高。结论：建立和优化了Calcein-AM荧光染料标记靶细胞检测细胞毒效应的方法,该方法可避免放射性试剂的应用,对细胞毒性低,准确性高。
陶嫦立丁哲纯郭雯静吴凤麟邵红伟黄树林
关键词：细胞毒
甘草水提物中miRNA对人免疫细胞基因表达的影响被引量：19
2017年
微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码小分子RNA,其调控基因表达、影响细胞活性的功能已为人们所重视。近年来miRNA的跨界调控成为新的研究方向,为人们更全面地认识和了解miRNA的功能提供了新的视角。植物miRNA由于通常经过了甲基化修饰,因此较为稳定,不易降解。前期研究表明,甘草干燥药材的水煎剂中存在着丰富的小分子RNA,这为了解甘草的作用机制提供了新的思路。在本研究中,利用从甘草水煎剂中提取的小分子RNA以及合成的miRNA模拟物(mimic)作用于分离自健康人的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),然后利用RT-PCR对其模式识别受体(PRR)基因以及部分转录因子、信号分子和细胞因子的基因表达变化进行了分析。结果表明甘草miRNA对人免疫细胞的基因表达具有明显的调节作用,能够显著抑制T细胞分化相关基因的表达,以及炎症和凋亡相关基因的表达。这为进一步更全面地了解甘草的作用机制以及中药新药的研制带来了新的思路。
向静黄洁嫦徐畅何免徐鹏程张丹张文峰沈晗邵红伟
关键词：小分子RNA基因表达
肿瘤患者胸/腹水和外周血中TCR Vβ亚家族表达及调节性T细胞亚群的研究被引量：4
2012年
目的:探讨肿瘤患者胸/腹水中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)和外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族的表达变化情况、CD4/CD8细胞比例变化和Treg细胞的分布情况,分析肿瘤患者的免疫状态。方法:分离11例肿瘤患者胸/腹水和外周血以及4例健康人外周血的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD3、CD4、CD8、CD25、CD127的表达情况,统计分析T细胞中Vβ24个亚家族、Treg细胞的特点。结果:TCR Vβ亚家族的表达在肿瘤患者胸/腹水TIL中与血液淋巴细胞中存在着显著差异,其中肺癌患者(4/5)TIL中TCR Vβ8,结肠癌患者(3/4)TIL中TCR Vβ2等亚家族显著高表达;11例肿瘤患者胸/腹水样本中Treg的比例均比外周血高(P<0.05),其中5例肺癌患者胸腹水中CD8+T细胞比例降低。结论:肿瘤患者胸/腹水中的淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达与外周血存在差异,表明肿瘤患者体内淋巴细胞发生了明显的优势取用和定向趋化。此外肿瘤微环境可能影响了TIL中CD4+细胞的分化导致胸腹水中Treg细胞的比例升高,同时伴随着CD8+T比例的下降,并可能因此影响到TIL中TCR Vβ亚家族的优势取用情况,且导致免疫耐受。
区裕升邵红伟吴凤麟黄树林肖兰凤
关键词：肿瘤调节性T细胞
TCRαβ分子识别抗原肽-MHC复合物的争议问题探讨被引量：1
2013年
T细胞抗原受体（TCR）是T细胞表面的特征性标志分子，其与CD3分子组成的TCR．CD3复合体，是进行抗原识别，发挥细胞免疫重要功能的基础。一般认为．TCR必须识别抗原肽一MHC分子复合物才能活化T细胞，
沈晗邵红伟黄树林
关键词：分子识别抗原肽T细胞抗原受体活化T细胞标志分子
稳定表达人CCL17基因的肝癌细胞系的建立及CCL17活化T淋巴细胞功能的初步鉴定
2012年
目的建立稳定表达人CCL17基因的肝癌细胞系并初步验证CCL17活化T淋巴细胞的抗肿瘤功能。方法分离肝癌患者腹腔液单个核细胞及淋巴细胞,提取单个核细胞总RNA,RT-PCR扩增CCL17基因,经克隆测序后将CCL17插入真核表达载体pCDNA3.1(-);将真核表达质粒转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,利用G418筛选抗性单克隆细胞株,Western blot检测细胞培养上清中CCL17的表达水平;用含CCL17的培养上清液刺激腹腔液来源淋巴细胞后,再与BEL-7402细胞共孵育,利用Annexin V/PI凋亡检测试剂盒检测肿瘤细胞凋亡率,倒置相差显微镜观察肿瘤细胞形态学改变。结果成功克隆出CCL17基因全长序列,并构建了真核表达质粒pCDNA3.1(-)-CCL17;质粒转染BEL-7402细胞后经G418筛选获得5个抗性单克隆细胞株,Western blot结果显示5株细胞培养上清液中均有CCL17表达,其中克隆株F9、F11和G8表达量较高;与对照组比较,含CCL17培养上清液刺激后的腹腔液淋巴细胞,能诱导BEL-7402细胞发生显著凋亡样改变。结论成功构建了稳定表达人CCL17基因的肝癌细胞系,并初步证实含CCL17的细胞培养上清液有活化T淋巴细胞,促进杀伤肿瘤的作用。
沈晗聂建云邵红伟黄树林
关键词：肝癌细胞系稳定转染T淋巴细胞
葛花提取物对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用被引量：1
2014年
目的:阐明葛花对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用及作用机制。方法:结扎小鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型。实验分为生理盐水组,复方丹参组,葛花提取物低、中、高剂量组共5组。通过心肌梗死面积和心肌酶的变化来评价保护效果,通过检测血清中SOD、MDA的含量和心肌中β-ARK1、eNOS基因的表达情况来阐明其作用机制。结果:与生理盐水组比较,葛花提取物能够减少心肌梗死面积(P<0.05),降低血清中心肌酶的含量(P<0.05),同时能够升高血清中SOD的含量(P<0.05),并能降低血清中MDA的含量(P<0.05)和心肌中β-ARK1的表达(P<0.05)。结论:葛花提取物通过升高SOD的含量和降低心肌中βARK1的表达来保护急性心肌梗死心肌。
薄华本郑迪伟钱佳碧
关键词：葛花急性心肌梗死心肌
一种基于TIL的肿瘤相关抗原特异性T细胞的筛选方法
2014年
Wolfl 等[1]的研究建立了一种以 CD137为表面标记，从人 CD8＋T 细胞中快速鉴定和分离抗原特异性 T 细胞的方法。由于 CD137分子表达于活化的 CD4^＋和 CD8^＋T 细胞表面[2]，其表达上调依赖于 T 细胞经抗原刺激后活化，并可在抗原刺激后12 h ~5 d 内持续表达[3]。因此可以CD137为标记，从 T 细胞中检测和分离比例较低的抗原特异性 T 细胞。
吴凤麟韦嘉灝贾筠何免邵红伟黄树林
关键词：抗原特异性T细胞TILCD137CD8^+T抗原刺激
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