国家自然科学基金(31271262)
- 作品数：8 被引量：32H指数：3
- 相关作者：陈庆伟柯大智李桂琼王丽唐映红更多>>
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- Ghrelin对骨髓源性内皮祖细胞迁移能力的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨ghrelin对体外培养的内皮祖细胞（EPCs）迁移能力的影响及相关的信号转导途径。方法密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞层,接种至纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7～10d后观察细胞形态学改变,以免疫组织化学染色法检测Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-acLDL）,FITC标记的荆豆凝集素l（FITC-UEA-1）,以及CD34、CD133、人血管性血友病因子（vWF）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）特异的酪氨酸激酶受体（Flk-1）,鉴定细胞种类后传代培养。采用不同浓度（10-9～10-6mol/L）的ghrelin干预EPCs后,通过Transwell小室迁移实验检测EPCs迁移能力的变化。用不同浓度（10-9～10-6mol/L）的ghrelin干预EPCs 15min或10-7mol/L的ghrelin干预0～60min,Western blotting检测蛋白激酶B（Akt）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及其磷酸化状态的表达;分别用磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）的特异性抑制剂LY294002和eNOS的特异性抑制剂L-NAME预处理EPCs,检测ghrelin对EPCs迁移及Akt、eNOS及其磷酸化蛋白表达的变化。结果新分离24h内的EPCs近似圆形,培养第4~7天转化为梭形贴壁细胞,培养至第9天后梭形细胞呈条索样排列生长。Dil-acLDL和FITC-UEA-1双染色阳性,CD34、CD133、vWF和flk-1免疫组织化学染色均呈阳性反应。分别用10-9～10-6mol/L的ghrelin干预内皮祖细胞,发现10-8、10-7mol/L的ghrelin可明显促进内皮祖细胞的迁移（P〈0.001）,而更高浓度（10-6mol/L）的ghrelin则可显著抑制EPCs的迁移（P〈0.05）。Ghrelin呈时间和剂量依赖性地促进EPCs表达磷酸化Akt和eNOS;PI3K特异性抑制剂LY294002能明显抑制ghrelin诱导的Akt、eNOS的磷酸化表达（P〈0.05）;eNOS的特异性抑制剂L-NAME能明显抑制ghrelin诱导的eNOS磷酸化表达（P〈0.05）,但对Akt的磷酸化表达无影响。LY294002和L-NAME均能显著抑制ghrelin诱导的内皮祖细胞迁移（P〈0.05）。结论 Ghrelin可通过激活PI3K
- 王丽陈庆伟李桂琼杨彦曹广煜李兴升
- 关键词：GHRELIN内皮干细胞细胞运动
- 血浆活性ghrelin水平在ICU患者病情严重程度评估中的价值
- 2013年
- 目的探讨危重症患者的血浆活性生长激素促分泌物受体的内源性配体(ghrelin)水平的变化及其临床价值。方法选择ICU危重症患者127例,另选30例健康体检者为对照组。应用酶联免疫吸附试验测定血浆活性ghrelin、TNF-α、IL-6水平,同时记录患者生理指标、实验室检查等临床数据。结果危重症患者血浆活性ghrelin水平高于健康对照组(P<0.01);根据急性生理及慢性健康状况评分(APACHEⅡ)≥15分及<15分将患者分为高危组及低危组后,高危组患者血浆活性ghrelin水平高于低危组(P<0.05);危重症患者血浆活性ghrelin水平与体质量指数(BMI)呈负相关(r=-0.348,P<0.05),与TNF-α、IL-6呈正相关(r=0.375,P<0.05;r=0.562,P<0.01)。多元线性逐步回归分析提示IL-6是影响血浆活性ghrelin水平的独立相关因素。结论活性ghrelin在危重症患者外周血中高表达,可能与危重症状态下营养不良及高炎性反应有关,其测定可能有助于病情严重程度的评估。
