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国家质检总局科技计划项目(2005IK049)

作品数：5 被引量：10H指数：2
相关作者：唐泰山张吉红陈圣军孔繁德徐淑菲更多>>
相关机构：厦门出入境检验检疫局宁波出入境检验检疫局江苏出入境检验检疫局更多>>
发文基金：国家质检总局科技计划项目厦门市科技计划项目宁波市科技计划项目更多>>
相关领域：农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 7篇农业科学

主题

  • 5篇牛传染性鼻气...
  • 5篇牛传染性鼻气...
  • 5篇鼻气管
  • 5篇鼻气管炎
  • 5篇鼻气管炎病毒
  • 5篇病毒
  • 5篇赤羽病
  • 5篇传染
  • 5篇传染性
  • 5篇传染性鼻气管...
  • 3篇多重PCR
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光定量
  • 2篇实时荧光定量...
  • 2篇SYBR
  • 1篇血凝块
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇提取DNA

机构

  • 6篇集美大学
  • 6篇江苏出入境检...
  • 6篇宁波出入境检...
  • 6篇厦门出入境检...
  • 1篇南京农业大学
  • 1篇连云港出入境...

作者

  • 5篇孔繁德
  • 5篇陈圣军
  • 4篇徐淑菲
  • 4篇张吉红
  • 4篇唐泰山
  • 1篇姚燕林
  • 1篇朱向玲
  • 1篇王海涛
  • 1篇徐晔
  • 1篇周毅
  • 1篇陆承平
  • 1篇段宏安
  • 1篇张睿

传媒

  • 1篇中国动物检疫
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇经济动物学报
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 6篇2013
  • 1篇2008
共 5 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
牛传染性鼻气管炎和赤羽病基因芯片检测方法的建立和应用被引量：5
2013年
为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和赤羽病病毒(AKAV)的双重快速检测方法,本研究根据IBRV gB基因和AKAV S基因序列设计合成了2对特异引物和探针,建立了同时检测这两种病毒的基因芯片检测方法,即以合成探针的5'端添加poly T10尾并氨基化固定于经处理的玻璃基片表面作为捕捉序列,采用荧光素Cy3标记正向引物的5'端,对样品的PCR扩增产物进行检测,并通过试验确定其适宜杂交温度为38℃。该方法检测IBRV和AKAV重组质粒的灵敏度分别为3.6×103拷贝/25μL和9.26×104拷贝/25μL,同时通过对牛的腺病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒及牛白血病病毒等的检测均无交叉反应,表明其特异性强。该检测方法的建立对于加强进出口牛的IBRV和AKAV检验检疫具有十分重要的意义。
陈圣军孔繁德徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：牛传染性鼻气管炎病毒赤羽病病毒寡核苷酸芯片
多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用被引量：2
2013年
为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:该方法能同时扩增得到2条与试验设计相符的311 bp(IBRV)和392 bp(AKAV)特异性条带;IBRV的灵敏度为0.13 pg/25μL,AKAV的灵敏度为1.04 pg/25μL。本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV和AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。
孔繁德陈圣军徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：多重PCR牛传染性鼻气管炎病毒
多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用
为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV-1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性...
孔繁德陈圣军徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：多重PCR牛传染性鼻气管炎病毒
文献传递
SYBR Green I实时荧光定量PCR检测牛传染性鼻气管炎病毒被引量：2
2013年
本研究根据牛传染性鼻气管炎病毒毒(IBRV)gB基因序列设计合成了引物,PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR Green I荧光定量PCR检测IBRV的方法。该方法的检测敏感性达到360copies/25μL,并具有较好的重复性和特异性。本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV的检验检疫具有十分重要的意义。
陈圣军孔繁德徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：IBRV实时荧光定量PCRSYBR
赤羽病SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法的建立和应用被引量：1
2013年
本研究根据赤羽病毒(AKAV)的S基因序列设计合成了引物,RT-PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测AKAV的方法。该方法的检测敏感性达到926拷贝/25μL,并具有较好的重复性和特异性。本试验方法的建立对于加强进出口牛AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。
陈圣军孔繁德徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：实时荧光定量PCRSYBR
多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用
为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV-1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性...
孔繁德陈圣军徐淑菲张吉红唐泰山
关键词：多重PCR牛传染性鼻气管炎病毒
从血凝块中提取DNA的快捷方法
2008年
将7 mL全血去血清后的血凝块用携带不锈钢均质头的均质器裂解后,加入红细胞裂解液处理至无血凝块存在,得到1 mL左右的白细胞提取物,可较完全地去除红细胞成分。白细胞提取物提取的DNA成分经凝胶电泳分析,可得到较清晰的DNA条带。用牛特异性引物从所有血凝块扩增出271 bp的牛特异性条带,用血凝块处理后的细胞沉淀添加病毒悬液提取的DNA作BHV1病毒gB-PCR检测,结果显示添加BHV1的血凝块样品均出现478 bp的BHV1-gB特异性条带。
段宏安陆承平周毅姚燕林王海涛徐晔朱向玲张睿
关键词：DNA纯化血凝块PCR
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