- 陈晓东陈庆伟王丽
- 关键词：危重症GHRELIN
- 胃促生长素对兔动脉粥样硬化斑块内血管新生的影响及相关机制
- 2015年
- 目的：动脉粥样硬化斑块内血管新生与易损斑块的不稳定与破裂密切相关,本实验观察胃促生长素（ ghrelin）对兔动脉粥样硬化斑块内血管新生的影响及相关机制。方法雄性健康新西兰大白兔30只,随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组（模型组）及ghrelin干预组,每组10只。采取高脂饮食＋球囊损伤内膜的方法建立动脉粥样硬化模型,ghrelin干预组予ghrelin 25μg·kg-1·d-1耳缘静脉注射,其余2组予等量生理盐水耳缘静脉注射,4周后检测各组体重、血脂（甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇）,HE染色测量斑块厚度及内膜中膜厚度比,CD31免疫组化染色检测动脉粥样硬化斑块内新生血管生成密度,实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测各组血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）和血管内皮细胞生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor 2, VEGFR2）的mRNA和蛋白表达,免疫组织化学和 Western 印迹检测斑块内基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）-2、MMP-9的表达。结果（1）模型组和ghrelin干预组体重和血脂变化均无显著性差异（P〉0.05）,均显著高于正常对照组（P〈0.05）；（2）与模型组相比,ghrelin干预组可减少斑块厚度,并显著降低内膜与中膜厚度之比（P〈0.05）；（3）与模型组相比,ghrelin干预组新生血管计数、VEGF及其受体VEGFR2表达显著减少（P〈0.05）；（4）与模型组相比,ghrelin可显著降低斑块内MMP-2和MMP-9的表达。结论 ghrelin能抑制斑块内血管新生促进易损斑块稳定性,其机制可能与ghrelin显著减少斑块内VEGF和VEGFR2表达,抑制MMP-2和MMP-9的生成有关。
- 王丽李桂琼陈庆伟柯大智
- 关键词：胃促生长素血管新生动脉粥样硬化斑块稳定性
- 老年人血清骨硬化蛋白与冠心病及骨质疏松的相关性研究被引量：8
- 2017年
- 目的探讨老年人血清骨硬化蛋白水平与冠心病及骨质疏松的相关性。方法入选重庆医科大学附属第二医院老年心血管科2014年10月至2015年10月因胸痛待查入院行冠状动脉造影的老年患者313例,其中诊断为冠心病的患者163例,非冠心病患者150例,取术前空腹静脉血用ELISA法测定血清骨硬化蛋白水平,同时测定骨密度及血脂、骨转换标志物等生化指标。采用多因素logistic回归模型分析骨硬化蛋白水平与冠心病发生的相关性,用多元线性回归分析影响骨硬化蛋白水平的相关因素。结果 (1)老年冠心病组骨硬化蛋白水平显著低于非冠心病组[(178.035±0.636)pg/m Lvs(180.576±0.608)pg/m L,P<0.05];(2)多因素logistic回归提示老年患者骨硬化蛋白与冠心病发生负相关(OR=0.865,P=0.018),其中骨质疏松患者骨硬化蛋白水平升高可降低罹患冠心病的风险(OR=0.767,P=0.007),非骨质疏松患者骨硬化蛋白与冠心病无相关性(P>0.05);(3)多元线性回归提示骨硬化蛋白水平与腰椎骨密度(β=0.224,P<0.05)、I型胶原氨基端延长肽(β=0.161,P<0.05)、年龄(β=-0.162,P<0.05)显著相关。结论血清骨硬化蛋白与老年患者尤其是合并骨质疏松的老年患者冠心病发生密切相关,并可能在骨-血管轴中发挥信使作用。
- 贺无恙陈庆伟柯大智李桂琼陈靖
- 关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病骨质疏松
- Ghrelin对糖尿病大鼠心肌梗死后心肌重塑基质金属蛋白酶表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的：探讨生长激素促分泌物受体（growth hormone secretagogue receptor,GHSR）的内源性配体ghrelin对糖尿病大鼠心肌梗死后心室重塑基质金属蛋白酶（matrix metalloptoteinases,MMPs）表达的影响。方法：选取7~8周龄的SD大鼠随机分为4组：1单纯心肌梗死组;2糖尿病合并心肌梗死组;3糖尿病合并心肌梗死＋ghrelin干预组;4糖尿病合并心肌梗死＋ghrelin＋GHSR1a特异性拮抗剂[D-Lys3]-GHRP-6干预组。建立链脲佐菌素糖尿病大鼠模型,12周后所有大鼠均结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型。Ghrelin干预组大鼠腹腔注射ghrelin[200μg/（kg·d）],ghrelin＋[D-Lys3]-GHRP-6干预组大鼠分别腹腔注射ghrelin[200μg/（kg·d）]＋[D-Lys3]-GHRP-6[50μg/（kg·d）],其余2组分别腹腔注射等量生理盐水。4周后苦味酸天狼猩红染色检测其心肌纤维化情况,Masson染色检测心肌梗死面积,免疫组织化学和Western blot分别检测左心室心肌组织基质金属蛋白酶2（matrix metalloptoteinase-2,MMP-2）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloptoteinase-9,MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制因子1（tissue inhibitor of metalloprotroteinase-1,TIMP-1）分布与表达变化。结果：与单纯心肌梗死组相比,糖尿病合并心肌梗死组心肌胶原容量分数（P=0.003）、心肌梗死面积明显增加（P=0.001）,MMP-2（P=0.000）和MMP-9（P=0.000）明显增高,心肌间质纤维增生。Ghrelin腹腔注射干预后可明显降低糖尿病心肌梗死大鼠胶原容量分数（P=0.001）、心肌梗死面积（P=0.005）,MMP-2（P=0.001）和MMP-9（P=0.001）表达减少,心肌间质纤维增生减轻。TIMP-1在合并糖尿病的组别中均明显升高（P=0.000）,但3组间无统计学意义（P〉0.05）。Ghrelin的上述效应均被[D-Lys3]-GHRP-6阻滞。结论：Ghrelin可通过抑制糖尿病心梗大鼠心肌组织MMP-2和MMP-9的表达,从而抑制糖尿病心梗大鼠心肌间质纤维化、减少心肌梗死面积,抑制�
- 王丽李桂琼陈庆伟柯大智
- 关键词：GHRELIN糖尿病心肌重塑基质金属蛋白酶
- 老年冠心病伴2型糖尿病患者临床相关危险因素及冠状动脉造影特点分析被引量：9
- 2013年
- 目的探讨老年冠心病伴2型糖尿病患者临床相关危险因素及冠状动脉造影特点。方法471例经冠状动脉造影确诊的老年冠心病（年龄≥60岁）患者，将其分为冠心病伴2型糖尿病组（179例），单纯冠心病组（292例）。对比分析两组患者临床相关危险因素及冠状动脉造影资料。结果多因素非条件的logistic回归分析显示，低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPBG）是2型糖尿病并发冠心病的独立危险因素（P≤0．001）。与单纯冠心病组相比较，冠心病伴2型糖尿病组发生3支病变较多（P〈0．01）、冠状动脉重度狭窄、完全闭塞及弥漫病变比例更高（P〈0．01），其Gensini积分亦显著高于单纯冠心病组（P=0．009）。结论LDL-C、FBG及2hPBG是老年2型糖尿病并发冠心病的独立危险因素，老年冠心病伴2型糖尿病患者冠状动脉累及范围广且程度重。
- 王丽陈庆伟吴庆柯大智况刚
- 关键词：老年人冠状动脉疾病冠状动脉造影
- 稳定性冠心病患者心房颤动与高敏肌钙蛋白T的相关性研究被引量：9
- 2016年
- 目的：探讨稳定性冠心病患者血清高敏肌钙蛋白T（hs-cTnT）水平与其罹患心房颤动（房颤）的相关性。方法：回顾性收集重庆医科大学附属第二医院老年心血管科2013-01至2015-09入院并行hs-cTnT检测的稳定性冠心病患者共1 011例,按基线hs-cTnT水平四分位数分为第一四分位数组（≤7 ng/L,n=283）、第二四分位数组（〉7 ng/L～≤10 ng/L,n=238）、第三四分位数组（〉10 ng/L～≤15 ng/L,n=272）和第四四分位数组（〉15 ng/L,n=218）,对其hs-cTnT水平与房颤发生率的相关性进行分析,进一步通过多因素Logistic回归模型分析稳定性冠心病患者合并房颤的危险因素。结果：1 011例稳定性冠心病患者中,127例（12.6%）合并房颤,单纯型稳定性冠心病患者884例（87.4%）。稳定性冠心病患者合并房颤者较单纯型稳定性冠心病者hs-cTnT更高[17.0（12.0,25.0）ng/L比10.0（7.0,13.0）ng/L,P〈0.01]。随着基线hs-cTnT水平的升高,各四分位组房颤发生率分别为4.6%（13/283）、4.6%（11/238）、11.0%（30/272）和33.5%（73/218）,趋势检验差异有统计学意义（P〈0.01）。多因素Logistic回归模型校正常见危险因素（性别、年龄等）后显示,基线hs-cTnT第四四分位组（最高四分位数）罹患房颤的风险为第一四分位组（最低四分位数）的5.324倍（95%可信区间：2.285～12.405,P〈0.01）。结论：稳定性冠心病患者中,hs-cTnT升高与其罹患房颤密切相关。
- 唐映红陈庆伟柯大智李桂琼邓玮
- 关键词：冠状动脉疾病心房颤动肌钙蛋白T
- ghrelin对糖尿病大鼠缺血诱导的血管新生障碍的影响及相关机制被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨生长激素促分泌物受体（GHSR）的内源性配体ghrelin对糖尿病大鼠缺血诱导的血管新生障碍的影响及相关机制.方法 选取7～8周龄的SD大鼠,用完全随机化法分为6组：（1）正常对照组,（2）单纯糖尿病组,（3）单纯心肌梗死（MI）组,（4）糖尿病合并MI组,（5）糖尿病合并MI＋ ghrelin干预组,（6）糖尿病合并MI＋ ghrelin＋ GHSR1a特异性拮抗剂D-Lys3-GHRP-6干预组.建立链脲佐菌素（STZ）糖尿病大鼠模型,3个月后结扎冠状动脉左前降支建立急性MI模型.ghrelin干预组大鼠腹腔注射ghrelin（200 μg·kg-1·d-1）,ghrelin＋ D-Lys3-GHRP-6干预组大鼠腹腔注射ghrelin（200μg·kg-1·d-1）＋ D-Lys3-GHRP-6（50 mg· kg-1·d-1）,其余组别分别腹腔注射等量生理盐水.4周后超声心动图检测各组大鼠心功能,CD34免疫组织化学检测MI边缘区微血管生成密度（MVD）,Masson染色检测MI面积,实时荧光定量-PCR和Western blot分别检测MI边缘区血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长因子受体1（Flt-1）和血管内皮细胞生长因子受体2（Flk-1）的mRNA及蛋白表达.结果 （1）与单纯MI组比较,糖尿病合并MI组梗死边缘区MVD[（15.3±1.0）个比（20.7±1.6）个,P＜0.05]、左心室射血分数（LVEF）[（64.2±3.4）％比（81.3±3.8）％,P＜0.01]、左心室短轴缩短率（LVFS）[（31.7±1.1）％比（48.8±3.3）％,P＜0.01]较低,MI面积较大[（55.8±3.1）％比（35.7 ±2.5）％,P＜0.01],梗死边缘区VEGF及其受体Flt-1、Flk-1的基因和蛋白表达差异均有统计学意义（P均＜0.001）.（2）与糖尿病合并MI组比较,糖尿病合并MI＋ghrelin干预组梗死边缘区MVD[（17.7±1.3）个比（15.3±1.0）个,P＜0.05]、LVEF[（83.9±6.3）％比（64.2±3.4）％,P＜0.001]、LVFS[（44.5±3.1）％比（31.7±1.1）％,P＜0.001]较大,MI面积较低[（35.4±4.37）％比（55.8±3.1）％,P =0.005],梗死边缘区VEGF及其受体Flt-1、Flk-1�
- 王丽陈庆伟柯大智李桂琼吴志勤
- 关键词：糖尿病心肌梗死
